Розробка експрес-методу визначення каротиноїдів в сировині рослинного походження [8] - Гібридні методи. Газова хромато-мас-спектрометрія
Дана стаття присвячена розробці експрес-методу ідентифікаціі каротиноїдів в лікарській рослинній сировині з допомогою мас-спектроскопії в поєднанні з УФ-спектроскопією і хроматографією, що дозволяє швидко і надійно ідентифікувати каротиноїди в сумарних витягах з сировини без попереднього поділу на компоненти.
З усіх класів природних пігментів каротиноїди, мабуть, найбільш широко поширені і, безсумнівно, належать до числа найбільш важливих з'єднань. Вони виявлені у всіх представників рослинного царства як в фотосинтезуючих, так і в нефотосинтезуючих тканинах, а також часто зустрічаються у мікроорганізмів. Каротиноїди та їх похідні мають велике значення для тварин, оскільки є основою зорових пігментів, відповідальних за сприйняття світла і розрізнення кольорів.
Найбільш важливими рослинними джерелами каротиноїдів є корнеплоди моркви, гарбуза, шипшини, томату, квітки нагідок і т. д.
Для якісної ідентифікації каротиноїдів в рослинній сировині використовують фізико-хімічні методи, в першу чергу УФ-спектроскопію і хроматографію. Нами показана можливість ідентифікації каротиноїдів в сировині крім вище названих методів також за допомогою мас-спектроскопії, що дозволяє швидко і надійно ідентифікувати каротиноїди в сумарних витягах з сировини без попереднього розділення на компоненти.
Метою цього дослідження була розробка експрес-методу визначення каротиноїдів в об'єктах рослинного походження за допомогою фізико-хімічних методів, в тому числі мас-спектроскопії. Для виявлення каротиноїдів і їх ідентифікації в рослинній сировині використовували плоди шипшини колючого. Так як каротиноїди є ліпофільними компонентами рослин, для їх виділення використовували екстракцію гексаном. Для цього повітряно-суху сировину плодів шипшини колючими в кількості 5,0 г обробляли гексаном в апараті протягом 8 годин. Отримане витяг згущували в випарнику ротаційному ІР-1 до невеликого об'єму.
До 0,5 мл отриманого згущеного вилучення додавали потрійну кількість ацетонітрилу і збовтували на шейкері. Ідентифікацію компонентів в отриманій суміші проводили за допомогою методу мас-спектроскопії. Детекцію мас-спектра проводили на приладі мас-спектрометра " Autoflex II" " MALDI TOF / TOF " фірми Bruker Daltonics - вакуумного приладу, який використовує фізичні закони руху заряджених частинок в магнітних і електричних полях за допомогою іонізації лазером. Пробу отриманої суми в кількості 1 мкл наносили на мішень " MTP 384 targen plate matt steel TF " , висушували і зверху наносили краплю матриці. В якості матриці використовували б-ціанокоричну кислоту, реєстрацію спектрів вели з допомогою програми " Flex Control ", обробку даних здійснювали в програмі " Flex Analis". Виявлення каротиноїдів проводили в діапазоні 460-600 Да.
В результаті отриманий спектр, на якому спостерігається найбільш інтенсивний пік іона із зарядом m/z = 536,515, відповідний молекулярної масі деяких ізомерних форм каротиноідов (альфа, бета, гамма), та m/z = 568,219, відповідний молекулярної масі кисневих похідних каротиноїдів (лютеїн, зеаксантин та ін.) (рисунок 2.2.1).
Рисунок 2.2.1 - Мас-спектр каротиноїдів гексанового вилучення з плодів
Крім каротиноїдів у витягу побічно визначено присутність токоферолів в діапазоні 380-480 Да. Виявлені інтенсивні піки з зарядом іона m/z = 430,374 та 416,426, які за молекулярною масою відповідають альфа-токоферолу та одному з його ізомерних форм (бета або гамма) (рисунок 2.2.2).
Рисунок 2.2.2 - Мас-спектр токоферолів гексанового вилучення з плодів.
Так як каротиноїди утворюють ізомери з однаковою молекулярною масою (альфа, бета, гамма), то для більш чіткої їх ідентифікації реєстрували
УФ-спектри і використовували метод тонкошарової хроматографії.
Каротиноїди мають, як правило, три максимуму поглинання, за якими їх можна відрізнити. УФ-спектри гексанового вилучення реєстрували на спектрофотометрі СФ-56 в гексані в областях 220-550 нм (підтвердження спільної присутності з токоферолами) (рисунок 2.2.3) і 350-550 нм (спектри власне каротиноїдів) (рисунок 2.2.4).
