Основний зміст роботи, Матеріали та методи досліджень - Біотехнологія Т-2 токсину та обгрунтування максимально допустимого рівня його в кормах для молодняку великої рогатої худоби на відгодівлі
Гриб токсикоз продуцент
Матеріали та методи досліджень
Робота виконувалася в лабораторії мікотоксикології Інституту ветеринарної медицини УААН протягом 1987-2004 рр. У дослідах з вивчення дії Т-2 токсину на тваринах було використано 51 голову молодняку великої рогатої худоби чорно-рябої породи. Дослід проводили згідно зі схемою (рис. 1).
Матеріалом мікологічних досліджень були 485 проб кормів, які надходили із сільгосппідприємств різних типів і різних областей України: Дніпропетровської, Донецької, Житомирської, Київської, Сумської, Черкаської та Чернігівської в період збирання й зберігання. Зразки середніх проб відбирали відповідно до діючих державних стандартів (ГОСТ 13586, 3 - 83). Гриби з відібраних зразків виділяли методом серійних розведень суспензій подрібнених на млинку кормів. Для цього наважку подрібненого корму масою 10 г. заливали до 100 мл стерильною водою і струшували протягом 15-20 хв. З одержаної суміші готували послідовні розведення у пробірках 1:1000 та 1: 10 000 і висівали на агаризоване середовище Чапека та Сабуро по 0,1 см3 суспензії. Крім того, гриби виділяли методом розкладання зерен і шматочків корму на агаризоване середовище Чапека в чашках Петрі.
Мікроміцети ідентифікували за визначниками Д. К. Зерова (1971), М. М. Підоплічка (1977), М. С. Даньшина (1985) і Д. Саттона зі співавторами (2001).
Токсичність культуральних рідин ізольованих грибів визначали, вивчаючи їхню дію на тест-мікроорганізм Tetrachimena piriformis. Токсичні та слаботоксичні ізоляти грибів роду Fusarium перевіряли на здатність утворювати Т-2 токсин за розробленим нами експрес-методом. Вміст Т-2 токсину в культурах грибів визначали методом тонкошарової хроматографії (ТШХ). Для цього штам гриба, вирощений на твердому живильному середовищі Чапека, екстрагували 10 см3 етилацетату. Одержані екстракти упарювали й наносили на хроматографічну пластину в кількості 10-20 мкл. Пластини хроматографували у системі розчинників толуол-етилацетат-мурашина кислота в об'ємному співвідношенні 5:4:1. Для виявлення Т-2 токсину пластини обробляли 20%-ним спиртовим розчином H2SO4 з послідовним нагріванням за температури 130°С протягом 3 хв та продивлялися в УФ-променях із довжиною хвилі 254 і 365 нм.
У початкових дослідах використовували Т-2 токсин, одержаний у лабораторії мікотоксикології за ТУ-10-07.77-91 з використанням культури гриба-продуцента FUsarium sporotrichiella var. poae Bilai штам 407/4, переданої нам доктором ветеринарних наук В. В. Рухлядою (Кіровоградський відділ незаразних хвороб Інституту експериментальної і клінічної ветеринарної медицини УААН).
З метою підбору оптимального субстрату для культивування гриба-продуцента, а також для забезпечення максимального нагромадження ним мікотоксину використовували зерно проса, жита, кукурудзи, рису, суміші рис-просо (у співвідношенні 1:1) та рис-жито (1:1). Посіви гриба на різних видах зерна інкубували за температури 24 єС протягом семи і 14 діб у холодильнику за температури 4 єС.
Для визначення оптимального рівня вологості зернового субстрату, придатного для максимального нагромадження ним мікотоксину, гриб-продуцент культивували на просі, житі, кукурудзі, рисі, суміші рису з просом у співвідношенні 1:1 за вологості від 20 до 80%. Культивування здійснювали в термостаті за температури 24 єС упродовж семи діб і у подальшому витримуванні протягом 14 діб у холодильнику за температури 4 єС.
У процесі вивчення основного температурного режиму культивування грибами проведено два досліди на зерні жита та рису. Один дослід відбувався за температури 24 єС упродовж семи днів, а потім за температури 4, 10, 24 і 37 єС протягом 14 днів, а другий - за постійної температури 4, 10, 24 та 37 єС протягом 21 доби.
