Влияние церулоплазмина на адгезивные свойства лейкоцитов и эндотелия - Патофизиологическая роль церулоплазмина при лейкоцитозах и лейкопениях
На первом этапе эксперимента к цельной крови добавляли растворы Цп различных концентраций (мкг/мл): 100,0; 200,0; 300,0; 400,0; 600,0; что соответствовало 25%, 50%, 75%, 100%, 150% от физиологической концентрации. После инкубации в условиях термостата при 37ОС в течение 30 минут изучали адгезивную способность лейкоцитов. Полученные результаты сравнивали с таковыми у контрольной группы, где при тех же условиях добавляли эквивалентное количество забуференного физиологического раствора.
Результаты исследования представлены в таблице 20. Как видно, Цп повышал адгезию всех популяций лейкоцитов в дозе 100% от физиологического уровня, а в дозе 150% увеличивал адгезию только гранулоцитов.
Проведенный дисперсионный однофакторный анализ показал, что влияние различных доз Цп на адгезивную способность гранулоцитов достоверно в высшей степени для всех объектов данной категории и может составить (>0,95) не менее 60,02% и не более 85,82% от общего влияния всей суммы факторов (таблица 21).
Увеличение адгезии лейкоцитов к эндотелию сосудистой стенки могло быть обусловлено, во - первых, влиянием Цп на экспрессию адгезивных молекул на поверхности гранулоцитов и лимфоцитов, во - вторых, на эндотелиальных клетках.
Для проверки последней гипотезы на втором этапе эксперимента изучали адгезию лейкоцитов к эндотелию, предварительно обработанному различными дозами Цп.
Как видно из таблицы 22, применение Цп в дозах 100% и 150% от физиологического уровня привело к увеличению адгезии гранулоцитов. Адгезивная способность общего количества лейкоцитов не изменилась, поскольку имелась тенденция к снижению адгезии лимфоцитов.
По данным дисперсионного однофакторного анализа, влияние различных доз Цп на адгезию гранулоцитов достоверно, а сила влияния составляет 74,79 % + 6,63 % (таблица 23).
Таким образом, результаты проведенных экспериментов свидетельствуют, что Цп увеличивает адгезию гранулоцитов преимущественно в высоких дозах (100 % и 150 % от физиологического уровня) за счет влияния как на лейкоциты, так и за счет изменения адгезивных свойств эндотелиальных клеток. Воздействие Цп в дозе 100 % приводит к увеличению адгезии лимфоцитов.
Таблица 20
Влияние Цп на адгезивную способность лейкоцитов
(% адгезии, М+m; )
Группы сравнения |
Лейкоциты |
Гранулоциты |
Лимфоциты |
Контроль n=6 |
31,37+4,36; 10,68 |
71,05+3,03; 7,41 |
19,68+6,16; 15,09 |
+Цп 25% n=5 |
27,02+2,03; 4,54 |
64,13+4,69; 10,51 |
18,28+2,84; 6,36 |
+Цп 50% n=5 |
27,98+2,19; 4,89 |
71,76+3,78; 8,46 |
17,49+2,39; 5,34 |
+Цп 75% n=6 |
24,85+2,63; 6,43 |
73,41+0,91; 2,22 |
10,89+2,91; 7,12 |
+Цп 100% n=6 |
50,34+1,57; 3,85 * |
93,54+0,58; 1,42 * |
35,09+2,05; 5,03 * |
+ Цп 150% n=5 |
39,42+1,38;3,09 |
79,27+1,26; 2,93 * |
23,75+2,24; 5,00 |
Примечание. * - р<0,05 по сравнению с группой контроля по t-критерию.