Рисунок 2.2.3 - УФ-спектр гексанового вилучення з плодів шипшини в області 220-550 нм.
Рисунок 2.2.4 - УФ-спектр гексанового вилучення з шипшини в області 350-500 нм.
Наявність максимуму поглинання при довжині хвилі 279 нм відповідає максимуму поглинання токоферолу. Присутність трьох максимумів поглинання при 425, 450 і 480 нм відповідає максимумів поглинання каротиноїдів (найбільш збігаються з бета-каротином і лютеином).
Похожие статьи
-
Газова хромато-мас-спектрометрія - Гібридні методи. Газова хромато-мас-спектрометрія
Вже давно мас-спектрометр розглядають як відмінний детектор для газової хроматографії. Як газовий хроматограф, так і мас-спектрометр являють собою в...
-
Літературний огляд, Гібридні методи - Гібридні методи. Газова хромато-мас-спектрометрія
Гібридні методи Гібридні методи аналізу -- група методів, що базуються на поєднанні різноманітних способів розділення багатокомпонентних сумішей,...
-
Поняття про мас-спектроскопічний метод аналізу - Гібридні методи. Газова хромато-мас-спектрометрія
Мас-спектроскопія - метод дослідження речовини шляхом визначення мас іонів цієї речовини (частіше відношення мас іонів до їхніх зарядів) і їхніх...
-
Поняття про хроматографію - Гібридні методи. Газова хромато-мас-спектрометрія
У 1952 р. англійський учений А. Дж. Мартін і його співробітник А. Джеймс, займаючись аналізом жирних кислот, зробили два дуже важливих спостереження....
-
Апаратура та прилади Устаткування для хроматографії Всі хроматографи мають чотири основні частини: пристрій введення проби, хроматографічна колонка,...
-
ГХ-МС аналіз харчових продуктів - Гібридні методи. Газова хромато-мас-спектрометрія
ГХ-МС використовують для аналізу харчових ароматизаторів. Запропоновано різні методи видалення летких компонентів, пов'язаних з ароматизаторами, з їжі:...
-
Вступ - Гібридні методи. Газова хромато-мас-спектрометрія
Газова хромато-мас-спектрометрія є гібридним методом аналізу, з цієї причини вона повинна розглядатися як поєднання газової хроматографії і...
-
Застосування ГХ-МС у вирішенні завдань безпеки - Гібридні методи. Газова хромато-мас-спектрометрія
Метод ГХ-МС широко використовують для аналізу більшості вибухових речовин до і після вибуху, оскільки інші методи (ЯМР, ІЧ-спектроскопія) не дозволяють...
-
В даний час найбільшу увагу в питаннях дослідження забруднення навколишнього середовища приділяється аналізу природних і стічних вод. ГХ-МС з он-лайн...
-
Устаткування для мас-спектроскопії - Гібридні методи. Газова хромато-мас-спектрометрія
Мас-спектрометрію можна розглядати як сукупність двох окремих процесів: іонізації і поділу іонів по масах і реєстрації утворюються іони. Численні методи...
-
До складу фракцій нафти і нафтопродуктів можуть входити тисячі компонентів. До найпростіших фракцій - природний газ, який складається в основному з...
-
Оцінка на момент закінчення терміну дії опціону Припустимо, що нас цікавить вартість опціону "код" (далі просто "опціон") на момент закінчення його дії....
-
Методи визначення магнію, Методи розділення - Питні мінеральні води
Методи розділення Осадження магній - амоній фосфату. Осад MgNH4PO4 - 6H2O утворюється в амоніачному середовищі, у присутності солей амонію. Для того, щоб...
-
Методи визначення кальцію, Методи розділення - Питні мінеральні води
Для визначення кальцію часто доводиться попередньо видаляти всі елементи, крім лужних і лужноземельних. Методи розділення Електроліз із ртутним катодом....
-
Кристали сульфіду цинку, активовані іонами Мn2+, досліджуються вже досить давно. Будь-яке дослідження спектрів ФЛ кристалів, буде далеко не повним без...
-
, I=1,2,3,...,n, Де P J ? 1 - ваговий коефіцієнт J -го вихідного показника. Розташовуючи значення показника ПJ В порядку зростання, можна визначити...
-
В основі моделі (2.2.) - (2.6) лежить рівняння, яке має вигляд: , Зробимо просте перетворення, зробивши заміну: (2.7) І отримаємо рівняння (2.8): (2.8)...