Для одержання необхідної кількості Т-2 токсину була розроблена принципово нова і досконаліша біотехнологія його виробництва. Гриб-продуцент культивували на зерні жита за температури 24 єС протягом семи діб, а потім за температури 4 єС - протягом місяця. Для екстракції мікотоксину з культури гриба-продуцента використовували етилацетат, а не ацетон. При цьому виявлено, що рівень токсину в екстрактах не знижується, але значно зменшується кількість коекстрактивних речовин.
У процесі розробки методу виділення Т-2 токсину нами було застосовано ряд методичних підходів загального характеру. Ми намагалися максимально уніфікувати окремі етапи ізоляції та очищення цього мікотоксину. Насамперед, це стосувалося етапів знежирювання, депротеїнізації й депігментації препарату сирцю. Для очищення і фракціонування мікотоксину застосовували метод колонкової хроматографії. Як тверду фазу використовували силікагель марки "L" (Чехія) та окис алюмінію для хроматографії за ТУ-6-09-3916-75.
Фракціонування здійснювали згідно з методом ступеневого елюювання органічними розчинниками чи їхніми сумішами у порядку зростання полярності. ТШХ виконували на силуфолових пластинках "Silufol" 254 та 365 (Чехія). Ідентифікацію отриманого кристалічного токсину проводили відповідно до "Методических указаний по обнаружению, идентификации и определению Т-2 токсина в пищевых продуктах и продовольственном сырье", затверджених заступником Головного державного санітарного лікаря СРСР 29.12.1984 р.
Вміст Т-2 токсину в культурах грибів та патологічному матеріалі визначали згідно з "Методикой определения микотоксина Т-2 в зернофураже", затвердженою ГУВ МСГ СРСР 28.03.1980 р. і "Методическими указаниями по количественному определению Т-2 токсина в зерне и комбикормах", затвердженими Держагропромом СРСР 26.05.1987 р.
Гостру токсичну дію Т-2 токсину досліджували на семи телятах 2-3,5 - місячного віку, яким через зонд одноразово давали Т-2 токсин у дозі 3 мг/кг живої маси у вигляді розчину на 20-ному% етанолі з водопровідною водою.
Кумуляцію Т-2 токсину вивчали на десяти телятах 6-місячного віку. Дослідним тваринам щоденно, протягом 30 днів, через зонд давали Т-2 токсин у вигляді 0,5%-ного спиртового розчину в дозі 1/10 LD50 (гострої) - 0,323 мг/кг живої маси. Телят перед дослідом і під час досліду клінічно обстежували. Коефіцієнт кумуляції (Кк) вираховували поділом сумарної дози Т-2 токсину, яку давали тваринам протягом 30 днів, на LD50 (гостру) за одноразового введення токсину.
Досліди щодо вивчення хронічної дії Т-2 токсину проводили на 24-х телятах 3-місячного віку чорно-рябої породи, які за принципом аналогів були розподілені на чотири групи по п'ять голів й одну - чотири голови. Молодняку чотирьох груп згодовували Т-2 токсин відповідно у кількості 1,6; 3,2; 6,4 та 12,8 мг/кг комбікорму. Дослід тривав 98 діб.
Для заключного обгрунтування МДР Т-2 токсину в кормах провели дослід на десяти телятах, розподілених на дві групи по п'ять голів. Тваринам протягом 92-х діб згодовували комбікорм, в який додавали зерно жита, уражене грибом Fusarium sporotrichiella var. poae Bilai Штам 407/4. Вміст Т-2 токсину в загальному добовому раціоні становив 0,25 мг/кг корму. Під час досліду телят регулярно обстежували й зважували на 30-ту, 67-му та 92-гу добу. В ці ж терміни брали і досліджували кров тварин.
По закінченні досліду проводили контрольний забій молодняку. Внутрішні органи зважували для виведення вагових коефіцієнтів. Одержані результати експериментальних досліджень статистично опрацьовували за методом І. О. Ойвіна з виведенням середньоарифметичної величини (M), середньоарифметичної похибки (m) та ступеня вірогідності відмінностей (р). Цифрові величини виражали в системі СІ.
