Основний зміст роботи - Надшвидке заморожування та відтавання ембріонів корів з використанням мембраностабілізуючих речовин
Огляд літератури. Складається з 5 підрозділів, у яких наведено дані літератури стосовно заморожування ембріонів, використання кріопротекторів для їх кріозахисту, впливу різних факторів на вихід придатних ембріонів, їх життєздатність та приживлення деконсервованих ембріонів у реципієнтів.
Загальна методика та основні методи досліджень. Дослідження виконано у лабораторії біотехнології відтворення тварин Інституту біології тварин УААН, господарствах "Україна" Буського, "Правда" Бродівського районів Львівської області та ЛНВЦ "Західплемресурси".
Експерименти проводили на коровах та телицях української чорно-рябої молочної породи та голштинізованої худоби європейської селекції. Вимивання ембріонів, їх пошук, морфологічну оцінку, підготовку до заморожування, кріоконсервування та пересадку ембріонів трансферабельних стадій розвитку телицям-реципієнтам проводили відповідно до запланованих досліджень. З метою відпрацювання методичних основ для експериментів з кріоконсервування ембріонів великої рогатої худоби, було проведено дослідження на ембріонах лабораторних мишей лінії СWВА за методом М. Манка (1990). Для індукції суперовуляції корів-донорів використовували схеми гормональної обробки згідно "Інструкції з трансплантації ембріонів" (Москва, 1987). Для вивчення антиоксидантної та мембраностабілізуючої дії біологічно активних речовин і підвищення виходу доброякісних ембріонів було відібрано, за методом аналогів, 4 групи тварин: три дослідних і одна контрольна по десять голів у кожній групі. Коровам-донорам І групи на 2 та 12 день естрального циклу під час гормональної обробки вводили внутрішньом'язово препарат "Філомек". Тваринам другої групи, в ці ж дні статевого циклу, ін'єкували вітамін Е у дозі 200 мг на голову. Третій групі тварин вводили одночасно вітамін Е та "Філомек". Контрольним тваринам вводили по 2 мл фізіологічного розчину. Кров для біохімічних досліджень відбирали з яремної вени корів-донорів на третій день після повторного введення в їх організм вітаміну Е та фосфоліпідного препарату "Філомек". У крові донорів визначали активність глутатіонпероксидази за методом Моіна В. М. (1986); активність каталази за методом Королюка М. Л., Іванова Л. І. (1998); малоновий діальдегід за методом Коробейникова С. М. (1989); гідроперекисі ліпідів за методом Мирончика В. В. (1994).
Об'єктом дослідження були ембріони на стадії морули та бластоцисти до і після кріоконсервування. Для кріоконсервування були використані інтактні, морфологічно повноцінні ембріони мишей і корів, вимиті хірургічним та нехірургічним способами від суперовульованих донорів. Заморожування ембріонів проводили двома методами з метою порівняння їх ефективності.
Кріоконсервування ембріонів програмним методом у пайєтах проводили у середовищі ФСБ Дюльбекко з 1,4 М розчином гліцерину на заморожувачі ЗЕМ-3 виробництва Інституту проблем кріобіології і кріомедицини НАН України (Харків). Для заморожування ембріонів надшвидким методом використовували два середовища: еквілібраційне та вітрифікаційне. Для приготування еквілібраційного середовища використовували 9 мл розчину Дюльбекко з вмістом 20,0 % фетальної сироватки та 1 мл гліцерину, що відповідає 1,4 М розчину гліцерину. Відмиті від забруднення ембріони витримували у цьому розчині 5-10 хвилин, після чого їх переносили у вітрифікаційне середовище. У процентному об'ємі вітрифікаційного середовища знаходилось 25,0 % гліцерину, 40,0 % сахарози та 35,0 % середовища для культивування з 20,0 % фетальною сироваткою теляти. Кріоконсервування надшвидким методом проводили шляхом прямого занурення пайєт з ембріонами у рідкий азот.