Таблица 21
Влияние Цп на изменение адгезивной способности гранулоцитов. Дисперсионный однофакторный комплекс по оценке силы и достоверности влияния
Разнообразие |
Дисперсии (суммы квадратов) |
Число степеней свободы |
Вариансы (средние квадраты) |
2х =72,92%+5,01% F = 72,92 =14,54 5,01 F = 575,91 =14,54 39,61 Fкрит=2,57 (при р<0,05) |
Факториальное (межгрупповое) |
2879,56 |
5 |
575,91 | |
Случайное (внутригрупповое) |
1069,39 |
27 |
39,61 | |
Общее |
3948,96 |
32 |
123,40 |
Таблица 22
Адгезия лейкоцитов к эндотелию, обработанному Цп (% адгезии, М+m;)
Группы сравнения |
Лейкоциты |
Гранулоциты |
Лимфоциты |
Контроль n=6 |
31,37+4,36; 10,68 |
71,05+3,03; 7,41 |
19,68+6,16; 15,09 |
+Цп 25% n=5 |
26,22+2,16; 4,83 |
69,02+1,33; 2,97 |
15,17+2,16; 4,82 |
+Цп 50% n=5 |
32,90+3,22; 7,19 |
74,94+4,52; 10,09 |
11,34+1,63; 3,64 |
+Цп 75% n=5 |
29,32+2,83; 6,27 |
72,92+5,44; 12,17 |
14,18+2,21; 4,94 |
+Цп 100% n=5 |
35,66+1,97; 4,39 |
96,81+1,59; 3,56 * |
7,42+0,78; 1,74 |
+ Цп 150% n=5 |
28,97+1,21;2,70 |
94,33+1,94; 4,33 * |
6,98+1,33; 2,98 |
Примечание. * - р<0,05 по сравнению с группой контроля по t-критерию.
Таблица 23
Влияние Цп на изменение адгезивной способности гранулоцитов. Дисперсионный однофакторный комплекс по оценке силы и достоверности влияния
Разнообразие |
Дисперсии (суммы квадратов) |
Число степеней свободы |
Вариансы (средние квадраты) |
2х =74,79%+6,63% F = 74,79 =11,28 6,63 F = 606,46 =11,28 53,78 Fкрит=2,74 (при р<0,05) |
Факториальное (межгрупповое) |
3032,29 |
5 |
606,46 | |
Случайное (внутригрупповое) |
1021,88 |
19 |
53,78 | |
Общее |
4054,18 |
24 |
168,92 |
Вывод: влияние фактора достоверно в высшей степени для всех объектов данной категории. Влияние исследуемого фактора может составить (>0,95) не менее 56,62% и не более 92,97% от общего влияния всей суммы факторов.
Представляет интерес изучение влияния Цп на адгезию лейкоцитов к активированному эндотелию, которое имеет место и играет существенную роль в развитии воспалительного процесса.
На третьем этапе эксперимента изучали влияние Цп на адгезию лейкоцитов к активированному эндотелию. Для активации эндотелия использовали гистамин (4-(2-аминоэтил) - имидазолил). Гистамин является одним из медиаторов, участвующих в регуляции жизненно важных функций организма и играющих важную роль в патогенезе ряда состояний. Через Н2 - и в меньшей степени Н1 - рецепторы гистамин в том числе регулирует тонус и проницаемость сосудов, экспрессию адгезивных молекул на поверхности эндотелиальных клеток сосудов, способствует эмиграции лейкоцитов, стимулирует фагоцитоз (93). Гистамин использовался в концентрации 1550 нмоль/л, что в 3 раза превышает физиологическую. На данном этапе эксперимента воздействию различных доз Цп подвергали лейкоциты, а затем изучали их адгезивную способность к активированному гистамином эндотелию. Результаты эксперимента представлены в таблице 24.
