Оцінка життєздатності пилку на приймочках запилених квіток, Методи визначення життєздатності пилку у вологих камерах (Ван-Тигема, Транковського) - Визначення життєздатності пилку та зародкового мішка
Для достовірної оцінки життєздатності пилку безсумнівне значення має спостереження над його проростанням безпосередньо на рильцях запилених квіток.
З цією метою квітки через 1-2 доби після запилення фіксуються. При фіксації у квітки віддаляється оцвітина пінцетом чи ножицями. Якщо для вивчення використовується різний пилок, то маточки різних комбінацій схрещування фіксуються в окремих пробірках.
Перед вивченням верхню частину стовпчика з рильцем відрізають ножицями або відщипують пінцетом. Для того, щоб пилкові трубки можна було легко розрізнити серед сосочків приймочки, проводять фарбування метиленовим синім. Розчин готують у дистильованій воді з концентрацією приблизно від 0,01 до 0,1%. В результаті фарбування пилкові зерна і трубки ясно виділяються серед сосочків приймочки.
Методи визначення життєздатності пилку у вологих камерах (Ван-Тигема, Транковського)
Метод вологої камери Ван-Тигема
Камера Ван-Тигема складається з предметного скла, до якого за допомогою вазеліну прикріплюють скляне кільце діаметром близько 1,5 см і висотою 7-8 мм. На дно камери поміщають невелику краплю води, а верхній край кільця змащують вазеліном. Потім на нижню поверхню покривного скла за допомогою скляної палички наносять краплю живильного середовища для пророщування пилку. Для посіву пилку плодових рослин зазвичай беруть концентрації розчину сахарози - від 5 до 40 %. Точну концентрацію встановлюють експериментально для кожної досліджуваної культури. На краплю живильного середовища висівають пилок.
Пилок набирають на кінчик препарувальної голки або пінцета і обережно струшують на поверхню краплі. При посіві пилку слід уникати занурення голки в краплю розчину. Будучи розпорошеними по поверхні краплі, пилкові зерна знаходяться в більш однорідних умовах і розташовуються майже в одній площині, внаслідок чого полегшується спостереження під мікроскопом. Потрібно намагатися, щоб у межах однієї краплі було розсіяно близько 100 пилкових зерен (густий посів сприятливо впливає на проростання пилку). Після посіву покривне скло перевертають краплею вниз і накривають їм скляне кільце так, щоб скло щільно прилягало до країв кільця, змазаних вазеліном. Крапля з посіяним пилком повинна перебувати у висячому положенні посередині, не стикаючись з краями камери, інакше вона розтікається (рис. 1).
Рис. 1. Будова камери Ван-Тигема
Наявність краплі води на дні такої герметичної камери забезпечує підтримку в ній необхідної вологості. На приклеєній до предметного скла паперовій етикетці записують необхідні відомості: походження пилку, концентрація розчину, дата і час посіву, прізвище студента.
Метод вологої камери Д. А. Транковського
При посіві пилку за методом Д. А. Транковского, який набув останнім часом широкого застосування, посів проводиться у краплі живильної суміші, яка нанесена на предметне скло, після чого скельця з висіяним пилком поміщаються на підставки у вологу камеру - чашки Петрі. (Досвід показав, що краплі з живильним середовищем можна наносити прямо на внутрішню сторону кришки чашки Петрі, без предметних скелець).
Ще однією модифікацією цього методу є занурення предметних скелець у стаканчик з робочою сумішшю такого складу: 1 % розчин агару на дистильованій воді з додаванням хімічно чистої сахарози (концентрація сахарози може бути 5 %, 10 або 15 %, залежно від досліджуваної культури). Після занурення на верхній поверхні утворюється тоненький шар агару, на який зручно провадити посів пилку, з нижньої поверхні предметного скельця зайвий шар розчину стирають серветкою. Скельця укладають на дерев'яні підставочки на дно чашки Петрі. Під підставочки для зволоження кладеться змочений водою фільтрувальний папір. Чашки закривають кришками. Вологі камери з посіяним пилком тримають в затемненому місці.
Пилок проростає цілком задовільно при температурі від 12 єС до 24 єС (оптимальна температура +18-20 єС). У мікроскоп пилок розглядають зазвичай через добу після посіву, але при температурі +20-24 єС для проростання буває достатньо 4-5 годин. Камеру або чашку Петрі розташовують на предметному столику мікроскопа, розглядають пророслий пилок і підраховують пророслі і непророслі пилкові зерна. До уваги приймаються лише пилкові зерна, що знаходяться в межах краплі. Пилок, потрапивши в живильний розчин, набрякає і стає округлішим. За цією ознакою ці пилкові зерна легко відрізнити від пилкових зерен, що опинилися на сухій частині скла. Відсоток пророслих пилкових зерен визначають не менше, ніж в 5-и полях зору, шляхом підрахунку в кожному полі зору пророслих і не пророслих пилкових зерен. Обчислюють відсоток проростання, заповнюють відповідну таблицю.
