Методы исследования биопленок на разных видах материалов съемных протезов. Группы пациентов, причины исследования - Образование биопленок на съемных протезах
В целях повышения эффективности стоматологического ортопедического лечения челюстно-лицевых больных стоит острая необходимость исследования микрофлоры съемных протезов и полости рта пациентов с дефектами зубочелюстного аппарата. Для исследований могут быть отобраны различные группы пациентов (по полу, возрасту и т. д.), использующих различные съемные зубные протезы, изготовленные из различных материалов (гибкие и не гибкие протезы).
Важной причиной, обуславливающей необходимость данных исследований является то, что у пациентов, использующих съемные зубные протезы, нередко развиваются осложнения, обусловленные накоплением резидентной микрофлоры рта разной степени вирулентности. Нарушение микробиоценоза, развивающееся в процессе адаптации, приводит к воспалению слизистой оболочки протезного ложа и протезным стоматитам и т. д.
Несмотря на то, что происходит постоянное совершенствование методик изготовления съемных зубных протезов и применение новых конструкционных материалов, после наложения съемных зубочелюстных протезов, происходит изменение микрофлоры полости рта, что приводит к ряду воспалительных процессов. Тяжесть осложнений определяет медико-биологическую и социальную значимость исследований зубочелюстного протеза у пациентов.
Для исследования биопленок на разных видах материала съемных зубных протезов, а также полости рта используют бактериоскопический и бактериологический методы исследования. Савкина Н. И. Клинико-микробиологическое обоснование выбора материала зубочелюстного протеза. - М., 2004. - 141 с.
Бактериоскопический (микроскопический) метод исследования микрофлоры рта и зубных протезов представляет собой совокупность способов обнаружения и изучения морфологических и тинкториальных свойств бактерий (микробов) в исследуемом материале с помощью микроскопии. Применяют для идентификации выделенной чистой культуры.
В лабораторной практике используют следующие типы микроскопических препаратов:
- 1) висячую каплю; 2) придавленную каплю; 3) тонкий мазок; 4) толстую каплю; 5) агар-микроскопию; 6) препарат-отпечаток; 7) фиксированный мазок.
Приготовление исследуемого материала состоит из нескольких этапов:
- 1) забора материала для исследования; 2) приготовления препарата. Для этого исследуемый материал наносят на чистое, обезжиренное предметное стекло с помощью бактерицидной петли и распределяют по площади в 1 см2. Плотный (густой) материал вносят бактериальной петлей в каплю физ. раствора, тщательно размешивают и распределяют по стеклу на таком же пространстве, как и в предыдущем случае. Величина вносимого материала зависит от предполагаемого количества бактерий в нем. Препарат должен быть таким, чтобы наступило хорошее прокрашивание и обесцвечивание всех бактерий и чтобы была возможность наблюдать за единичными бактериями; 3) приготовленный мазок высушивают на открытом воздухе или в теплой струе воздуха (от газовой горелки или воздушного полотенца); 4) препарат фиксируют на стекле для обеспечения безопасности дальнейшей работы, прикрепления бактерий к стеклу, лучшего восприятия ими краски, поскольку структуры убитых бактерий легче и прочнее воспринимают красители; 5) фиксированные мазки окрашивают одним из простых или специальных методов крашения, погружая мазок в краситель или наливая его на препарат так, чтобы вся поверхность препарата была покрыта сплошным слоем красителя, и хорошо просушивают на воздухе. Плохо высушенный препарат дает мутное изображение при иммерсионной микроскопии из-за образования эмульсии; 6) микроскопии мазка. Ценность данного метода состоит в простоте, доступности методик и быстроте получения результатов (30 - 60 мин и менее). Однако специфичность его в связи с близостью морфологии разных видов мала, чувствительность ограничена (около 105 бактерий в 1 мл), информация, полученная с его помощью, невелика. Результаты, полученные при помощи этого метода обычно можно использовать как ориентировочные в основном для индикации высоких таксонов. Ценность такого метода резко возрастает при исследовании простейших, грибов и обработке препарата люминесцирующими красками. Etienne O. M., Taddei C. A. Use of bar-clip attachments to en-hance the retention of a maxillofacial prosthetic obturator: a clinical re-port //J. Oral Rehabil. - 2004. - Vol. 31, N 6. - P. 618-621.
