Определение полифенольных соединений по методу Фолина-Чокальтеу - Акт изучения антиоксидантного действия экстрактов Silene in vitro

Приготовление реактива Фолина-Чокальтеу и выполнение анализа.

5 г Na2WO4 2Н20 и 1,25 г Na2МоО4, 2H20 помещали в круглодонную колбу на 200 мл, приливали 35 мл воды и хорошо перемешивали. К полученному раствору добавляют 2,5 мл 85%-ного раствора фосфорной кислоты и 5 мл концентрированной НСl (х. ч.). Колбу присоединяли к обратному холодильнику и кипятили в течение 10 ч. Затем в раствор добавляли 7,5 г Li2S04 , 5 мл воды и одну каплю брома. Раствор перемешивали и нагревали до удаления брома. После охлаждения объем доводили водой до 50 мл, фильтровали и разводили водой до получения 1 н. раствора кислоты. Кислотность определяли титрованием разведенного реактива 0,1 н раствора NaOH в присутствии фенолфталеина.

В пробирке смешивали 5,0 мл водного раствора реактива Фолина-Чокальтеу, предварительно разбавленного в пропорции 1/10, добавляли 1,0 мл экстракта и 4,0 мл 7,5% раствора карбоната натрия. После выдерживания полученного раствора в течение 60 мин при комнатной температуре с помощью спектрофотометра РД-303 АРЕL (Япония) измеряют оптическую плотность растворов при 765 нм.

Содержание полифенольных соединений рассчитывали по эквиваленту рутина, тимола, галловой и протокатехиновой кислот (Таблица 2) на основании данных калибровочных кривых (Рисунок 3).

калибровочные кривые стандартных образцов галловой (а) и протокатехиновой (б) кислот, тимола (в), рутина (г)

Рисунок 3. Калибровочные кривые стандартных образцов галловой (а) и протокатехиновой (б) кислот, тимола (в), рутина (г).

С целью изучения взаимосвязи между величинами АОА и уровнем полифенольных соединений, обуславливающих антиоксидантный эффект в перекисных процессах, выполнен анализ содержания полифенольных соединений по эквиваленту галловой и протокатехиновой кислот, рутина и тимола в исследованных экстрактах по известной методике с реактивом Фолина-Чокальтеу. Результаты приведены в таблице 2.

Таблица 2. Содержание полифенольных соединений по эквиваленту галловой и протокатехиновой кислот, рутина и тимола в исследованных экстрактах (метол Фолина-Чокальтеу).

Экстракт

Стандарты

Количество полифенолов, мг станд. в-ва/мг экстракта.

А

Б

В

Г

1

0,04077±0,00457

0,24807±0,01479

0,17604±0,01392

0,07763±0,00728

2

0,03641 ±0,00748

0,23398±0,02419

0,16278±0,02275

0,06231 ±0,00124

3

0,02217±0,0005

0,18791 ±0,00161

0,11945±0,00151

0,04792±0,0009

4

0,03667±0,0039

0,23478±0,01259

0,16357±0,01188

0,07105±0,00615

5

0,04311 ±0,0008

0,25565±0,0026

0,18317±0,00248

0,08136±0,00129

На основании полученных данных можно сделать вывод, что в ряду исследованных объектов выраженной АОА in vitro обладают экстракты Silene wolgensis (3) и Silene guntensis (4), а наименьшая АОА свойственна Апсаthia igniaria (1). Анализ содержания полифенольных соединений по эквиваленту галловой и протокатехиновой кислот, рутина и тимола и исследованных экстрактах по методу Фолина-Чокальтеу не показал существенных различий по содержанию полифенолов в образцах, т. о. можно констатировать, что общий антиоксидантный эффект суммарного образца зависит от качественного состава экстракта. На основании выше изложенного считаем, что экстракт Silene wolgensis следует рассматривать в качестве потенциального антиоксиданта после установления качественного состава образца, а также рекомендуем его исследовать In vivo При отсутствии токсичности.

Похожие статьи




Определение полифенольных соединений по методу Фолина-Чокальтеу - Акт изучения антиоксидантного действия экстрактов Silene in vitro

Предыдущая | Следующая