Качественные реакции, Универсальные, Специфические - Биологические свойства белков

Цветные реакции на белки и б-аминокислоты являются качественными реакциями и обусловлены специфическими группами в радикале. Некоторые из таких реакций широко используются в биохимической практике для изучения структуры и б-аминокислотного состава белков, их количественного определения.

Существует 2 типа цветных реакций:

    1. Универсальные - на все б-аминокислоты и белки. 2. Специфические - только на определенные б-аминокислоты.
Универсальные

Биуретовая реакция обнаружения пептидных связей в белках.

В реакцию вступают все вещества, содержащие в молекуле не менее двух пептидных связей, так как для нее возможна лактам-лактимная таутомерия. При взаимодействии белка со свежеприготовленным раствором гидроксида меди (II) образуется хелатный комплекс фиолетового цвета:

Нингидриновая реакция

Это общая качественная реакция на аминогруппу в б-аминокислотах. При нагревании б-аминокислот с избытком нингидрина происходит дезаминирование, декарбоксилирование и превращение ее в альдегид. Выделившийся аммиак конденсируется с двумя молекулами нингидрина.

Специфические

Используется для обнаружения ароматических и гетероциклических б-аминокислот (фенилаланина, тирозина, триптофана, гистидина). При нагревании белка с концентрированной азотной кислотой образуются нитропроизводные, окрашенные в желтый цвет. При добавлении к ним водной щелочи окраска становиться оранжевой.

Реакция Фоля

Реакция подтверждает присутствие в белках серосодержащих б-аминокислот (цистеина, цистина, метионина). При кипячении белка со щелочью от цистеина легко отщипляется сера с образованием сульфида натрия. Последний, взаимодействуя с ацетатом свинца, образует осадок сульфида свинца черного цвета.

Существуют реакции, позволяющие определить отдельные б-аминокислоты.

Реакция Милона

Используется для обнаружения тирозина, в составе которого имеется фенольный гидроксил. При добавлении к раствору белка реактива Милона (раствор HgNO3 и Hg(NO3)2 в разбавленной азотной кислоте содержащей примесь азотистой кислоты) образует осадок, сначала окрашенный в розовый, а затем в пурпурно-красный цвет. Нагревание до 500С ускоряет эту реакцию.

Реакция Паули

Используется для определения имидазольного кольца (гистидин, гистамин). В имидазоле возможна таутомерия азолов, связанная с переходом атома водорода между атомами азота.

При смешении раствора белка со свежеприготовленным раствором 4-диазобензолсульфокислоты в присутствии карбоната натрия получают вишнево-красное окрашивание, в результате реакции азосочетания.

Реакция Эрлиха

При взаимодействии белка с 4-(N, N-диметиламино)бензальдегидом (реактив эрлиха) в кислой среде определяют наличие триптофана. Это цветная реакция на индол.

Реакция Ваузене

Триптофан, содержащийся в белке, конденсируется с формальдегидом, а затем окисляется нитритом натрия до соединения, которое в присутствии минеральных кислот образует соли сине-фиолетового цвета.

Реакция Адамкевича

Реакция так же используетсядля обнаружения триптофана в белках. Индольное кольцо триптофана взаимодействует в кислой среде с альдегидной группой глиоксиловой кислоты с образованием продуктов конденсации красно-фиолетового цвета.

Реакция Сакагучи

Реакцию используют для определения аргинина в белке. Гуанидиновая группа аргинина сначала окисляется NaOBr, и уже окисленный аргинин при взаимодействии с б-нафтолом образует продукт конденсации красного цвета.

Похожие статьи




Качественные реакции, Универсальные, Специфические - Биологические свойства белков

Предыдущая | Следующая