Наряду с этим проводят оценку микробной колонизации полости рта и зубных протезов с применением культурального (бактериологического) метода.
Бактериологический (культуральный) метод - совокупность методик искусственного культивирования микроорганизмов на питательных средах в целях их идентификации и определения ряда физиологических свойств культуры и др. Современные методы изучения большинства биологических свойств бактерий возможны только при наличии чистой культуры. Контаминация культуры другим видом микробов, как правило, ведет к искажению результатов и неправильному заключению.
Поэтому первой задачей этого метода является получение чистой культуры какого-либо вида (вара) из микробной ассоциации и предупреждение контаминации посторонней микрофлорой материала для исследования и микробной культуры на всех этапах исследования. Это возможно при заборе материала в стерильных условиях в стерильную посуду, посеве материала в стерильные среды стерильным инструментом, предупреждении попадания микробов из воздуха в процессе доставки, хранения и инкубации материала и засеянных питательных сред.
Вторая задача данного метода - идентификация микробов выделенной чистой культуры, третья - определение дополнительных свойств, например, чувствительности к антибиотикам, вирулентности.
Этапы бактериологического метода:
- 1) забор материала; 2) микроскопия исследуемого материала. Этот этап часто не выполняется, хотя, несмотря на меньшую чувствительность, предварительная микроскопия в ряде случаев дает ориентировочные сведения о возбудителе и позволяет выбрать необходимые для посева среды; 3) обработка исследуемого материала физическими или химическими факторами в целях удаления или уменьшения посторонней микрофлоры. Эта мера применяется, например, при выделении кислотоустойчивых и спорообразующих микробов; 4) посев исследуемого материала на питательные среды для получения изолированных колоний; 5) инкубация засеянных питательных сред. Сроки и температура инкубации зависят от предполагаемой видовой принадлежности культуры. Обычно посевы выдерживают в термостате при 37°С 1-2 дня. Если рост отсутствует, срок инкубации может быть продлен еще на 2 - 3 дня. При более длительной инкубации необходимо предупредить высыхание среды, для чего посевы помещают в эксикатор с водой или пробки пробирок заливают парафином; 6) исследование колоний. Для изучения выбирают однородные изолированные колонии, располагающиеся далеко от краев чашки и по штриху петли, окружают их чертой, нумеруют. Если исследование ведется ненаправленно (полиэтиологичный процесс и пр.), то на основании результатов визуального осмотра выбирают по 2 - 3 колонии всех имеющихся на чашке типов и делают с них мазки; 7) пересев с выбранных колоний на среды накопления. Для этого с остатка колонии, в мазке которой выявлены однородные по форме и окраске бактерии, петлей, стараясь не задеть соседние колонии, забирают часть культуры и засевают на скошенный в пробирке МПА или специальную среду штрихом; 8) инкубация посевов в термостате до появления сплошного роста (обычно 1 -2 дня); 9) определение чистоты выросшей на скошенных средах культуры путем макроскопического осмотра роста и микроскопии мазка из него; 10) идентификация выделенной чистой культуры и в случае необходимости определение различных биологических свойств; 11) заключение о видовой принадлежности выделенной культуры и ее свойствах. Заключение дается на официальном бланке со ссылкой на номер, под которым эта культура занесена в лабораторный журнал.
Этот метод является основным является основным в диагностике большинства бактерий микрофлоры полости рта и зубных протезов. Он, как правило, обладает высокой чувствительностью, позволяющей выделить из, исследуемого материала чистую культуру, даже если в посевной дозе материала содержалось несколько десятков особей.
Для этого метода характерна высокая специфичность. Этот метод отличается сложностью, трудоемкостью, длительностью. Достоверные данные о составе микрофлоры полости рта и съемных зубных протезов и ее свойствах можно получить только при исследовании выборки из 3 -10 культур.
