Определение ядовитости меда, Исследование меда на наличие антибиотиков - Ветеринарно-санитарная экспертиза меда

Известны случаи отравления людей ядовитым или пьяным медом. Данный вид меда пчелы собирают в период цветения азалии, рододендрона, горного лавра, багульника, дурмана, белены, аконита и других ядовитых растений. Ядовитым началом считают глюкозид андромедо-токсин. Для определения токсичности белым мышам подкожно вводят по 1 мл 50 %-ного раствора меда на дистиллированной воде. Если мед токсичен, то уже в первые часы после введения погибает до 75 % подопытных животных. Остальные гибнут в течение суток. В качестве дополнительного метода, подтверждающего токсичность меда, следует проводить анализ пыльцы. Для этого необходимо знать морфологию пыльцевых зерен основных растений, из нектара которых получается ядовитый мед.

Исследование меда на наличие антибиотиков

В основе определения антибиотиков (стрептомицина, хлортетрациклина, неомицина и эритромицина) лежит принцип диффузии в агар. Отличие в их определении состоит в использовании различных тест-культур, сред и буфера. Для определения стрептомицина необходимы: споры культуры Вас. subtilis, штамм 6633;среда: раствор панкреатического гидролизата мяса (перевар Хоттингера), содержащий аминный азот, двузамещенный фосфат натрия, агар-агар (рН 7,8--8,0);буферный раствор: 1/15 M фосфатный буфер с рН 7,8-- 8,0 (состоящий из 11,612 г Na2HPO4 и 9,073 г NaH2PO4 ). Для приготовления буферного раствора можно использовать соли калия. Каждую навеску соли отдельно растворяют в 1 л дистиллированной воды в мерной колбе, а затем смешивают в соотношении: 9,5 части двузамещенного фосфата натрия и 0,5 части однозамещенного фосфата натрия.

Для определения хлортетрациклина требуются: споры культуры Вас. subtilis, штамм L2;среда: раствор панкреатического гидролизата мяса (перевар Хоттингера), содержащий аминный азот; агар-агар; рН среды 6,1--6,2; буферный раствор цитратно-солянокислый с рН 5,0--5,2. Для приготовления буфера навеску лимоннокислого трехзамещенного натрия 8,6 г растворяют в 400--500 мл дистиллированной воды. В этот же раствор добавляют 5,6 мл соляной кислоты (плотность 1,18--1,19) и доливают дистиллированной воды до 1 л, Все перемешивают и проверяют рН.

Для определения неомицина берут :споры культуры Вас. mycoides, штамм 537; среда: раствор панкреатического гидролизата мяса, содержащий 33 мг % аминного азота (рН 7,8--8,0); фосфатный буфер (рН 7,8--8,0).

Для определения эритромицина необходимы: споры культуры Вас. mycoides, штамм НВ; среда: раствор панкреатического гидролизата мяса, содержащий 33 мг % аминного азота (рН 7,8--8,0); фосфатный буфер (рН 7,8--8,0).

Техника определения. Стерильные чашки Петри диаметром 90--100 мм с ровным плоским дном ставят на стол, отрегулированный по уровню. В расплавленную и затем охлажденную до 45--48 °С среду вносят взвесь спор той культуры, на какой антибиотик исследуют мед, из расчета 20--30 млн. микробных тел на 1 мл среды. Среду со взвесью спор разливают по 10 мл в каждую чашку. После застывания засеянного агара вырезают на его поверхности на расстоянии около 28 мм от центра чашки 6 луночек тонкослойной стерильной трубкой с внешним диаметром 10 мм. Затем от исследуемой пробы в 3 пробирки берут по 1 г меда. В зависимости от того, какой антибиотик определяют, испытуемую пробу разводят соответствующим буфером в соотношении 1:5 и прогревают на водяной бане при 60 °С в течение 10 мин для устранения антибактериальных свойств меда. После остывания содержимого пробирок вносят по 0,1 мл в 2 луночки от каждой навески (для исследования одной пробы используют одну чашку). Чашки переносят в термостат, где выдерживают 18--20 ч при 37 °С. По истечении указанного времени чашки просматривают. Наличие зоны угнетения вокруг луночек указывает на присутствие в меде антибиотика. Такой мед не допускают в продажу, а направляют в кондитерскую промышленность, где его обрабатывают в течение 1,5 ч температурами от 60 до 100 °С, которые разрушают антибиотики.

Похожие статьи




Определение ядовитости меда, Исследование меда на наличие антибиотиков - Ветеринарно-санитарная экспертиза меда

Предыдущая | Следующая