У залежності від поставленого завдання, до вітрифікаційного середовища для заморожування дослідних груп ембріонів додавали мембраностабілізуючі речовини, препарат "Філомек" і холін-хлорид. Перш ніж проводити експерименти з вивчення впливу препарату "Філомек" на ембріони, нами були проведені дослідження його дії на якість деконсервованої сперми бугаїв-плідників. Виживання сперміїв після розморожування оцінювали у відсотковому відношенні числа активно рухомих гамет після відтавання до числа активно рухомих сперміїв до заморожування.
Ембріони розморожували у водяній бані при температурі 38 єС до зникнення твердого або аморфного стану. З метою підвищення морфологічної якості і здатності до подальшого розвитку деконсервованих ембріонів корів до середовища для їх культивування після розморожування додавали мембраностабілізуючий препарат "Філомек" у концентрації 0,2 %. Придатні для трансплантації ембріони поміщали у пайєти і пересаджували телицям-реципієнтам. Рівень приживлення ембріонів визначали на 60-ий день після їх пересадки ректальною діагностикою реципієнтів.
Отримані цифрові дані опрацьовували статистично на персональному комп'ютері за допомогою програми Microsoft Office Excel.
Похожие статьи
-
Заморожування ембріон рогатий худоба Актуальність теми. Кріоконсервування ембріонів відкриває значні можливості для використання методу трансплантації...
-
Матеріали та методи досліджень. Дослідження проводили з рослинами озимої пшениці сортів Київська 8, Подолянка, Колумбія, Білоцерківська напівкарликова. У...
-
Актуальність теми. До числа невирішених проблем сучасного тваринництва відноситься зниження рівня природної стійкості тварин, викликаного різними...
-
Сучасний стан і завдання по підвищенню врожайності та поліпшення якості гібридного насіння кукурудзи (огляд літератури) Аналіз джерел літератури, в яких...
-
Дощування транзитний трубопровід У першому розділі "Аналіз основних напрямків удосконалення та розвитку дощувальних машин в Україні" розглянуто сучасний...
-
У Першому розділі дисертації "Теоретичні основи формування економічного механізму раціонального використання та охорони земель сільськогосподарського...
-
Алеломорф молдавський ген зерно Цитоплазматична чоловіча стерильність як приклад нехромосомної спадковості (огляд літератури) Наведено літературний огляд...
-
У вступі розкривається сутність і стан наукової проблеми, її значущість, підстави для розробки теми, обгрунтовується необхідність проведення досліджень....
-
У Вступі обгрунтовано актуальність теми, вказано зв'язок з науковими програмами, сформульовано основні положення, які складають об'єкт, предмет, мету і...
-
Дисертаційна робота виконана протягом 1998-2007 років. Гельмінтологічні та фармакологічні дослідження препаратів виконані на кафедрах паразитології та...
-
Селекція соняшнику на підвищення вмісту олеїнової кислоти (огляд наукової літератури) На основі аналізу сучасного стану і результатів попередніх...
-
Основний зміст роботи - Оптимізація технологічного процесу лущення власнокруп'яних культур
Власнокруп'яний культура лущення технологічний У вступі подано загальну характеристику роботи, розкрито сутність і стан наукової проблеми та її значення,...
-
За темою дисертаційної роботи протягом 1997-2005 років було проведено 7 дослідів на коровах чорно-рябої породи, 3-5-ї лактацій, продуктивністю 3000-5000...
-
Гриб токсикоз продуцент Матеріали та методи досліджень Робота виконувалася в лабораторії мікотоксикології Інституту ветеринарної медицини УААН протягом...
-
Результати аналізу літературних джерел свідчать, що коренева губка завдає значної шкоди насадженням сосни. Вона викликає строкату гниль і є особливо...
-
Загальна характеристика роботи - Оптимізація технологічного процесу лущення власнокруп'яних культур
Актуальність теми. Перспективи розвитку технології виробництва круп на сучасному етапі ринкової реформи в Україні тісно пов'язані, насамперед, з...
-
Дисертаційна робота виконана упродовж 19992008 рр. на кафедрі анатомії і гістології Харківської державної зооветеринарної академії; на базі проблемної...
