Реакция с хлороводородной кислотой., Обнаружение димедрола методом ТСХ., Обнаружение димедрола методомУФ-спектроскопии. - Проведение судебно-химического (химико-токсикологического) анализа

При кипячении с разведенной хлороводородной кислотой происходит процесс гидролиза с образованием бензгидрола:

Обнаружение димедрола методом ТСХ.

Извлечение: щелочное, хлороформом

ТСХ системы:

    А) n-бутанол - метанол (4:6) Б) метанол - аммиак (100:1,5) В) хлороформ - ацетон - аммиак (12:24:1)

Проявитель: реактив Драгендорф - пятна оранжево-коричневого цвета.

Реактив Эрдмана - пятна вишневого цвета

Rf составляет 0,67-0,68

Обнаружение димедрола методомУФ-спектроскопии.

Используют УФ-спектр 0,05%-раствора в этаноле. Он имеет в области от 240 до 280нм максимумы поглощения при 253, 258 и 264нм и минимумы поглощения при 244, 255, 263нм (во всех случаях допускаются отклонения + 2нм). Удельные показатели поглощения у них сравнительно небольшие (12-16), что не дает возможности выполнять прямое спектрофотометрическое определение с достаточной точностью.

5. Судебно-химический анализ отравления нитразепамом

Нитразепам (радедорм, эуноктин, могадон, неозепам и др.) -- светло-желтый или светло-желтый с зеленым оттенком кристаллический порошок. Практически нерастворим в этиловом спирте и хлороформе.

Метаболизм. Метаболитами нитразепама являются 7-амино-метаболит, 7-ацетиламино-метаболит. В течение 48 ч из организма выделяется около 23 % принятой дозы нитразепама. В неизмененном виде с мочой выделяется около 5 % этого препарата. Свыше 8 % нитразепама выделяется с мочой в виде 7-амино-метаболита и около 10%--в виде 7-ацетиламино-метаболита. Часть неизмененного нитразепама может быть обнаружена в кале.

Выделение нитразепама из биологического материала.

Биологический материал трижды настаивают с новыми порциями насыщенного водного раствора щавелевой кислоты (рН=1). Через 1 ч после каждого настаивания вытяжки отделяют от биологического материала центрифугированием. Объединенный кислый центрифугат трижды взбалтывают со смесью (1:1) хлороформа и этилацетата (по 20, 15 и 15 мл). Затем кислый центрифугат подщелачивают до рН = 10 и трижды взбалтывают с новыми порциями (20, 15 и 15 мл) смеси хлороформа и этилацетата (1:1). Полученные при этом вытяжки подвергают исследованию на наличие нитразепама.

Предварительные пробы на наличие нитразепама в моче.

Нитразепам можно обнаружить в моче в неизмененном виде и в виде 7-амино - и 7-ацетиламино-производных, являющихся метаболитами этого препарата: 5мл мочи подщелачивают аммиаком до рН=10 и прибавляют 250 г дитионита натрия (Na 2 S 2 O 4 ). Смесь взбалтывают в течение 10 мин, затем нагревают при 50°С в течение часа и охлаждают. Охлажденную жидкость 10 мин взбалтывают с 10 мл смеси, состоящей из равных объемов метиленхлорида и этилацетата. После этого от водной фазы отделяют слой смеси органических растворителей. Слой взбалтывают с 10 мл 5%-го раствора буры. Водную фазу отделяют от фазы органических растворителей. К фазе органических растворителей прибавляют 5 мл 0,2н. раствора соляной кислоты и взбалтывают. После этого отделяют фазу органических растворителей. 4 мл кислой водной фазы охлаждают в ледяной воде и прибавляют 0,2мл 0,4н. раствора нитрита натрия. Через 5 мин к кислому раствору прибавляют 0,2мл 2%-го раствора сульфамината аммония. Жидкость хорошо перемешивают и оставляют на 5 мин, а затем прибавляют 0,2 мл 0,4 %-го раствора N-1-нафтилэтилендиамина дигидрохлорида. При наличии нитразепама в моче появляется вишнево-красная окраска (А = 555 нм).

Выделение метаболитов нитразепама из мочи.

Выделение этих соединений из мочи проводят так же, как и при обнаружении нитразепама, находящегося в моче в неизмененном виде. Однако при исследовании метаболитов в процессе их выделения из мочи к ней не прибавляют дитионит натрия. Выделенные из мочи метаболиты нитразепама обнаруживают методом хроматографии.

Обнаружение нитразепама и его метаболитов методом хроматографии.

Исследуемый раствор наносят на хроматографическую пластинку, покрытую тонким закрепленным слоем силикагеля (на пластинку 9х12см наносят суспензию, состоящую из 2,6г силикагеля, 0,2г гипса и 7мл 0,1М раствора гидросульфата калия, высушивают) или на пластинку "силуфол". Для развития хроматограммы на пластинке применяют систему растворителей, являющуюся смесью этилацетата, метилового спирта и 25%-го аммиака (85:10:5). Пятна нитразепама и его метаболитов на пластинках проявляются реактивом Драгендорфа.