Результати досліджень та їх аналіз
Вивчення поширення грибів роду Fusarium на кормах і пошук токсикогенних продуцентів. Під час проведення моніторингових досліджень кормів, які надходили з різних сільгосппідприємств та різних регіонів України на наявність грибів-продуцентів мікотоксинів, було встановлено, що мікобіота кормів досить різноманітна і в основному представлена різними видами мікроміцетів родів Fusarium (26%), Aspergillіus (21,5), Penicillium (18), Alternaria (12) та інші (22,5%).
Гриби роду Fusarium, серед яких виявлено багато продуцентів Т-2 токсину, найчастіше виділялися з кормів Київської та Сумської областей. Їх знаходили в 63 зразках різних кормів, що становить 26%. Найбільше штамів було виділено із пшениці, кормосумішей, комбікорму та ячменю, менше висівали їх із кукурудзи, жита, шроту соняшникового і зовсім не виявляли у сінажі, силосі та трав'яному борошні.
У процесі токсикологічних досліджень було виявлено десять високотоксичних ізолятів потенційних продуцентів Т-2 токсину.
Під час підбору найактивнішого гриба-продуцента Т-2 токсину використовували десять штамів і відомий раніше продуцент Т-2 токсину, наданий профе-сором В. В Рухлядою, які забезпечували найбільшу токсичну дію на тест-об'єкт
Тетрахімена піріформіс. Гриби культивували на зерні жита й проса протягом семи діб у термостаті за температури 24 єС та 14 днів у холодильнику за температури 4 єС. У результаті було виявлено, що найкращий біосинтез Т-2 токсину давав Fusarium sporotrichiella var. poae Bilai Штам 407/4, усі інші були менш активними.
Розробка біотехнології культивування гриба-продуцента з метою максимального біосинтезу Т-2 токсину. Попереднім дослідженням було встановлено, що біосинтез Т-2 токсину залежить від токсичності гриба-продуцента, умов його культивування, виду субстрату, температури, вологості та часу його культивування.
Під час вивчення біосинтезу Т-2 токсину на стерильних зернових субстратах встановлено, що гриб Fusarium sporotrichiella var. poae Bilai Штам 407/4 продукував Т-2 токсин на всіх досліджуваних зернових субстратах (табл. 2).
Таблиця 1. Інтенсивність накопичення Т-2 токсину грибами роду Fusarium, мг/кг
Продуценти |
Номери штамів |
Субстрати | |
Жито |
Просо | ||
F. graminearum |
86/11 |
Сліди |
Сліди |
F. graminearum |
87/9 |
280 |
170 |
F. culmorum |
178/32 |
150 |
130 |
F. culmorum |
189/39 |
220 |
260 |
F. culmorum |
211/41 |
Сліди |
Сліди |
F. sporotrichiella |
244/43 |
320 |
220 |
F. sporotrichiella |
248/44 |
185 |
170 |
F. sporotrichіеlla var. poae |
317/54 |
390 |
270 |
F. sporotrichіеlla var. poae |
334/69 |
126 |
124 |
F. macroceras |
222/23 |
330 |
410 |
F. sporotrichіеlla var. poae |
407/4 |
470 |
330 |
Таблиця 2. Біосинтез Т-2 токсину Fusarium sporotrichiella var. poaе штам 407/4 під час культивування на різних зернових субстратах, мг/кг
Зернові субстрати |
Кількість Т-2 токсину |
Просо |
630 |
Жито |
1350 |
Кукурудза |
350 |
Рис |
1010 |
Суміш рис-просо (1:1) |
310 |
Суміш рис-жито (1:1) |
640 |
Найкращий біосинтез реєстрували на зерні жита, рису, а найменша кількість токсину утворювалася на суміші зерна рис: просо та на кукурудзі.
З літературних публікацій відомо, що види грибів секції Sporotrichiella більш інтенсивно продукують Т-2 токсин, коли культивують спочатку за оптимальної температури росту гриба (25°С), а потім пониженій. Водночас встановлено (В. В. Рухляда, 1989 р.), що більш активне токсиноутворення відбувається під час культивування грибів лише за низької температури (4°С). Тому було вирішено поставити два досліди: один із постійними температурами, а інший зі змінними параметрами.
