Определение кишечной палочки - Санитарно-микробиологический анализ мороженой рыбы

Метод основан на способности бактерий группы кишечных палочек сбраживать в среде Кесслера лактозу с образованием кислоты и газа. Бактерии группы кишечных палочек - это аэробные факультативно-анаэробных, грамотрицательные, не образующие спор палочки, разлагающие лактозу с образованием кислоты и газа при температуре 37 градусов Цельсия в течении 24 часов (бродильная проба), не обладающие окислительной способностью.

Для индикации бактерий группы кишечных палочек в исследуемом материале 10 грамм продукта и 10 миллилитров исходного разведения продукта засевают во флаконы со 100 мл и 50 мл питательной среды соответственно. По 1мл и 0.1 мл исходного разведения продукта в пробирке с 5 мл питательной среды. По действующим нормативам засевается то количество продукта, в котором нормируется отсутствие бактерий группы кишечных палочек. Допускается засевать 1 грамм продукта в 10 мл питательной среды.

Для индикации БГКП в смывной жидкости с оборудования и рук тампоны или марлевые салфетки опускают в пробирки с 5 мл среды Кесслера. Посевы помещают

В термостат при температуре 37 градусов Цельсия на 24 часа, затем из пробирок и колб с пузырьками газа в поплавках делают посев на плотную на плотную дифференциальную среду - Эндо.

Через сутки после инкубирования в термостате, проводят учет. При наличии на среде Эндо колоний (красных с металлическим блеском и без него розовых), характерных для группы кишечных палочек проводят их изучение. Из изолированных колоний готовят препараты, окрашивают по Граму и микроскопируют. При наличии грамотрицательных, без спор палочек делают заключение о присутствии БГКП.

Для уточнения при обнаружении грамотрицательных, не образующих спор палочек надо провести оксидазный тест: часть колонии со среды Эндо наносят штрихом на фильтровальную бумагу, предварительно смоченную реактивом для определения цитохромоксидазы. Оксидазный тест у кишечной палочки отрицательный и индикаторная бумага не должна изменять цвет (если бумага синеет - оксидазный цвет положительный).

Похожие статьи




Определение кишечной палочки - Санитарно-микробиологический анализ мороженой рыбы

Предыдущая | Следующая