Материал с поверхности протеза обычно берут с помощью адгезивной пленки на 1, 7 и 12-е сутки после его установки. Результаты исследования обрабатываются статистически с вычислением средней величины, ошибки средней величины и вероятности различий.
После припасовки и наложения протеза количественное исследование выполняют с помощью адгезивной пленки диплен стандартного размера (0,5 см2). Ее накладывают на поверхность пластины в разные сроки для стандартного и воспроизводимого количественного исследования флоры биопленки, покрывающей протез. На всех протезных конструкциях отпечаток получают в области резцового сосочка, с внешней стороны, спустя час после наложения протеза в первый день, а затем на 7-е и 14-е сутки. Гаврилов Е. И. Протез и протезное ложе. - М.: Медицина, 1979. - 264 с.
Похожие статьи
-
Введение - Образование биопленок на съемных протезах
Ношение пациентами съемных зубных протезов встречает ряд трудностей. Несмотря на постоянное совершенствование методик изготовления лечебных аппаратов и...
-
Материал исследования Исследования проводили в период вегетативного сезона 2011-2015 гг. Сбор осуществляли преимущественно маршрутным методом. В ходе...
-
Материал для исследования следует брать по возможности до начала химиотерапии и лучше во время вскрытия или дренирования гнойного очага. Особенно...
-
Микроскопический метод исследования предусматривает наблюдение за живыми и убитыми микробами в окрашенном и неокрашенном состоянии. Различают простые и...
-
У пациентов, которые пользуются съемными зубными протезами (как из пластмассы горячей полимеризации, так и холодной полимеризации) происходит изменение...
-
Исследования полостных или трубчатых органов, заключающиеся в непосредственном осмотре их внутренней поверхности с помощью особых приборов - Эндоскопов...
-
Материал и методы исследования - Фауна рыб нижнего течения реки Гайва
Материал для данной работы был собран на р. Гайва Пермского края в весеннее-летне-осенний период с 6 мая по 11 сентября 2015 года, как во время...
-
В медицинской микробиологии все шире используются методы генной инженерии, с помощью которых "заставляют" микроорганизмы продуцировать нужные медицинской...
-
Методы выявления биопленок - Использование микробных биопленок в промышленности
В настоящее время наиболее надежным методом подтверждения наличия микробной биопленки является специальная микроскопия. В первую очередь это конфокальное...
-
Генетические методы изучения биопленок - Использование микробных биопленок в промышленности
Для выявления генов, участвующих в генетическом контроле любого процесса, используются методы направленного и ненаправленного (инсерционного)...
-
Основные методы, которые были использованы при исследовании видов рода Amanita Fr. - это среднемасштабный маршрутный метод исследования микобиоты и...
-
Б. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ КЛЕТКИ - Основные положения учения о клетке
1) Методы исследования структурной организации клетки. Световая микроскопия. * Получение четких изображений мелких (недоступных человеческому глазу)...
-
Клинический материал и методы исследования - Аллотрансплантаты в реконструктивной хирургии сосудов
Работа выполнена на базе отделения сердечно-сосудистой хирургии и центра "Диабетической стопы и нарушения кровообращения в конечностях" ГУЗ Пермской...
-
Основаны на регистрации электропотенциалов или звуковых явлений, возникающих в работающем органе. Электрокардиография (ЭКГ) - Метод, основанный на...
-
Радиоизотопные методы - Участие медицинской сестры в инструментальных исследованиях пациента
Основаны на способности органов (печень, щитовидная железа, поджелудочная железа) накапливать и с определенной скоростью выводить радиоактивные вещества....
-
Характеристика пациентов, включенных в исследование, понятие показателя "плотности доз". Всего обследовано 566 больных, находившихся с различными формами...
-
Таксономия: отдел Gracilicutes, род Francisella. Возбудитель - Francisella tularensis. Морфология: мелкие кокковидные полиморфные палочки, неподвижные,...
-
Ферментативные методы, Микробиологические методы - Методы количественного определения витамина B6
Определение коферментных форм витамина В6 ферментативными методами основано на реакции взаимодействия фосфорилированных форм витамина -...