Таблица 24
Влияние Цп на адгезию лейкоцитов к активированному гистамином эндотелию (% адгезии, М+m;)
Группы сравнения |
Лейкоциты |
Гранулоциты |
Лимфоциты |
Контроль n=5 |
53,86+3,35; 7,49 |
83,31+2,98; 6,67 |
12,11+1,79; 4,02 |
+Цп 25% n=5 |
51,49+3,08; 6,88 |
81,74+3,37; 7,53 |
16,64+2,44; 5,46 |
+Цп 50% n=5 |
54,43+3,06; 6,84 |
81,82+3,97; 8,88 |
19,79+1,50; 3,36* |
+Цп 75% n=5 |
52,94+2,60; 5,82 |
83,11+2,79; 6,25 |
19,23+1,52; 3,40* |
+Цп 100% n=5 |
64,78+1,82; 4,08* |
96,68+1,34; 2,99 * |
15,53+2,26; 5,05 |
+ Цп 150% n=5 |
60,69+1,58;3,54 |
99,59+0,19; 0,43 * |
10,19+0,90; 2,02 |
Примечание. * - р<0,05 по сравнению с группой контроля по t-критерию.
Необходимо отметить, что гистамин увеличивал адгезивную способность интактных лейкоцитов в 1,7 раза. Полагают, что механизм увеличения адгезии лейкоцитов к активированному гистамином эндотелию связан с транслокацией Е - и Р - селектинов из эндотелиальных секреторных гранул к поверхности клетки (334).
Цп изменяет адгезию лейкоцитов к активированному гистамином эндотелию. Примечательно, что большие дозы Цп (150% и 100% от физиологического уровня) повышают прилипание гранулоцитов, а средние дозы (75% и 50%) - лимфоцитов.
Проведенный дисперсионный однофакторный анализ показал, что влияние различных доз Цп на адгезию гранулоцитов и лимфоцитов статистически значимо (таблицы 25,26).
Таблица 25
Влияние Цп на изменение адгезии гранулоцитов. Дисперсионный однофакторный комплекс по оценке силы и достоверности влияния
Разнообразие |
Дисперсии (суммы квадратов) |
Число степеней свободы |
Вариансы (средние квадраты) |
2х=61,92%+10,58% F = 61,92 =5,85 10,58 F = 262,51 =5,85 44,84 Fкрит=2,77 (при р<0,05) |
Факториальное (межгрупповое) |
1312,55 |
5 |
262,51 | |
Случайное (внутригрупповое) |
807,15 |
18 |
44,84 | |
Общее |
2119,69 |
23 |
92,16 |
Вывод: влияние фактора достоверно с вероятностью >0,01 для всех объектов данной категории. Влияние Цп может составить (>0,95) не менее 32,59% и не более 91,25% от общего влияния всей суммы факторов.
Таблица 26
Влияние Цп на изменение адгезии лимфоцитов. Дисперсионный однофакторный комплекс по оценке силы и достоверности влияния
Разнообразие |
Дисперсии (суммы квадратов) |
Число степеней свободы |
Вариансы (средние квадраты) |
2х=51,27%+13,54% F = 51,27 =3,79 13,54 F = 58,93 =3,79 15,56 Fкрит=2,77 (при р<0,05) |
Факториальное (межгрупповое) |
294,64 |
5 |
58,93 | |
Случайное (внутригрупповое) |
280,03 |
18 |
15,56 | |
Общее |
574,66 |
23 |
24,99 |
Вывод: влияние фактора достоверно с вероятностью >0,05 для всех объектов данной категории. Влияние исследуемого фактора может составить (>0,95) не менее 13,74% и не более 88,80% от общего влияния всей суммы факторов.
Полученный факт может быть объясним следующим образом. Как известно, воспаление - типовой патологический процесс, при котором имеет место активация эндотелия медиаторами воспаления, в том числе гистамином. В то же время, клетками первой линии защиты при повреждении являются нейтрофилы, они первыми проникают в очаг. Вторую линию обороны составляют мононуклеары - лимфоциты и моноциты. Поэтому вполне целесообразным является то, что адгезию гранулоцитов увеличивают большие дозы Цп (100% - 150% от физиологического уровня), то есть высокий уровень Цп, который регистрируется через 48 часов после повреждения. На более поздних этапах, когда уровень Цп снижается (средние дозы - 50% - 75%), увеличивается адгезия лимфоцитов.