-
Дослідження взаємного розподілу значень економічних показників і знаходження співвідношень функціонування виробничих систем представляє наступний...
-
Якщо відома факторна модель узагальнюючого економічного показника, то наступним етапом аналізу являється виявлення величини абсолютної і відносної зміни...
-
ВСТУП - Кількісні методи аналізу та їх використання для прийняття управлінських рішень
Кількісні, техніко-економічні економіко-математичні, методи особливо збагатили арсенал прийомів економічного аналізу господарської діяльності. Їх широке...
-
Розробка математичного забезпечення інформаційної системи Характеристика моделей і методів рішення економічної задачі Фінансовий аналіз здійснюється за...
-
Имитационная модель для оптимизации конструкции и режима работы вибрационного высевающего аппарата
ИМИТАЦИОННАЯ МОДЕЛЬ ДЛЯ ОПТИМИЗАЦИИ КОНСТРУКЦИИ И РЕЖИМА РАБОТЫ ВИБРАЦИОННОГО ВЫСЕВАЮЩЕГО АППАРАТА В работе рассматриваются высевающие аппараты...
-
Ключевые факторы повышения конкурентоспособности Казахстана
Ключевые факторы повышения конкурентоспособности Казахстана С помощью метода главных компонент были исследованы уровни взаимосвязей между 111...
-
Описание варианта задания - Вероятность безотказной работы
В данной работе необходимо рассчитать вероятность безотказной работы и произвести анализ и оптимизацию полученной по варианту схемы. Для этого...
-
Одним із перспективних напрямів при дослідженні кристалів ZnS:Mn є дослідження температурних характеристик його спектрів. Нова інформація в цьому напрямі...
-
Теоретичні основи оптимізаційних рішень Умови оптимальності у формі принципу максимуму дають, узагалі говорячи, достатню інформацію для рішення задачі...
-
Метод наименьших квадратов - Основы научных исследований
Пусть проведен однофакторный эксперимент, в котором исследована зависимость У от Х . Установлено, что основные предпосылки регрессионного анализа...
-
Особенности обработки Погрешность данного метода вызвана: длительностью вспышки (0.5мкс), временем срабатывания анализатора (0.7мкс) и шириной канала...
-
Методи наближеного обчислення - Визначений інтеграл
Для деяких неперервних надінтегральних функцій F (х) первісну не можна виразити елементарними функціями. У цих випадках обчислення визначного інтеграла...
-
Математичні методи ціноутворення в околі цінових знижок
МАТЕМАТИЧНІ МЕТОДИ ЦІНОУТВОРЕННЯ В ОКОЛІ ЦІНОВИХ ЗНИЖОК Авторами досліджено, що ефективність рекламних звернень підприємства проявляється як ефект...
-
Для визначення шляхів поліпшення було проведено дослідження інформаційних ланцюгів, згідно визначеної системи роботи підприємства. Рис.3.1 - Розподіл...
-
Програмне забезпечення - сукупність програмних засобів для створення та експлуатації ІС засобами обчислювальної техніки. До складу програмного...
-
Для аналізу відбираємо проби різних мінеральних вод в об'ємі 100 см3 за допомогою мірної колби. Переносимо в конічну колбу на 250 см3, додаємо 5 см3...
-
У роботі розглядаються безперервні функції F З періодом 2p і їх наближення тригонометричними поліномами. Через Tn(x) Позначається тригонометричний...
-
В даний час існує ряд критеріїв для оцінки піно-утворення: 1. Властивості одинарної плівки. Ще Плато встановлено, що час життя плівки обернено...
-
Визначення : Скалярний добуток двох векторів і дорівнює добутку модулів цих векторів на косинус кута між ними . (6.1) Таким чином, скалярний добуток двох...
-
Диференціал, Визначення диференціала. - Основи вищої математики
Визначення диференціала. Формули й правила диференціювання. Використання диференціала для наближених обчислень. Основні теореми диференціального...
-
Визначення закону розподілу магнітної проникності в сталі обмотки ротора. У даному розділі ми розглянемо дві випадкові величини. Це магнітна проникність...
-
Засоби вимірювання - мірні колби на 50, 100, 250 см3; - терези аналітичні та важки до них; - терези технохімічні та важки до них; - циліндри на 10, 25...
-
Постановка і актуальність завдання дослідження Мале підприємство, що функціонує в умовах становлення ринкових відносин, є самостійним економічним агентом...
Розробка експрес-методу визначення каротиноїдів в сировині рослинного походження [8] - Гібридні методи. Газова хромато-мас-спектрометрія