Таблиця 1 Визначення життєздатності пилку за методом Д. А. Транковського
Вид рослини |
*** | |||||
Стан пилкових |
Поле зору |
Середній | ||||
Зерен |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
Відсоток |
Кількість |
Проростання | |||||
Пророслих |
Пилку | |||||
Кількість | ||||||
Непророслих | ||||||
Пророслі | ||||||
У кожному полі зору, | ||||||
% |
Метод випробування життєздатності пилку шляхом посіву в штучному середовищі має істотний недолік: пилок пророщується в умовах, різко відмінних від природних. Внаслідок цього отримані результати можуть більш-менш сильною мірою відрізнятися від проростання того ж пилку на приймочках запилених квіток. Однак додавання до цукрового розчину (0,0005 - 0,001% борної кислоти, агар-агару) або введення в краплю відокремленої від маточки приймочки рослини того ж ботанічного виду трохи наближає до природних умов, але повністю усунути зазначений недолік не може.
Методам вологої камери, на жаль, властиве певне заниження наслідків. Вони не можуть бути застосовані у роботі з рослинами, пилок яких погано проростає на штучному середовищу.
Похожие статьи
-
Прийнято розрізняти життєздатність і здатність до запліднення пилкових зерен. Життєздатність пилкових зерен - це здатність чоловічого гаметофіту до росту...
-
Розвиток пилку у нормі і за патології - Визначення життєздатності пилку та зародкового мішка
Розвиток чоловічого гаметофіту у покритонасінних відбувається за єдиним планом і складається з ряду процесів, кожен з яких є результатом попереднього та...
-
Методи ідентифікації лікарських засобів
Аналіз будь-якого ЛП або ЛР починається з доведення того, що маєм справу із тим препаратом, назва якого вказана на маркуванні. Дослідження на тотожність...
-
Об'єктом проведеного дослідження стали процеси відтворення населення, а саме вплив радіаційного чинника та паління на ризик виникнення репродуктивних...
-
Рослинний матеріал та умови стресу, викликаного важкими металами Рослинний матеріал та умови культивування Дослідження проводились на рослинах Nicotiana...
-
Метод сигмальних відхилень: порівнюються результати антропометричних досліджень дитини (довжина та маса його тіла, окружність грудної клітини) з даними...
-
Територія Всі поселення Міські поселення Сільська місцевість До 999 г. До 2499 г Недоношені До 999 г. Недоношені До 999 г Недоношені Лугинський 0,17±0,17...
-
Предмет, задачі і методи патологічної фізіології
ПРЕДМЕТ, ЗАДАЧІ І МЕТОДИ ПАТОЛОГІЧНОЇ ФІЗІОЛОГІЇ Патологічна фізіологія - це наука, яка вивчає загальні закономірності виникнення, розвитку і завершення...
-
Неінвазивні методи діагностики атопічного дерматиту у дітей
Мета дослідження - вивчення перспективи і можливості застосування дерматоскопії та ультрасонографії шкіри як методів об'єктивної оцінки стану шкіри при...
-
Встановлено, що хірургічне лікування гриж міжхребцевих дисків поперекового відділу хребта нерідко пов'язане з недостатнім і суб'єктивним прогнозуванням,...
-
Підсумовуючи наведені дані, відмічаю наступне: ? Досліджувана лікарська рослинна сировина пасифлори інкарнатної містить істинні алкалоїди індольного...
-
Мікропресорефлексотерапія та вібромасаж. Методи та техніка впливу. - Рефлексотерапія
Мікропресорефлексотерапія (цуботерапія) є способом пролонгованої дії на механорецептори і полягає в накладанні і фіксації в зоні точок акупунктури кульок...
-
Досвід використання ядерної енергії показує, що, не дивлячись на всі заходи безпеки та постійне підвищення рівня надійності техніки та технологій,...
-
Виявлення ізоферментних спектрів гваякол пероксидази в ПААГ в нативних умовах проводили за загальною методикою ... []. Гель для електрофорезу готували як...
-
ДОСЛІДЖЕННЯ ВІЛ-ІНФЕКЦІЇ, Особливості ВІЛ-інфекції у дітей - ВІЛ-інфекція у дітей
Особливості ВІЛ-інфекції у дітей Надамо загальну характеристику ВІЛ-інфекції у дітей: ВІЛ-інфекція у дітей характеризується раннім та стрімким розвитком...
-
Біоадаптивне управління (англ. biofeedback -- біологічний зворотний зв'язок (БЗЗ)) -- перспективний напрям сучасної медицини. Це нефармакологічне...