Обнаружение нитразепама по УФ - и ИК-спектрам.

Раствор нитразепама в этиловом спирте имеет максимумы поглощения при 218 и 260 нм, в 0,1м. растворе серной кислоты имеет максимум поглощения при 277нм и изгиб около 340нм; нитразепам в ИК-области спектра (диск с бромидом калия) имеет основные пики при 1692, 1615, 1352 и 702 см-1.

АКТ

Судебно-химического исследования

№311

Исследование начато "08" августа 2015 г.

Исследование окончено "11" августа 2015 г.

На основании направления государственного судебно-медицинского эксперта ГБУЗ КО ОТ НКБСМЭ от "08" августа 2015 года в судебно-химическом отделении судебно-химической лаборатории ГБУЗ КООТ "Новокузнецкое клиническое бюро судебно-химической экспертизы", студенткой 5 курса 2 группы Щелоковой Екатериной Дмитриевной на кафедре фармацевтической химии НГМУ 08.08.2015года начато судебно-химическое исследование биологических материалов гражданина Синькина Степана Александровича 1992г. р., с целью обнаружения нитразепама

ОБСТОЯТЕЛЬСТВА ДЕЛА: В направлении судебно-медицинского эксперта указано: "В ГКБ №1. Выпил 50 таблеток Нитразепама. DS: Отравление нитразепамом"

ОПИСАНИЕ ОБЪЕКТОВ. Стеклянная банка емкостью 500мл, содержит часть стенки желудка с содержимым общей массой 250г. Стенка желудка розового цвета, запах без особенностей, рН=6 по универсальному индикатору. Содержимое желудка массой 50г, бурого цвета, запах без особенностей, рН=6 по универсальному индикатору. Банка закрыта полиэтиленовой пленкой, обвязана нить х/б. Этикета на банке соответствует содержимому и направлению эксперта.------------------------------------------------

ХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ. 50г стенки желудка тщательно измельчали, заливали 100мл дистиллированной воды, подкисленной насыщенным раствором щавелевой кислоты до рН=2 по универсальному индикатору, и настаивали в течение двух часов при периодическом взбалтывании. Водное извлечение сливали с твердых частиц объекта, а последние вновь настаивали в течение одного часа с 50 мл дистиллированной воды, подкисленной насыщенным раствором щавелевой кислоты до рН=2 по универсальному индикатору. Водные вытяжки объединяла, процеживала через двойной слой марли, помещала в делительную воронку и экстрагировала 3 раза по 30мл диэтилового эфира в течение 5 минут (перемешивая фазы без энергичного встряхивания). Эфирные экстракты объединяла, фильтровали через небольшой слой безводного сульфата натрия и упаривала при комнатной температуре досуха. Кислую водную фазу, подщелачивала 25% водным раствором аммиака до рН=9-10 по универсальному индикатору и, дважды экстрагировала по 30мл хлороформа в течение 5минут (перемешивая фазы без энергичного встряхивания). Затем водную фазу подщелачивала 50% раствором гидроксида натрия до рН=13 по универсальному индикатору и вновь дважды экстрагировала по 30мл хлороформа в т ечение 5 минут (перемешивая фазы без энергичного встряхивания). Хлороформные экстракты объединяла и упаривала при комнатной температуре досуха. Сухие остатки кислого и щелочного экстрактов растворяли в 5 мл хлороформа (раздельно). Полученные извлечения исследовали. 1мл щелочного извлечения упаривали до минимального объема и наносили в одну точку на стартовую линию хроматографической пластинки "Сорбфил". В качестве метчиков на стартовую линию хроматографической пластинки настаивала 40мкл спиртового раствора основания нитразепама, диазепама, оксазепама, хлозепида с концентрацией 1мг/мл. Хроматографировала в системе этилацетата-метилового спирта-25%-го раствора аммиака (85:10:5). Фронт растворителя продвинулся на 9см. Пластинку высушивала и опрыскивала реактивом Драгендорфа, при этом в исследуемой зоне отмечала красно-оранжевое пятно с Rf=0,46. В зоне метчиков отмечала красно-оранжевое пятно с Rf=0,47 для нитразепама, Rf=0,21 для диазепама, Rf=0,07 для оксазепама, Rf=0,00 для хлозепида.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ: На основании проведенного судебно-химического исследования биологического материала (часть стенки желудка с содержимым) гражданина Синькина Степана Александровича (1992г. р.), направленного 08 августа 2015 года с целью обнаружения нитразепама, ОБНАРУЖЕНО: нитразепам. НЕ ОБНАРУЖЕНО: диазепам, оксазепам, хлозепид.

Студентка 5 курса 2 группы Щелокова Екатерина Дмитриевна------------

"11"августа 2015г--------------------------------------------------------------------

Похожие статьи




Реакция с хлороводородной кислотой., Обнаружение димедрола методом ТСХ., Обнаружение димедрола методомУФ-спектроскопии. - Проведение судебно-химического (химико-токсикологического) анализа

Предыдущая | Следующая