Гипериммунизация животных - Технология приготовления гипериммунных сывороток

Вторым этапом получения специфических сывороток является проведение гипериммунизации животных.

Гипериммунизация -- это метод парентерального введения животным нарастающих доз соответствующих антигенов с целью получения наивысшей ответной иммунологической реакции организма, а следовательно, и максимального увеличения в крови животных специфических антител, которое должно обеспечивать лечебный, профилактический и диагностический эффект препаратов.

При гипериммунизации сыворотка крови животных изменяется. Обычно нарастает количество общего белка, увеличивается количество гамма - и бета-глобулиновых фракций, уменьшается содержание альбуминов. Так, если в нормальной сыворотке крови лошади альбумины составляют 50% общего количества белков, то в иммунной сыворотке их бывает 35% и ниже.

Успех гипериммунизации животных-продуцентов во многом зависит не только от тщательного их подбора, качества антигена и адъювантных веществ, но и от правильно выбранной схемы гипериммунизации, правильной технологии выполнения этих схем иммунизации, а также технологии кровопускания и обескровливания продуцентов в конце их эксплуатации.

Антиген вводится обычно подкожно и внутримышечно в несколько мест с таким расчетом, чтобы точки инъекции находились вблизи лимфатических узлов. При этом в иммуногенез быстрее вовлекается большое количество лимфоузлов, что повышает общую и иммунологическую реактивность организма. Введение антигена одновременно в несколько мест, кроме того, обеспечивает лучшую рассасываемость его и появление более равномерных и менее бо-лезненных инфильтратов.

Антигены в небольших дозах (5--25 мл) обычно вводят подкожно в верхнюю часть шеи животного, а в больших количествах -- в область спины и крупа внутримышечно. Нужно иметь в виду, что при введении животному больших доз антигена образуются большие инфильтраты и даже абсцессы. Но абсцессы обычно бывают стерильными.

Места введения антигена или крововзятия протирают дезинфицирующими растворами.

Для гипериммунизации, как было показано выше, чаще всего используют лошадей. Цикл гипериммунизации обычно длительный и составляет 1--2 и более месяцев. Впрочем, в каждом случае цикл иммунизации во многом зависит от вида гипериммунной сыворотки.

Гипериммунизацию лошадей начинают с малых доз: 0,5; 1,0; 2,5 и 5,5 мл с интервалом в трое суток. Затем культуры возбудителя сибирской язвы вводят с интервалами в 3--4 суток и в дозах 10,0; 20,0; 40,0; 80,0; 100,0; 110,0; 120,0; 130,0; 140,0; 150,0. Обычно бывает достаточным ввести антиген 13 раз, и сыворотка лошадей - продуцентов становится активной. При введении доз от 10 до 80 мл к культуре добавляют 0,2% квасцов, а к дозам от 100 до 150 МЛ'-- 0,1% квасцов. При повышении у животных температуры интервал между инъекциями увеличивают до 4 или 5 суток.

В каждом конкретном случае схемы иммунизаций могут быть разными.

Не игнорируя значения вида, породности, возраста животных, качества рационов кормления, следует иметь в виду, что теоретически обоснованным и практически целесообразным является отбор продуцентов по иммунологическим показателям. Например, отбор лошадей-продуцентов для производства противодифтерийной сыворотки проводится по титру естественного противодифтерийного анатоксина в крови животных, выявляемого по реакции нейтрализации. Степень нарастания титров анатоксина в результате грундиммунизации использовалась как основание для отбора лошадей-продуцентов противостолбнячной, противоботулинической, противодифтерийной и других сывороток.

При производстве иммунных сывороток против диплококковой инфекции используют в качестве продуцентов быков (волов). По данным Г. Ф. Коломнина с соавторами (1985), у волов, заготовляемых для этих целей, содержатся антитела к возбудителю диплококковой инфекции в титре 1 :200--1 : 3200. Поэтому авторы не рекомендуют подвергать их грундиммунизации, а сразу используют для гипериммунизации. Если при исследовании отбираемых волов антитела не обнаруживают, то в таком случае их грундируют. Отбор животных и грундирование их обычно проводится в местах заготовки.

Всех животных, у которых при грундиммунизации не обнаруживают антитела, подвергают выбраковке.

Следовательно, получение иммунных сывороток осуществляется в два этапа.

Первый этап связан с подбором животных-продуцентов, а также отбором из числа завезенных животных особей и проведение так называемой грундиммунизации (основы иммунитета). Для этих целей животным вводят убитый антиген или живых аттенуированных микробов (убитые или живые вакцины). Эти антигены, как правило, вводят дважды с интервалом в 2--3 недели внутримышечно или подкожно. До начала грундиммунизации и через 7--8 суток после последнего введения антигена у животных берут кровь и определяют в ее сыворотке наличие антител к тому антигену, с помощью которого в последующем готовят гипериммунную сыворотку. Выявление в сыворотке антител в титрах 1 :800 и выше указывает на то, что данное животное может быть использовано как продуцент для получения гипериммунной сыворотки. Предварительное, правильно проведенное, грундирование животных обеспечивает повышение (в 5 раз и более) титров специфических антител при последующей гипериммунизации тем же антигеном, увеличивает "выход" высокоактивного препарата и создает условия получения сывороток в более короткие сроки. На этом заканчивается подготовка животных-продуцентов.

Эффективность иммунизации животных повышается при дробном введении антигенов одновременно в различные участки тела животного с охватом возможно большего количества лимфатических узлов.

По окончании гипериммунизации, когда в сыворотке крови животного установлен максимальный титр специфических антител, у него берут кровь обычно через 7--10 суток после последней инъекции антигена.

.

Похожие статьи




Гипериммунизация животных - Технология приготовления гипериммунных сывороток

Предыдущая | Следующая