У процесі вивчення впливу температури на біосинтез Т-2 токсину встановлено, що культивування посівів за постійно низьких температур сприяло накопиченню Т-2 токсину в усіх зернових субстратах. Так, температура 4°С була оптимальною для зерна рису та жита.
Спостерігалась закономірність біосинтезу токсину, коли посіви вирощували за температури 24°С, а потім за температури 4°С. Підвищена температура в початковий період сприяла утворенню великої міцеліальної маси гриба, що давало можливість продукувати більше токсину за короткий проміжок часу. Максимальну кількість Т-2 токсину Fusarium sporotrichiella var. poae Bilai Штам 407/4 продукував на зерні жита (табл. 3).
Таблиця 3. Біосинтез Т-2 токсину грибом Fusarium sporotrichiella var. poaе штам 407/4 за різних температур, мг/кг
Температурний режим Культивування гриба |
Рівень токсиноутворення | |
Жито, мг/кг |
Рис., мг/кг | |
4°С - 18 днів |
900 |
1700 |
10°С - 18 днів |
1030 |
900 |
24°С - 18 днів |
300 |
150 |
37°С - 18 днів |
150 |
110 |
|
1700 |
1300 |
|
800 |
1300 |
|
300 |
250 |
Одним з основних факторів, який впливає на біосинтез, як відомо з історії, є вологість.
Під час вивчення впливу вологості штам Fusarium sporotrichiella var. poaе Штам 407/4 вирощували на п'яти зернових субстратах різної вологості (табл. 4).
Таблиця 4. Біосинтез Т-2 токсину грибом Fusarium sporotrichiella var. poaе штам 407/4 за різної вологості зернових субстратів, мг/кг
Субстрат |
Вологість (%) | ||||||
20 |
30 |
40 |
50 |
60 |
70 |
80 | |
Просо |
250 |
350 |
800 |
1200 |
1800 |
200 |
1300 |
Жито |
300 |
300 |
700 |
1500 |
2100 |
3500 |
2100 |
Кукурудза |
300 |
450 |
650 |
800 |
900 |
1200 |
800 |
Рис |
30 |
500 |
720 |
1000 |
1900 |
2300 |
1900 |
Суміш рис: просо |
250 |
350 |
540 |
700 |
900 |
1400 |
1100 |
Дослідженнями встановлено, що оптимальна вологість зерна для біосинтезу Т-2 токсину становила 70% і максимальна кількість токсину накопичувалась на зерні жита та рису. За відсоткової вологості 60% токсиноутворення знижувалося на всіх видах зерна, крім проса, а за вологості 50% - погіршувалося ще більшою мірою і значно зменшилось за 40-20-відсоткової вологості. Отже, вологість субстрату 70% була оптимальною для біосинтезу Т-2 токсину цим грибом.
З метою вивчення терміну культивування гриба-продуцента було досліджено два субстрати - рис і жито в різних умовах вирощування (табл. 5).
Таблиця 5. Біосинтез Т-2 токсину грибом Fusarium sporotrichiella var. poaе Штам 407/4 на зерні жита і рису під час культивування в різних режимах інкубування та різних термінів
Субстрати |
Рівень біосинтезу Т-2 токсину під час культивування гриба, мг/кг | ||
Сім днів - 24°С, 30 днів - 4°С |
|
| |
Рис |
3650 |
2030 |
2170 |
Жито |
4210 |
3840 |
3110 |
У результаті проведених досліджень було встановлено, що гриб-продуцент Fusarium sporotrichiella var. poae Bilai штам 407/4 найкраще біосинтезував Т-2 токсин (4,2 г/кг) на зерні жита під час культивування його протягом семи діб за температури 24 єС з подальшим витримуванням упродовж 30 діб у холодильнику за температури 4 єС.
Розробка методів екстрагування, очищення та кристалізації. Одним з основних етапів біотехнології виробництва Т-2 токсину є його екстрагування, очищення та кристалізація.
Екстракцію Т-2 токсину з культури гриба тричі проводили етилацетатом, що значно зменшує кількість коекстрактивних речовин. Екстракт упарювали на ротаційному випарювачі за температури 45-50°С. Відомо, що використання для культивування грибів зернових субстратів суттєво підвищує продукцію мікотоксинів, але й такою мірою ускладнює їх очищення через присутність значних ліпідних компонентів, білкових та пігментних речовин. Депротеїнізацію здійснювали 10%-ним розчином оцтового свинцю, що забезпечувало часткове очищення.