-
Остеометричний скелет ссавці Актуальність теми. Серед розмаїття біологічного матеріалу, який є об'єктом судової ветеринарної експертизи, суттєве значення...
-
Актуальність теми. У великої рогатої худоби хвороби органів дихання за поширенням займають друге місце після патології органів системи травлення...
-
Клініко-епізоотологічні дослідження. При обстеженні з допомогою епізоотологічного, клінічного і лабораторних методів стада зі 130 корів одного...
-
У Вступі обгрунтовано актуальність дослідження, визначено мету й основні завдання, предмет, об'єкт дослідження, висвітлено наукову новизну одержаних...
-
Актуальність теми . Серед багатьох чинників навколишнього природного середовища, які забруднюють корми та продукти харчування, особливе місце займають...
-
Дослідження проводились упродовж 2002-2005 років на базі кафедри патологічної анатомії Національного аграрного університету, патоморфологічного відділу...
-
Робота виконана у період із 1997 по 2005 роки на базі наукової лабораторії кафедри анатомії і фізіології сільськогосподарських тварин Полтавської...
-
Актуальність теми. Вирощування і утримання домашніх тварин спрямовано на максимальний розвиток їхньої продуктивності при мінімальних затратах. Проте...
-
Дослідження за темою дисертаційної роботи виконувались протягом 19952006 років в Інституті тваринництва та в Інституті тваринництва центральних районів...
-
Актуальність теми. Одним із важливих завдань прикладної фізіології рослин є інтенсифікація виробництва сільськогосподарської продукції з одночасним...
-
Актуальність теми досліджень. Висока яєчна продуктивність птиці досягається введенням у комбікорми високоенергетичних кормів та різних...
-
Актуальність теми. В Україні середня врожайність гречки складає 6,9 ц/га, а валове виробництво її зерна складає близько 274,6 тис. тонн, що не...
-
СУЧАСНІ АСПЕКТИ СИСТЕМИ ЗАХИСТУ ЗЛАКОВИХ КУЛЬТУР В АГРОЕКОСИСТЕМАХ Огляд наукової літератури . Світовий досвід інтенсифікації землеробства за рахунок...
-
Актуальність теми. Відкриття цитоплазматичної чоловічої стерильності (ЦЧС) у рослин - одне з видатних досягнень біологічної науки в ХХ столітті, а...
-
Актуальність теми обумовлена необхідністю здійснювати ефективне агрометеорологічне забезпечення сільськогосподарської галузі і включає агрокліматичне...
-
Актуальність теми. В Україні дослідження хвороб кістяка у дрібних тварин спрямовані переважно на лікування переломів кісток кінцівок, їх ускладнень та...
-
Творчо реалізуючи ідеї І. П.Павлова, пристосовуючи їх до організму сільськогосподарських тварин, О. В.Квасницький розробив ряд нових прийомів та методів і...
-
Актуальність теми. Загальна тенденція розвитку складної мобільної сільськогосподарської техніки в напрямку інтенсифікації виконання технологічних...
-
Актуальність теми. Задоволення потреб населення у продуктах харчування, а переробних підприємств високоякісною сировиною нерозривно пов'язано із...
-
Виноград дуже чутливий до природних умов середовища (грунтів, рельєфу, мікроклімату). Багаторічні дослідження довели залежність якості виноградної...
-
Актуальність теми. Під зерновими й зернобобовими в Україні зайнято 13.2 млн. га, або 46.5 % сільськогосподарських угідь. Врожай соломи становить більш 54...
-
Актуальність теми. У розвиток біологічної науки України ХХ століття суттєвий внесок зроблено доктором біологічних наук, професором Олексієм...
-
Хижі комахи, Семикрапкова корівка - Біологічний захист. Паразити і хижаки комах
Комахи цієї групи вбивають свою жертву або приводять її до загибелі протягом короткого часу і живляться нею. З найбільш поширених хижих комах, що...
Основний зміст роботи - Надшвидке заморожування та відтавання ембріонів корів з використанням мембраностабілізуючих речовин