Возможно, что рост адгезивной способности лейкоцитов к активированному гистамином эндотелию под влиянием Цп обусловлен его влиянием на юкстакринную активацию лейкоцитов мембранно - ассоциированными молекулами ФАТ с последующей экспрессией СД 11а/СД 18 и СД 11b/СД 18 на поверхности лейкоцитов (116).
Возникает вопрос: изменение адгезивной способности лейкоцитов к активированному эндотелию обусловлено влиянием Цп на сами лейкоциты и/или на эндотелиальные клетки? Для проверки второй гипотезы проведен четвертый этап эксперимента по изучению адгезии лейкоцитов к активированному гистамином эндотелию после его обработки различными концентрациями Цп. В заданных условиях Цп не изменял адгезивную способность лейкоцитов (таблица 27).
Таблица 27
Адгезия лейкоцитов к обработанному гистамином и Цп эндотелию
(% адгезии, М+m;)
Группы сравнения |
Лейкоциты |
Гранулоциты |
Лимфоциты |
Контроль n=5 |
53,86+3,35; 7,49 |
83,31+2,98; 6,67 |
12,11+1,79; 4,02 |
+Цп 25% n=5 |
44,84+3,59; 8,02 |
79,16+3,87; 8,65 |
16,26+0,89; 1,98 |
+Цп 50% n=5 |
45,79+4,57; 10,22 |
85,44+1,72; 3,86 |
10,76+2,07; 4,63 |
+Цп 75% n=5 |
46,52+3,04; 6,80 |
85,85+4,04; 9,04 |
17,04+2,11; 4,72 |
+Цп 100% n=5 |
47,68+2,18; 4,88 |
90,70+3,59; 8,03 |
16,94+2,11; 4,71 |
+ Цп 150% n=5 |
47,40+1,33;2,97 |
88,39+3,15; 7,05 |
17,19+3,27; 7,32 |
Итак, нами получены данные, свидетельствующие о том, что Цп в ходе воспалительного процесса обладает неоднозначным действием на количественный состав лейкоцитов. Во - первых, Цп при воспалении выступает как стимулятор пролиферативной активности белого ростка костного мозга, что должно способствовать увеличению количества зрелых лейкоцитов в периферической крови. Во - вторых, Цп обладает способностью увеличивать адгезию лейкоцитов к активированному гистамином эндотелию за счет изменения адгезивных свойств самих лейкоцитов, а не эндотелиальных клеток. Примечательно, что эта способность лейкоцитов выражена весьма значительно: 99,59% гранулоцитов прилипает к эндотелию сосудистой стенки. Отсюда становится ясным, что несмотря на гиперпродукцию лейкоцитов в костном мозге при воспалении и дополнительную стимуляцию лейкопоэза Цп, количество лейкоцитов в циркулирующем пуле периферической крови снижается за счет увеличения их адгезии к эндотелию и эмиграции в очаг воспаления.
Полученные результаты позволяют высказать предположение о механизмах изменения фагоцитарной функции лейкоцитов при воспалении. Уменьшение активности фагоцитоза напрямую связано со снижением количества фагоцитирующих клеток при воспалении. Как показали наши исследования, Цп снижает количество циркулирующих лейкоцитов в периферической крови за счет нейтрофилов, которые составляют основную часть фагоцитов. Рост интенсивности фагоцитоза свидетельствует об увеличении поглотительной способности фагоцитов под влиянием Цп. По данным литературы, Цп способен влиять на фагоцитарную функцию лейкоцитов, но не за счет опсонизации перевариваемых частиц (391). Как известно, захват отдельным фагоцитом частиц, то есть интенсивность фагоцитоза, представляет собой двусторонний процесс, который зависит от свойств поверхности поглощаемой частицы и фагоцита. В виду того, что Цп увеличивает адгезивные свойства фагоцитирующих клеток он участвует в начальной стадии фагоцитарной реакции - поглощении фагоцитируемых частиц. Последний сопровождается структурно - функциональными сдвигами в цитоплазматической мембране, которые через систему внутриклетоных мессенджеров инициируют функциональные сдвиги во многих системах, ответственных за эффекторные реакции, осуществляемые активированными фагоцитами (респираторный взрыв, движение клеткок, эндоцитоз, секреция и др.). Однако, завершенность фагоцитоза характеризуется образованием фаголизосомы и киллингом и перевариванием поглощенного материала.
