Иммуноферментный анализ - Производство биоферментных препаратов

Иммуноферментный анализ - это новый метод анализа, который используется с целью контроля в продуктах питания микотоксинов, гормонов, а также микроорганизмов. Иммуноферментное направление считается одним из наиболее перспективных в медицине и биотехнологии.

Существует прямой, косвенный, антикомплементарный и другие разновидности Методов иммуноферментного анализа; предложены новые виды ферментов, а также виды хромогенных субстратов, методы экспресс-индикации микроорганизмов.

ИФА - метод выявления антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой

В основе иммуноферментного метода лежит специфическое "узнавание" анализируемого вещества специфическим к нему антителом. Использование ферментов в иммуноферментном анализе заключается в том, что молекула фермента, соединенная с антигеном или антителом, служит индикатором реакции антиген-антитело в среде. Измеряя активность фермента, можно оценить, сколько молекул антигена вступило в иммунохимическую реакцию с антителом.

Методы иммуноферментного анализа применимы для контроля лекарственной терапии, препаратов, влияющих на сердечнососудистую систему, антибиотиков, барбитуратов, кодеина, морфина. Эти методы позволяют выявлять наличие психотропных препаратов в организме, наркотиков. Иммуноферментный анализ используется в контроле биотехнологических процессов и качества лекарственных препаратов. Так, в микробиологических производствах иммуноферментный анализ может применяться для выявления высокоэффективных микроорганизмов -- продуцентов биологически активных веществ (антибиотиков, ферментов и т. д.). Иммуноферментный анализ может также использоваться для контроля появления посторонних микроорганизмов, бактериофагов в ферментерах. Иммуноферментный анализ применим для определения содержания гормонов, белков, для выявления возбудителей инфекций (хламидиоз, микоплазмоз, герпес, гепатиты А, В и С, кандидоз, цитомегаловирус, краснуха, сифилис, ВИЧ, и др.), паразитов (описторхоз, лямблиоз), а также для контроля лекарственной терапии (антибиотики, барбитураты, кодеин, морфин).

В зависимости от того, какие антигены используются, иммуноферментные тест-системы подразделяют на:

    - Лизатные -- в которых используется смесь нативных антигенов (лизированный или обработанный ультразвуком возбудитель инфекции, полученный в культуре); - Рекомбинантные -- в которых используются полученные генно-инженерным способом белки-аналоги определенных белковых антигенов возбудителя; - Пептидные -- использующие химически синтезированные фрагменты белков.

Иммуноферментные тест-системы выпускаются в виде многокомпонентных наборов, содержащих все реагенты, необходимые для проведения анализа, и инструкцию по их применению. В каждом диагностическом наборе содержатся положительный и отрицательный контрольные образцы, которые позволяют оценить качество набора и правильность проведения анализа. ОП в лунках с контрольными образцами должна соответствовать нормам, предусмотренным нормативно-технической документацией (НТД) на данную тест-систему и указанным в инструкции по применению диагностического набора. Только в этом случае набор считается пригодным к использованию, а полученные результаты состоятельными. К каждой партии наборов производителем должен прилагаться паспорт ОБТК на данную серию наборов, в котором отражается ее соответствие требованиям НТД и основные контрольные показатели, полученные при выпуске тест-системы. Значительные отклонения получаемых контрольных значений ОП от паспортных свидетельствует либо об изменении качества наборов, либо о допущенных при постановке анализа ошибках. Хотя все ИФА-тест-системы построены по единой схеме, каждый набор имеет свои особенности. Различия могут заключаться в степени рабочего разведения образца (1:10, 1:100, 1:200), в подходе к определению критической оптической плотности, по отношению к которой оценивается результат реакции. Предоставляемые аналитические возможности отдельных тест-систем также могут быть различны. Кроме того, различаться могут составы и способы приготовления используемых растворов, методические детали проведения анализа (число промывок планшета на каждой стадии, продолжительность инкубаций, условия хранения рабочих растворов и т. д.), поэтому при работе с любой тест-системой необходимо строгое соблюдение требований инструкции по ее применению.

Похожие статьи




Иммуноферментный анализ - Производство биоферментных препаратов

Предыдущая | Следующая