Депігментацію розчину проводили, застосовуючи активоване вугілля БАВ-1 у полярній системі етанолу, що сприяло ефективнішому хроматографічному розподілу мікотоксинів на колонці. Елюювання з хроматографічної колонки, заповненої окисом алюмінію, із внесенням сухого екстракту токсину здійснювали гексаном, сумішшю гексан: бензол (1:1) і бензолом. Об'єднані та випарувані фракції перевіряли на наявність Т-2 токсину й кристалізували в розчині гексану та ацетону.
Т-2 токсин одержували у вигляді безбарвних голчастих кристалів, добре розчинних в ацетоні, хлороформі, етилацетаті й етанолі. На пластинах "Силуфол" після хроматографування у системі розчинників етилацетат-толуол в об'ємному співвідношенні 3:1 й обробки 20%-ним спиртовим розчином сірчаної кислоти і прогрівання в сушильній шафі за температури 110 єС протягом 3 хв. Т-2 токсин за кімнатного освітлення виявлявся у вигляді темно-сірої плями з Rf 0,42, а під час проявлення в УФ-світлі з довжиною хвилі 365 нм - у вигляді блакитної флуоресціюючої плями.
Ефективним хромогенним реагентом виявився с-анісовий ангідрид, обробка яким силуфолових пластин із подальшим прогріванням за температури 100-130 єС призводить до утворення пурпурово-червоних плям токсину. На пластинах "Силуфол" після хроматографування токсину в системі етилацетат-толуол (3:1) та біоавтографічного проявлення за допомогою Candida pseudotropicalis Штам 44 ПК установлено, що концентрація Т-2 токсину 0,1 мкг давала зону пригнічення росту тест-культури діаметром 10 мм, з Rf 0,42. Температура плавлення Т-2 токсину - 149-152 єС. Проведені дослідження показали, що одержана кристалічна речовина за фізико-хімічними властивостями і за даними ІЧ-спектро-метрії відповідає Т-2 токсину.
Вивчення гострої токсичної дії на телят. Під час вивчення гострої токсичності Т-2 токсину в досліді на телятах установлено, що одноразове пероральне введення його в дозах 3 мг/кг живої маси спричиняє гострий токсикоз. Перші клінічні ознаки гострого отруєння (відсутність апетиту та пригнічення) реєстрували через 5-8 год після введення Т-2 токсину. Через добу клінічні ознаки посилювалися: відмічали тремтіння мязів задніх кінцівок, часте дихання, незначну атонію рубця і часте сечовиділення. На другу-третю добу в усіх тварин апетит нормалізувався, а на п'яту спостерігалося тільки часте сечовиділення. Протягом досліду жива маса зменшилася у двох телят. У крові виявлено зниження рівня еритроцитів (Р>0,2), гемоглобіну (Р>0,05) та лейкоцитів (Р>0,01), а також загального білка в сироватці крові (Р>0,2).
Через п'ять діб після одноразового введення Т-2 токсину вміст гемоглобіну в крові дещо нормалізувався, зменшилася кількість лейкоцитів, знизився рівень загального білка. Таким чином, Т-2 токсин в одноразовій дозі 3 мг/кг живої маси виявився сильнодіючою речовиною на організм телят.
Вивчення кумулятивних властивостей Т-2 токсину в організмі телят. Дослідженням кумулятивних властивостей Т-2 токсину доведено, що токсин у дозі 0,323 мг/кг живої маси, який давали телятам один раз на добу протягом 30 днів, викликав у них слабовиражене хронічне отруєння. Хронічний Т-2 токсикоз під час згодовування молодняку токсину в зазначеній дозі проявлявся відсутністю чітко виражених клінічних ознак токсикозу, малою рухливістю, пригніченням тварин та зменшенням живої маси.
У дослідних телят, забитих через добу після останнього введення Т-2 токсину, виявляли катаральне запалення слизової оболонки рубця біля входу в стравохід, катаральне запалення з незначними крововиливами слизової оболонки сичуга.
