Результаты исследований и их обработка - Сущность и обнаружение стафилококковых энтеротоксинов

Приготовление отрубево-овощного полуфабриката.

Полуфабрикаты готовились в течение 10 суток с отбором проб для определения титруемой кислотности, рН, КОЕ, подсчУета количества дрожжей в начале эксперимента, через 48 часов, 4 суток, 7 суток и 10 суток. Результаты этих измерений сведены в таблицу _.

Таблица

Время отбора пробы

Дрожже-бактериальная ассоциация

Высев на чашку Петри, кол-во дрожжей

Микроскопирование, кол-во дрожжей

Высев на чашку Петри, кол-во бактерий

РН

Титруемая кислотность

0 часов

9а + La5

15*10^7

19*10^7

1.1 *10^9

6

-

S. bul+La5

10*10^7

9*10^7

2.5 *10^9

6

-

9a/La5

14*10^7

20*10^7

-

6

-

48 часов

9а + La5

6*10^9

4.5 *10^9

17*10^9

6

-

S. bul+La5

0.6 *10^9

0.5 *10^9

6*10^9

6

-

9a/La5

4*10^9

4.5 *10^9

9*10^9

6

-

4 суток

9а + La5

0.5 *10^9

0.7 *10^9

0.66 *10^9

4.5

7.5

S. bul+La5

0.2 *10^9

0.2 *10^9

0.21 *10^9

5

5.2

9a/La5

-

-

0.2 *10^9

5

5

7 суток

9а + La5

04*10^9

0.4 *10^9

3*10^8

4

13

S. bul+La5

0.3 *10^9

0.25 *10^9

2*10^9

5

6

9a/La5

-

-

2*10^9

4

9

10 суток

9а + La5

0.4 *10^9

0.4 *10^9

3*10^8

4

13

S. bul+La5

0.3 *10^9

0.3 *10^9

2*10^9

5

6

9a/La5

-

-

2*10^9

4

10

9а + La5 на отрубево-свекольную среду сразу внесены дрожжи Pichia anomala 9a и Lactobacullus achidophilusS. bul+La5 на отрубево-свекольную среду сразу внесены дрожжи Saccharomyces boulardii и Lactobacullus achidophilus9a/La5 на отрубево-свекольную среду сначала внесены дрожжи Pichia anomala 9a, а на вторые сутки Lactobacullus achidophilus

Иммуноферментный анализ.

Иммуноферментный анализ ставился для 21 одной пробы, включая контроль,

Таблица

№

Исследуемые пробы

Тв./Жидк.

Вносимая проба

1

Контроль (отруби+ свекла)

Твердый

0,5 г

2

P. anomala 9а нативная

Твердый

0,5 г

3

P. anomala 9а убитая

Твердый

0,5 г

4

S. boulardii нативная

Твердый

0,5 г

5

S. boulardii убитая

Твердый

0,5 г

6

P. anomala 9а нативная 2е сутки

Жидкий

0,5 мл + 4 капли 1н NaOH

7

P. anomala 9а убитая 2е сутки

Жидкий

0,5 мл + 4 капли 1н NaOH

8

S. boulardii нативная 2е сутки

Жидкий

0,5 мл + 4 капли 1н NaOH

9

S. boulardii убитая 2е сутки

Жидкий

0,5 мл + 4 капли 1н NaOH

10

P. anomala 9а нативная 5е сутки

Жидкий

0,5 мл + 5 капель 1н NaOH

11

P. anomala 9а убитая 5е сутки

Жидкий

0,5 мл + 5 капель 1н NaOH

12

S. boulardii нативная 5е сутки

Жидкий

0,5 мл + 4 капли 1н NaOH

13

S. boulardii убитая 5е сутки

Жидкий

0,5 мл + 4 капли 1н NaOH

14

P. anomala 9а нативная 7е сутки

Жидкий

0,5 мл + 6 капель 1н NaOH

15

P. anomala 9а убитая 7е сутки

Жидкий

0,5 мл + 6 капель 1н NaOH

16

S. boulardii нативная 7е сутки

Жидкий

0,5 мл + 4 капли 1н NaOH

17

S. boulardii убитая 7е сутки

Жидкий

0,5 мл + 4 капли 1н NaOH

18

Контроль St. aureus

Жидкий

----

Пробы вносились в среду со стафилококком в асептических условиях, а затем ставились на сутки культивироваться при температуре 37 °С. Перед внесением пробы номер 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15 и 17 подверглись температурной обработке (100 °С в течение 15 мин).

Для иммуноферментного анализа были сделаны разведения 1:10, 1:50, 1:100 и 1:200 для проб с S. boulardii. Пробы с P. anomala 9а брались без разведения и в разведениях 1:10, 1:50, 1:100.

В лунки сенсибилизированного планшета для ИФА пробы вносились в соответствии с картой раститровки.

Карта раститровки планшета для ИФА

    * К - отрицательный контроль. ** 18) - положительный контроль

Полученные значения оптической плотности при л = 492 в лунках планшета.

Количество колоний стафилококка, выросших на чашках Петри после суток культивирования с внесенными пробами, фосфолипазная активность, конечный рН проб, а также результаты ИФА приведены в таблице __

Таблица

№ п/п

Исследуемые пробы

Кол-во клеток стафило-кокка, КОЕ

Фосфо-липазная активность, %

РН

ИФА (разведение фильтрата)

Б/р

1;10

1;50

1:100

1:200

1

Контроль (отруби+ свекла)

-

-

4.84

+ (2.4)

-

-

-

2

P. anomala 9а нативная

9

60

5.5

-

-

-

-

3

P. anomala 9а убитая

113

100

6.84

+

+

+ (2.1)

-

4

S. boulardii нативная

568

100

6.6

+ (3.5)

-

-

-

5

S. boulardii убитая

1608

100

6.8

+ (2.3)

-

-

-

6

P. anomala 9а нативная 2е сутки

5

50

8.33

+ (2.8)

-

-

-

7

P. anomala 9а убитая 2е сутки

648

100

7.4

+

+

+

+ (6.1)

8

S. boulardii нативная 2е сутки

3

-

8.45

+

+

+ (2.0)

-

9

S. boulardii убитая 2е сутки

11

-

8.2

+

+

+

+ (8.6)

10

P. anomala 9а нативная 5е сутки

-

-

8.6

-

-

-

-

11

P. anomala 9а убитая 5е сутки

2000

100

8.2

+

+

+

+ (5.1)

12

S. boulardii нативная 5е сутки

1

90

8.15

+

+

+

+ (3.9)

13

S. boulardii убитая 5е сутки

5

90

8.03

+

+

+ (3.5)

-

14

P. anomala 9а нативная 7е сутки

2

60

8.71

-

-

-

-

15

P. anomala 9а убитая 7е сутки

8

60

8.05

+

+

+

+ (3.5)

16

S. boulardii нативная 7е сутки

106

100

8.01

+

+

+ (2.6)

-

17

S. boulardii убитая 7е сутки

8

70

7.79

+

+

+

+ (2.6)

18

Контроль St. aureus

752

100

7.81

+

+ (2.7)

-

-

Из полученных результатов можно сделать вывод, что при использовании дрожжей Pichia anomala 9a для производства

Таким образом проведенные исследования показали, что дрожжи как нативные так и гретые увеличивали продукцию стафилококкового энтеротоксина типа А в 2-4 раза. Молочно кислые микроорганизмы ингибировали продукцию стафилококкового энтеротоксина типа А.

Похожие статьи




Результаты исследований и их обработка - Сущность и обнаружение стафилококковых энтеротоксинов

Предыдущая | Следующая