Похожие статьи
-
Первой группе интактных животных Цп вводили внутрибрюшинно однократно в дозе 30 мг/кг. 30 мг/кг - доза, составляющая 75% от физиологической концентрации...
-
Для изучения влияния Цп на процессы генерации АФК фагоцитами в условиях in vitro использовали цельную кровь здоровых людей - доноров крови, так как...
-
При лейкоцитозе в ответ на введение пирогенала нами отмечено изменение функциональной активности лейкоцитов. В контрольной группе, по данным ХЛ -...
-
Влияние церулоплазмина на количественный состав лейкоцитов при "невоспалительных" лейкоцитозах На предыдущем этапе работы было показано, что Цп способен...
-
Влияние церулоплазмина на количественный состав и фагоцитарную функцию лейкоцитов при асептическом воспалении Воспалительные процессы различной этиологии...
-
Фагоциты как центральное звено неспецифической защиты организма На современном этапе развития медицинской науки иммунофагоцитарная система...
-
Эксперименты выполнены на 350 белых беспородных крысах и крови 100 здоровых людей - доноров областной станции переливания крови. Все исследования на...
-
Одним из представителей РОФ третьего эшелона является Цп - исключительно активный гликопротеин 2 - глобулиновой фракции сыворотки крови человека и высших...
-
На следующем этапе исследования у нас возник вопрос о возможности влияния Цп на изменение функциональной активности лейкоцитов при воспалении на...
-
Лейкоцитозы и лейкопении - Патофизиологическая роль церулоплазмина при лейкоцитозах и лейкопениях
Реализация неспецифической защиты организма зависит не только от функциональной активности фагоцитирующих клеток, но и от их количественного...
-
Адгезивную способность лейкоцитов изучали по их способности прилипать к эндотелию сосудистой стенки по разработанной оригинальной методике. У крысы под...
-
Введение - Патофизиологическая роль церулоплазмина при лейкоцитозах и лейкопениях
Актуальность исследования. Регуляция количественного состава и функциональной активности фагоцитирующих клеток является актуальной проблемой современной...
-
Реализация функциональной активности фагоцитирующих клеток находится, в том числе, под контролем различных отделов нервной системы и регуляторных...
-
Выражаю благодарность научному руководителю доктору медицинских наук, профессору Людмиле Владимировне Кривохижиной за помощь в планировании и организации...
-
РОФ - функционально разнородная группа белков, способных быстро изменять свою концентрацию при различных нарушениях гомеостаза независимо от природы и...
-
Определение активности церулоплазмина. Активность Цп определяли по методу Тэна Э. В. (175). В пробирку вносили 0,1 мл сыворотки крови, 1 мл 0,4М...
-
Этиология и патогенез В настоящее время установлено, что микроорганизм Helicobacter pylori (HP) является важным участником формирования таких...
-
Аутоиммунные процессы, Ожирение и питание - Изменение при сахарном диабете
На возможность значения аутоиммунного процесса (Nerup J. et all, 1978) в развитии диабета указывают ряд данных: 1) присутствие в островках поджелудочной...
-
"Все регулируется, течет по расчищенным руслам, совершает свой кругооборот в соответствии с законом и под его защитой". И. Ильф и Е. Петров "Золотой...