Отже, за результатами досліду можна зробити висновок про те, що Т-2 токсин належить до речовин, які мають слабкі кумулятивні властивості, коефіцієнт кумуляції становить 3 одиниці. Сумарна доза Т-2 токсину 9,69 мг/кг живої маси, що дорівнювала 3 LD50 гострої, викликала у телят слабовиражені клінічні та патологоанатомічні зміни.
Вивчення хронічної токсичної дії Т-2 токсину. Щоденне згодовування телятам комбікорму з Т-2 токсином у кількості 1,6 і 3,2 мг/кг комбікорму не викликало у них будь-яких проявів отруєння. Тварини дослідних груп, які поїдали корм з Т-2 токсином, були рухливі, за ростом та розвитком не відрізнялися від контрольних, мали гарний волосяний покрив. У них не відмічали пошкодження слизових оболонок губ і ротової порожнини. Під час гематологічних дослід-жень не виявляли достовірних змін у дослідних телят.
Т-2 токсин у дозі 6,4 мг/кг комбікорму викликав у тварин не чітко виражені клінічні ознаки отруєння. Телята добре поїдали корм, були активними та рухливими. Лише в одного теляти спостерігали затримку линьки, а у другого під кінець досліду - слизові виділення з носових ходів. Тварини відставали в рості та розвитку порівняно з контрольними, у них знижувалися середньодобові прирости маси тіла (Р>0,02). Під час гематологічних досліджень було виявлено недостовірне зниження вмісту гемоглобіну і білка в сироватці крові.
У телят, які одержували комбікорм, що містив Т-2 токсин у кількості 12,8 мг/кг, відмічали ознаки, характерні для хронічного Т-2 токсикозу. Молодняк протягом місяця досліду добре споживав корм із Т-2 токсином, але через півтора місяці у деяких тварин реєстрували слизові виділення з носових ходів. Через два місяці спостерігали некрози на слизових оболонках початкових відділів носових ходів та на внутрішній частині губ. У двох телят, які залишилися живими, були окремі виразки в носових ходах та на губах і затримка линьки. Троє телят із цієї групи загинули на 14-, 24 - та 60-ту добу від початку досліду. В усіх зазначених тварин під час патологоанатомічного розтину зареєстровано гнійно-фібринозну бронхопневмонію. При цьому не відмічали ніяких змін у травному каналі та інших органах. Причину загибелі телят не можна повністю пояснити згодовуванням їм Т-2 токсину, але є підозра, що Т-2 токсин призвів до виникнення бронхопневмонії внаслідок зниження резистентності організму тварин, особливо до появи в легенях некрозів, які сприяли проникненню інфекції.
Таким чином, вивчення чутливості телят до Т-2 токсину в хронічних дослідах тривалістю 98 діб показало, що Т-2 токсин в дозі 1,6 та 3,2 мг/кг на добу на одну голову у разі при концентрації Т-2 токсину в середньодобовому раціоні 0,27-0,4 та 0,53-0,8 мг/кг не викликав у телят токсичної дії.
Максимально недіюча концентрація Т-2 токсину в кормах для молодняку ВРХ лежить у межах від 0,53 до 0,8 мг/кг корму.
Концентрація Т-2 токсину в кормі для молодняку ВРХ від 1,07 до 1,6 мг/кг знаходиться в межах підпорогової токсичної за тривалого згодовування, оскільки Т-2 токсин у цій концентрації викликав нечітко виражені зміни.
Концентрація Т-2 токсину в кормі для молодняку ВРХ від 2,13 до 3,2 мг/кг знаходилась у межах порогової токсичної за тривалого згодовування, оскільки Т-2 токсин у цій концентрації викликав виражені зміни.
Підвищення дози токсину до 6,4 та 12,8 мг/добу супроводжувалося хронічним отруєнням з більш вираженою клінічною картиною захворювання, змінами в крові у патологоанатомічній картині.