-
Вступ - Алергічні реакції організму
В основі алергічних захворювань лежать зміни реактивності організму у відповідь на потрапляння в організм різних алергенів - речовин, що здатні...
-
Чувствительность кишечной палочки к антибиотикам - Ассоциативные болезни птиц
Чувствительность выделенных штаммов кишечных палочек определяют общепринятым методом - методом диффузии в агар с использованием бумажных дисков. Этот...
-
У комплексному лікуванні хворих хронічним гломерулонефритом і пієлонефритом, поряд з медикаментозними засобами і повноцінною дієтою, широко...
-
Ветеринарно-санітарна оцінка продуктів тваринництва, Висновок - Токсикологія сполук ртуті
Категорично заборонено проводити вимушений забій тварин при підозрі на отруєння ртутьорганічними препаратами. Всі продукти тваринництва, отримані від...
-
Аналіз результатів виконання нейропсихологічних завдань тесту Струпа пацієнтів і суб'єктів контрольної групи проводила лікар-невролог за участю...
-
Моніторинг та прогноз впливу інфраструктур водного транспорту на навколишнє середовище Актуальність проблеми формування систем оперативного контролю за...
-
Національними нормами встановлено, обов'язковість обладнання систем накопичення або очистки всіх видів суднових стічних вод, на суднах з екіпажем більше...
-
В дисертаційній роботі в межах актуальної проблеми оцінки впливу негативних факторів оточення (радіаційного чинника та тютюнопаління) на відтворення...
-
Радіаційний чинник У 1999-2003 рр. серед жінок, які народили дитину з ВВР, на РЗТ проживали (41,43±1,55)% осіб. Через 10 років питома вага жінок, які...
-
Оцінювали зміну АПН за даними пологових журналів (суцільна вибірка) у радіоактивно забруднених (Лугинський, Овруцький та Макарівський) та "чистих"...
-
Перша допомога - Кровотечі: визначення, основні ознаки кровотеч
В умовах подання першої допомоги можлива тільки тимчасова або попередня зупинка кровотечі на період, необхідний для доставки потерпілого до лікувального...
-
Кровотечі: визначення, основні ознаки кровотеч - Кровотечі: визначення, основні ознаки кровотеч
Кровотеча -- це витікання крові із кровоносних судин при порушенні їхньої цілісності. Класифікація Причиною кровотечі може бути ушкодження судин...
-
Загальний рівень нервово-психічного розвитку відзеркалює ступінь дозрівання центральної нервової системи. Своєчасне виявлення відхилень дозволяє провести...
-
1) [-]в сильном развитии продолговатого мозга 2) [+]в сильном развитии полушарий переднего мозга и мозжечка 3) [-]в сильном развитии всех отделов мозга...
-
Актуальність теми: фізичний розвиток дитини, як сукупність морфологічних та функціональних показників організму, що характеризують його ріст та...
-
На сьогодні в літературних джерелах існують повідомлення щодо певної діагностичної цінності специфічних білків плаценти як материнської, так і плодової...
-
Методи загартовування - Методи загартовування. Масаж
Загартовування -- це своєрідне тренування термоадаптаційних механізмів організму, їхня підготовка до своєчасної мобілізації, це один із методів...
-
Визначення числа Streptococcus mutans, Емаль зуба - Карієсогенна ситуація в порожнині рота
За методикою Dentocult SMR після стимуляції слиновиділення парафіном пластмасовою паличкою декілька разів проводять забір слини під язиком та зі спинки...
-
Це непряме визначення глибини дефекту кислотної ерозії емалі після її протравлення розчином НСL. Крапля 1 ммоль/л НСL наноситься на очищену і висушену...
-
Методи рефлексодіагностики, Аурикулодіагностика - Рефлексотерапія
Для встановлення акупунктурного діагнозу, тобто ступеня функціонального дисбалансу (надлишок, не достаток)- окремих меридіанів, внутрішніх органів чи...
-
Для визначення ефективності занять лікувальної гімнастики, відпустці процедур лікувального масажу і фізіотерапії на організм хворих на хронічний...
-
Кровотеча артеріальний кров вентиляція Штучну вентиляцію легень (ШВЛ) на місці пригоди можна здійснити такими засобами: "Із рота в рот" та "Із рота в...
-
Вихідний розчин. 0.200 г здрібненої на порошок сировини (250) (2. 9. 12) поміщають у круглодонну колбу місткістю 100 мл, додають 40 мл спирту(60 %,...
-
Опис сировини (ДФУ) Ідентифікацію сировини проводять за ДФУ: А. Стебла від зелених до сірувато-зелених або коричнюватих, здерев'янілі, порожнисті, уздовж...
Оцінка життєздатності пилку на приймочках запилених квіток, Методи визначення життєздатності пилку у вологих камерах (Ван-Тигема, Транковського) - Визначення життєздатності пилку та зародкового мішка