Вступление, Определение железо-восстанавливающего потенциала (FRАР - метод), Фосфатный буфер (рН 6,6) - Акт изучения антиоксидантного действия экстрактов Silene in vitro

Целью работы явилось изучение антиоксидантного действия экстрактов Апсаthia igniaria (Spreng.) DС. (1), Silene cretaceae Fish. (2). Silene wolgensis (Нormen) Веss. ех Spreng. (3), Silene guntensis В. Feditsch. (4), Silene fruticulosa (Раll.) Schischk (5) методами определения железо-восстанавливающего потенциала FRАР - Ferric Reduciling Antioxidant Power assey, оценки антиоксидантной активности (АОА) с о-фенантролином и определение общего количества полифенольных соединений по способу Фолина - Чокальтеу.

Эксперименты In vitro были проведены по известным методикам определения антиоксидантного эффекта индивидуальных соединений и суммарных экстрактов.

Определение железо-восстанавливающего потенциала (FRАР - метод)

Реактивы.

Фосфатный буфер (рН 6,6)

Взято: 2,84 г Nа2НР04 в 100мл Н20 и 2,4 г NaН2Р04 в 100мл Н20

Для приготовления 50 мл фосфатного буфера (рН 6,6) надо взять:

18,75 мл р-ра Na2НР04 и 31,25 мл р-ра NaH2Р04

    1.2. 1% раствор гексацианоферрата (III) калия 1.3. 10% раствор. трихлоруксусной кислоты 1.4. 0,1% раствор FeCl3

К 1 мл исследуемых экстрактов в диапазоне концентраций 0-1 мг/мл добавляется 2,5 мл 0,2 М фосфатного буфера (рН 6,6) и 2,5 мл 1% раствора гексацианоферрата (III) калия. Реакционная смесь инкубируется в течение 20 минут при 50°С, реакция останавливается добавлением 2,5 мл 10% раствора трихлоруксусной кислоты и смесь центрифугируют в течение 3 минут (1,5 тыс. оборотов/мин.). Затем 2,5 мл верхнего слоя смешивается с 2,5 мл дистиллированной воды и 0,5 мл 0,1% FeCl3. Измерение оптической плотности производится при 700 им в соответствии с работой Aswatha Ram H. N. et al. (2008). антиоксидантный реагент полифенольный соединение

Полученные результаты отражены на рис.1, из которого следует, что имеет место пропорциональная зависимость между величинами оптической плотности и концентрацией всех исследованных экстрактов. Этот факт указывает на наличие в экстрактах полифенольных соединений, причем, наименее выраженная АОА наблюдается для экстракта Апсаthia igniaria (1), а для Silene cretaceae (2), Silene wolgensis (3), Silene guntensis (4) и Silene fruticulosa (5) активность более выражена. В этом ряду экстрактов на основании данных FRАР - метода можно считать, что самая высокая АОА проявляется у экстракта Silene wolgensis (3).

динамика изменения аоа, установленной с помощью frар - методики

Рисунок 1. Динамика изменения АОА, установленной с помощью FRАР - методики

Похожие статьи




Вступление, Определение железо-восстанавливающего потенциала (FRАР - метод), Фосфатный буфер (рН 6,6) - Акт изучения антиоксидантного действия экстрактов Silene in vitro

Предыдущая | Следующая