-
Вспомогательные зуботехнические материалы - Вспомогательные зуботехнические материалы
Это большая группа различных по физико-химическим свойствам веществ и препаратов, применяемых при изготовлении зубных протезов, но не Составляющих саму...
-
Методы и организация исследования Анализ литературных источников проводился на всех этапах исследования. Анализ специальной научно-методической...
-
Метод исследования в свете люминесценции - Методы изучения клетки
Метод Исследования в свете люминесценции состоит в наблюдении под микроскопом зелено-оранжевого свечения микрообъектов, которое возникает при их...
-
Программа исследования Исследование проводилось в три этапа. На первом этапе проводился сбор и обработка информации. На втором этапе проводился анализ...
-
Современные стандартизованные методы определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам подразделяют на две группы: 1. Диффузные...
-
Методы биологических исследований - Аналогия и моделирование в биологических исследованиях
Когда мы говорим о биологии, мы говорим о науке, которая занимается исследованием всего живого. Все живые существа, включая ареал их обитания, изучаются....
-
Не существует таких явлений природы, технических или социальных процессов, которые были бы предметом изучения математики, но при этом не относились бы к...
-
Ветспециалистам, осуществляющим отбор проб для исследования в ветлабораторию, необходимо знать, что патологический материал от павшего и вынужденно...
-
ИММУНОЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ - Методы исследования вирусов
Представляет собой непосредственную визуализацию взаимодействия антигена и антител методом электронной микроскопии, была впервые предложена для...
-
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ВИРУСОВ, ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ - Методы исследования вирусов
Методы исследования, применяемые в вирусологии отличаются значительной сложностью, что связано прежде всего с абсолютным внутриклеточным паразитизмом...
-
Объект исследования Объектом исследований In vitro Служили первичные диссоциированные культуры клеток гиппокампа, полученные от 18-дневных мышиных...
-
Объект и предмет исследования В качестве Объекта исследования была выбраны сельскохозяйственные культуры: горох (( Pisum sativum L.), сорта...
-
Эксперименты выполнены на 350 белых беспородных крысах и крови 100 здоровых людей - доноров областной станции переливания крови. Все исследования на...
-
Материал и методы исследования - Декоративные растения станицы Роговской Краснодарского края
Исследования проводились в 2013-2015 гг. на территории станицы Роговской Краснодарского края. Объектом данного исследования послужили 48 видов и 8 форм...
-
Работа проводилась на базе Всероссийской коллекции микроорганизмов (ВКМ) Института биохимии и физиологии микроорганизмов (ИБФМ) им. Г. К. Скрябина РАН....
-
Бактерии семейства Campylobacteriaceae Отдела Gracilicutes, Род Campylobacter, Вид С. jejuni, С. coli и С. Lari Кампилобактеры -- спиральные бактерии,...
-
Таблица 68 - Дифференциация видов и биоваров рода Brucella Признаки В. abortus биовары В. canis В. melitensis В. neotomae В. ovis В. suis Потребность в...
-
Патологоанатомические изменения, Диагноз - Ассоциативные болезни птиц
При вскрытии трупов цыплят, павших в возрасте от нескольких часов до 7-10 дней, обнаруживают изменения, свойственные септическим заболеваниям. У...
-
Моделировочные материалы - Вспомогательные зуботехнические материалы
Для изготовления модели будущего протеза применяют материалы, основанные на различных восковых композициях, называемые моделировочными или...
-
Штаммы, используемые в работе, находились в лиафилизированном состоянии. Лиофилизация ? процесс высушивания под вакуумом из замороженного состояния....
-
Пальпация - Основные методы обследования больного при различных заболеваниях
Пальпация (от лат. palpatio -- ощупывание) -- клинический метод исследования при помощи осязания с целью изучения физических свойств и чувствительности...
-
ВВЕДЕНИЕ - Использование микробных биопленок в промышленности
Все знания о морфологии, физиологии, генетике, адаптационных возможностях бактерий были получены при изучении планктонных форм бактерий. В настоящее...
Методы исследования биопленок на разных видах материалов съемных протезов. Группы пациентов, причины исследования - Образование биопленок на съемных протезах