Виходячи з результатів проведених досліджень, максимально допустима добова доза Т-2 токсину для телят за тривалого згодовування дорівнювала 3,2 мг/голову. Максимально допустима кількість Т-2 токсину в кормах дорівнює 0,53 мг/кг корму. Однак, враховуючи "Временные методические указания по разработке ДОК пестицидов в кормах для сельскохозяйственных животных", затверджені ГУВ МСГ СРСР 2.08.1972 р., для телят цю дозу необхідно зменшити в два рази (коефіцієнт безпеки). Зважаючи на це, допустима добова доза токсину на одну голову - 1,6 мг/кг. Отже, гранично допустима концентрація Т-2 токсину в кормах для телят без врахування результатів гістологічних досліджень та досліджень на залишкові кількості Т-2 токсину і його метаболітів в органах і тканинах дорівнює 0,265 мг/кг корму.
Визначення МДР Т-2 токсину в кормах для телят та великої рогатої худоби на відгодівлі. Для визначення МДР Т-2 токсину в кормах був проведений дослід з метою вивчення дії на молодняк великої рогатої худоби на відгодівлі корму з вмістом Т-2 токсину в кількості, яка відповідала МДР. Телятам протягом 92-х діб згодовували комбікорм, що містив жито, уражене грибом-продуцентом Т-2 токсину, концентрація Т-2 токсину в комбікормі становила 1,6 мг токсину на 1 кг комбікорму. Рівень Т-2 токсину в середньодобовому раціоні сягав близько 0,25 мг/кг корму. Загальний стан телят протягом усього досліду нічим не відрізнявся від контрольних. На основі цього встановлено, що молодняку великої рогатої худоби на відгодівлі можна згодовувати корми, які містять Т-2 токсин у кількості 0,25 мг/кг корму.
Похожие статьи
-
Актуальність теми . Серед багатьох чинників навколишнього природного середовища, які забруднюють корми та продукти харчування, особливе місце займають...
-
За темою дисертаційної роботи протягом 1997-2005 років було проведено 7 дослідів на коровах чорно-рябої породи, 3-5-ї лактацій, продуктивністю 3000-5000...
-
Актуальність теми. В останні роки епізоотична ситуація у світі з туберкульозу залишається нестабільною, а в деяких регіонах погіршується (Pavlik I.,...
-
У Вступі обгрунтовано актуальність теми, вказано зв'язок з науковими програмами, сформульовано основні положення, які складають об'єкт, предмет, мету і...
-
На основі встановлення прояву специфічної алергічної відповіді на ППД-туберкулін у телят з 16-денного віку, можливість прояву у молодих тварин явища...
-
При первинній оцінці напруженості епізоотичного процесу в стаді інтенсивність прояву внутрішньошкірної алергічної реакції мала тенденцію до підвищення...
-
Алеломорф молдавський ген зерно Цитоплазматична чоловіча стерильність як приклад нехромосомної спадковості (огляд літератури) Наведено літературний огляд...
-
Сучасний стан і завдання по підвищенню врожайності та поліпшення якості гібридного насіння кукурудзи (огляд літератури) Аналіз джерел літератури, в яких...
-
Дисертаційна робота виконана протягом 1998-2007 років. Гельмінтологічні та фармакологічні дослідження препаратів виконані на кафедрах паразитології та...
-
Висновки - Туберкульоз молодняку великої рогатої худоби (Епізоотологія та діагностика)
1. У дисертаційній роботі наведене теоретичне узагальнення і нове вирішення наукових завдань щодо особливостей ланок епізоотичного процесу і прояву...
-
При вивченні епізоотологічних особливостей туберкульозу молодняку великої рогатої худоби основну увагу було сконцентровано на оцінці чинників, які...
-
Селекція соняшнику на підвищення вмісту олеїнової кислоти (огляд наукової літератури) На основі аналізу сучасного стану і результатів попередніх...
-
Дослідження за темою дисертаційної роботи виконувались протягом 19952006 років в Інституті тваринництва та в Інституті тваринництва центральних районів...
-
Анотація - Туберкульоз молодняку великої рогатої худоби (Епізоотологія та діагностика)
Шевчук В. М. Туберкульоз молодняку великої рогатої худоби (епізоотологія та діагностика). - Рукопис. Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата...
-
Аннотация - Туберкульоз молодняку великої рогатої худоби (Епізоотологія та діагностика)
Шевчук В. Н. Туберкулез молодняка крупного рогатого скота (эпизоотология и диагностика). - Рукопись. Диссертация на соискание ученой степени кандидата...
-
Дисертаційна робота виконана упродовж 19992008 рр. на кафедрі анатомії і гістології Харківської державної зооветеринарної академії; на базі проблемної...
