Б. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ КЛЕТКИ - Основные положения учения о клетке

1) Методы исследования структурной организации клетки.

Световая микроскопия.

    * Получение четких изображений мелких (недоступных человеческому глазу) биологических объектов (микроорганизмов, клеток и тканей многоклеточных организмов и др.) с помощью микроскопа, в котором объект освещается видимым светом. * Применяется для изучения строения клеток, тканей и органов.

Электронная микроскопия.

    * Получение детальных изображений макромолекул, вирусов, бактерий, клеток и тканей многоклеточных организмов и др. биообъектов при помощи электронных микроскопов, в которых в качестве источника освещения используется поток электронов; * Применяется для изучения ультраструктуры клеток и их различных структурных компонентов -- биополимерных молекул, органелл; применяя электронноплотные маркеры (коллоидное золото и др.), можно исследовать и функциональную морфологию клетки -- закономерности поступления и трансформации в клетке различных веществ. 2) Методы исследования химической организации клетки.

Дифференциальное центрифугирование.

    * Центрифугирование смеси, полученной в результате разрушения клеток (ткани, органа), в специальных центрифугах при различных скоростях вращения ротора, что позволяет раздельно осаждать частицы с различной массой (ядра, органеллы, макромолекулы). * Получение чистых фракций различных субклеточных структур для последующего биохимического и биофизического исследований.

Электрофорез.

    * Движение заряженных частиц (макромолекул и др.), взвешенных в электролите, при наложении внешнего электрического поля; осуществляется в среде пористого наполнителя (хромато-графическая бумага, гели); в зависимости от величины и знака заряда частиц они перемещаются к катоду или аноду и занимают совершенно определенное место (зону). * Используется для разделения сложных смесей биополимеров -- белков, нуклеиновых кислот и др.

Рентгеноструктурный анализ.

    * Основан на изучении дифракции, возникающей при взаимодействии рентгеновского излучения с кристаллическим образцом. * Применяется для исследования атомно-молекулярного строения биологических полимеров -- пептидов, полисахаридов, нуклеиновых кислот. 3) Методы исследования жизнедеятельности клетки.

Авторадиография.

    * Изучение распределения радиоактивных компонентов по поверхности гистологического среза основано на регистрации ядерного излучения (чаще всего, бета-частиц) с помощью фотоэмульсии. * Применяется для исследования структурных основ и кинетических характеристик метаболизма различных веществ в клетке (ткани).

Культура клеток.

    * Выращивание изолированных клеток вне организма путем создания условий, благоприятных для их жизнедеятельности (питательная среда, поступление кислорода, оптимальная температура). * Используется для изучения особенностей поведения клеток в отсутствие влияний интегрирующих систем организма (нервной, эндокринной, иммунной); исследование взаимодействия клеток с клетками других типов, вирусами, бактериями.

Микрохирургия.

* Проведение различных микроманипуляций с клеткой или ее структурными компонентами: удаление или пересадка ядра (яд-

Рышка), введение микроэлектродов, микроинъекции красителей и т. д.

* Используется как методический прием для решения различных научных задач, в частности для изучения роли ядра и цитоплазмы в развитии зародыша.

Похожие статьи




Б. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ КЛЕТКИ - Основные положения учения о клетке

Предыдущая | Следующая