-
Системная красная волчанка (СКВ). Системная красная волчанка (СКВ) - болезнь неизвестной этиологии с преимущественным системным поражением соединительной...
-
Засуха характеризуется комплексом неблагоприятных условий, приводящих к глубокому дефициту воды в почве и в растении [ Третьяков С. 243-244]. Угнетающее...
-
В каждом организме (животном, растительном или микробной клетке) все время происходят сложные процессы превращения веществ. Велика роль в этих процессах...
-
Роль трансформации при литической инфекции - Строгие постулаты Коха
Согласно общепринятым взглядам, способность вируса вызывать заболевание - это всего лишь побочный эффект работы механизмов, лежащих в основе размножения...
-
Экспериментальные данные за последнее время, как отечественных, так и зарубежных исследователей свидетельствуют о высокой биологической активности...
-
ОНТОГЕНЕЗ. ВОЗРАСТНЫЕ АСПЕКТЫ - Регуляция физиологических процессов
Проблемы возрастных изменений функций мозга рассматриваются в связи с нейропептидом Y. Ламинарное распределение иммунореактивных волокон NPY связывается...
-
Для очищення вод були використані два коагулянта - відходу титанового виробництва за результатами раніше проведених досліджень: - залізо-алюмовмісний...
-
Наряду с заболеваниями слизистой оболочки наиболее распространенными видами патологии полости рта являются болезни зубов (кариес, периодонтит,...
-
Изменения свойств поверхности - Строгие постулаты Коха
Заражение клеток трансформирующими вирусами приводит не только к упомянутым выше изменениям их морфологии и способности к размножению, но и к резко...
-
Психические изменения при эндокринных заболеваниях носят полиморфный характер, но их развитие подчиняется определенным закономерностям, которые сводятся...
-
Подвижность воздуха возникает вследствие разницы температур на различных участках поверхности Земли. В гигиенической практике движение воздуха...
-
Размеры бактериальной клетки обычно составляют от 1 до 15 мкм. Форма клеток очень разнообразна: палочковидные (бациллы), сферические (кокки),...
-
Половые железы у млекопитающих реагируют на действие радиации однотипно. Основное видовое отличие - величина повреждающей дозы, которая тесно связана с...
-
Многочисленными исследованиями показано, что чувствительность к патогенам и характер течения различных инфекционных процессов у насекомых зависит от...
-
Основные свойства фитоценозов В данном разделе рассматриваются только естественные фитоценозы и при этом коренные, или климаксовые (объяснение этого...
-
Начало разработки современной концепции рецепторов и их значения в регуляции функциональной активности клеток и нервных окончаний связано с именем JN...
-
ПРИОРИТЕТАМ ПЕРВОГО ПОРЯДКА: I ЭТАП: медсестра проведет опрос пациента, получит данные об анамнезе жизни, анамнезе заболевания и всех жалоб пациента. II...
-
Паратиф это - инфекционное заболевание преимущественно молодняка домашних и многих видов диких птиц животных и человека. Основным возбудителем его...
-
ОБЩИЕ СВОЙСТВА БИОЛОГИЧЕСКИХ МОТИВАЦИЙ - Система мотиваций
Биологические мотивации характеризуются рядом общих свойств. Генетическая детерминированность Биологические мотивации, будучи тесно связанными с...
-
Существует два типа клеток, в которых "сгорает" сахар (глюкоза). Одни из них глюкоза принимает легко без участия инсулина. Обычно внутри этих клеток...
-
Люди впервые получили инсулин в 1921 году из поджелудочной железы собак Бантинг и Бест приготовили экстракт. В кристаллическом виде в 1926 году Sanger...
Влияние церулоплазмина на адгезивные свойства лейкоцитов и эндотелия - Патофизиологическая роль церулоплазмина при лейкоцитозах и лейкопениях