-
У розділі наведено огляд результатів досліджень з селекції тритикале ярого. Показано, що залишаються невирішеними наступні питання: підвищення потенціалу...
-
Телятам необходим протеин высокой биологической ценности, так как синтез бактериального белка в преджелудках практически отсутствует. Полноценный по...
-
Дані епізоотологічного моніторингу свідчать про динамічність розвитку епізоотичної ситуації з туберкульозу великої рогатої худоби в Україні: з 1995 по...
-
1. В неблагополучних з туберкульозу господарствах розпочинати проведення діагностичних досліджень на туберкульоз у телят з 30-денного віку. 2....
-
За даними епізоотологічних досліджень, особливостями епізоотичного процесу туберкульозу великої рогатої худоби в Україні є постійність у часі і...
-
Нормальне функціонування тваринницьких ферм можливо при стабільному водопостачанню, яке забезпечує сукупність системи: джерел води, водозабірних споруд,...
-
Актуальність теми. Під зерновими й зернобобовими в Україні зайнято 13.2 млн. га, або 46.5 % сільськогосподарських угідь. Врожай соломи становить більш 54...
-
Робота виконана впродовж 1990-2003 років у відділі профілактики хвороб птиці Інституту птахівництва УААН. Дослідження проводили на індиках кросу "Хідон"...
-
Експериментальна частина досліджень виконана в 2002-2007 рр. на базі племрепродуктора ВАТ "Закарпатське племпідприємство". Об'єктом досліджень слугували...
-
Актуальність теми. Задоволення потреб населення у продуктах харчування, а переробних підприємств високоякісною сировиною нерозривно пов'язано із...
-
Утримання худоби в літній період відрізняється від зимового характерним типом годівлі, а також тим, що тварини перебувають майже цілу добу на відкритому...
-
Способи утримання тварин у скотарстві залежать від віку тварин, напряму продуктивності, мети використання, технології виробництва та пори року....
-
Характерною особливістю інтенсифікації виробництва молока на промисловій снові є його висока ефективність і поліпшення умов праці. Цього досягають у...
-
Робота виконана у період із 1997 по 2005 роки на базі наукової лабораторії кафедри анатомії і фізіології сільськогосподарських тварин Полтавської...
-
Проектирование, строительство, реконструкция животноводческих предприятий осуществляются в соответствии с НТП и СниП. Все животноводческие фермы строятся...
-
Скотоводство - одна из основных отраслей животноводства, является основным источником продуктов питания для человека, сырья для легкой и перерабатывающей...
-
Лікування та його обгрунтування - Папіломатоз вим'я у корови (papillomatoza uberis)
Боротьба з пухлинними захворюваннями є дуже складною. Заходи профілактики новоутворень обмежуються лише раннім виявленням пухлин у тварин з наступним їх...
-
Биологические особенности животных Молодняк крупного рогатого скота по своим особенностям отличается от взрослых особей. При рождении у теленка уже есть...
-
Для правильного выращивания молодняка крупного рогатого скота необходимо соблюдать следующие зоогигиенические правила:Полноценное кормление и правильное...
-
Висока компетентність вченого у фізіологічних і метаболічних процесах організму стали підгрунтям ефективних винаходів та конструкторських вирішень з...
-
Основна мета вирощування молодняку -- поповнення стада високопродуктивними тваринами. Щоб виростити худобу, яка б у повній мірі проявляла генетично...
-
Дорослі свині на відгодівлі (вибракувані матки і кнури) це молодняк, призначений для відгодівлі до маси 120--130 кг, а також вибракувані дорослі тварини...
-
Диспепсия молодняка - Болезни животных. Ветеринарная хирургия
Диспепсия - заболевание молодняка молозивного периода, характеризующееся острым расстройством пищеварения, поносом, гипогаммаглобулинемией, нарушением...
-
Опрацьовані нами матеріали засвідчують цілеспрямований хід дослідницької діяльності О. В.Квасницького - детальне вивчення шлункового травлення з метою...
Основний зміст роботи, Матеріали та методи досліджень - Біотехнологія Т-2 токсину та обгрунтування максимально допустимого рівня його в кормах для молодняку великої рогатої худоби на відгодівлі