Молекулярные основы метода ПЦР - Полимеразная цепная реакция

В основе метода полимеразной цепной реакции лежит процесс естественной репликации ДНК, который включает три этапа:

1 этап. Денатурация (расплетение двойной спирали и расхождения нитей) 2 этап. Образование затравок. Отжиг. (Образование коротких двухцепочечных участков ДНК, которые служат затравками для синтеза новых цепей) 3 этап. Синтез новых цепей. Эллонгация (удлинение обеих цепей затравок в результате комплементарного достраивания в направлении от 5' к 3' концу молекулы ДНК)

Материалом для достраивания служат дезоксинуклеотид-трифосфаты. Этот процесс катализируется ферментом ДНК - полимеразой. ДНК - полимераза катализирует последовательное присоединение дезоксирибонуклеотидных остатков к цепи затравки со свободной 3'ОН группы. В этом процессе сначала образуется водородные связи между комплементарными азотистыми основаниями, а затем фосфодиэфирная связь между остатками рибозы. В результате этой реакции образуется новая цепь ДНК, комплементарная исходной матричной цепи.

ПЦР проводят в амплификаторе -- приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1 °C.

Современные амплификаторы позволяют задавать сложные программы, в том числе с возможностью "горячего старта", Touchdown ПЦР и последующего хранения амплифицированных молекул при 4 °C.

Похожие статьи

• Основные положения метода МО. Энергетические диаграммы молекул и молекулярных ионов. Определение с помощью метода МО кратности связи, пара - и даимагнитных свойств молекул и молекулярных ионов, Гибридизация атомных орбиталей. Пространственное строение молекул - Основы химии

  1. В результате линейной комбинации две атомные орбитали (АО) формируют две молекулярные орбитали (МО) - связывающую, энергия которой ниже, чем энергия...

• Химическая связь. Основные виды связи. Ионная связь. Механизм ее возникновения, примеры ионных соединений, Основные положения метода ВС, механизм образования ковалентной связи. Свойства ковалентной связи - Основы химии

  Химическая связь - это взаимное сцепление атомов в молекуле и кристаллической решетке в результате действия между атомами электрических сил притяжения....

• История развития - Полимеразная цепная реакция

  Принцип ПЦР сформулировал Гобинд Корана в 1971. В 1983 американскому биохимику Кэри Мюллису удалось провести ПЦР. В момент изобретения метода он работал...

• Составление уравнений окислительно-восстановительных реакций методом электронного баланса. Типы окислительно-восстановительных реакций - Основы химии

  В этом методе сравнивают степени окисления атомов в исходных веществах и в продуктах реакции, при этом руководствуемся правилом: число электронов,...

• Метод молекулярных орбиталей - Типы химических связей. Ковалентная связь

  В методе молекулярных орбиталей (ММО) молекула рассматривается как единая система всех ядер и всех электронов. Последние находятся в общем пользовании...

• Общие сведения о полимерах. Методы получения полимеров (полимеризация, поликонденсация, примеры реакций) - Основы химии

  Полимерами называют вещества, молекулы которых (макромолекулы) состоят из одного или большего числа составных звеньев. Молекулярная масса (число атомов)...

• Основная часть, Теоретические основы масс-спектрометрии - Хроматографические методы и их использование в идентификации загрязнителей природных сред

  Теоретические основы масс-спектрометрии Масс-спектрометрия представляет собой метод исследования веществ, основанный на определении массы (точнее,...

• Процесс создания модели на основе классического и системного подходов - Сущность метода статистического моделирования

  Классический подход - изучение взаимосвязей между отдельными частями, и разработка модели системы рассматривается как суммирование отдельных компонент в...

• Гидравлические вяжущие вещества (реакции, протекающие при получении портландцемента, реакции, протекающие при затворении порталнцемента водой) - Основы химии

  Сушки (температура материала 100...200 °C - здесь происходит частичное испарение воды); подогрева (200...650 °C - выгорают органические примеси и...

• Сбалансированный по хлору метод на основе этилена, Общее описание метода, Побочные продукты и методы их утилизации - Технология получения винилхлорида

  Общее описание метода В настоящее время самым современным и наиболее эффективным с экономической точки зрения является сбалансированный процесс...

• Кинетика химических реакций. Понятие о скорости химической реакции. Факторы, влияющие на скорость химической реакции - Основы химии

  Скорость реакции определяется изменением молярной концентрации одного из реагирующих веществ: V=dC/dtV. Факторы, влияющие на скорость химических...

• Общее понятие о цепных реакциях и автокатализе - Принципы горения и взрыва

  К цепным реакциям относят реакции, протекающие с образованием свободных радикалов, способных превращать реагенты в конечные продукты, поддерживая...

• Классификация окислительно-восстановительных реакций, Методы расстановки коэффициентов в уравнениях окислительно-восстановительных реакций - Характеристика основных видов растворов

  Существует три основных типа окислительно-восстановительных реакций: 1. Если окислитель и восстановитель находятся в молекулах различных веществ, то...

• Реакции аминокислот - Способы получения аминокислот

  Большинство реакций, в которые аминокислоты вступают в лабораторных условиях (in vitro), свойственны всем аминам или карбоновым кислотам. 1. образование...

• Основные методы получения огнестойких материалов на основе полимеров - Токсичность продуктов горения и разложения полимеров. Зависимость пожарной опасности полимеров от их химического строения. Классификация реакций синтеза и основные представители полимеров

  Способы защиты полимеров от огня: А) обработка, пропитка полимера неорганической солью - инертный способ, соль не гасит огонь, а лишь препятствует его...

• Метод построения моделей в IDEF0 на основе цепочек создания ценности - Два способа построения моделей бизнес-процессов в IDEF0

  Бизнес документирование организационный ценность Рассмотрим деятельность предприятия с точки зрения цепочек создания ценности. Для этого необходимо...

• Обзор методов получения хлорпарафинов - Теоретические основы получения хлорпарафинов

  Известен способ получения жидких хлорпарафинов в промышленном масштабе хлорированием парафина в расплаве. Процесс состоит из следующих стадий: 1....

• Модель твердофазной цепной реакции - Кинетические закономерности взрывного свечения азида серебра

  Кинетический серебро свечение дезактивация В [1, с. 152] сформулирован ряд основных свойств энергетической твердофазной цепной реакции: 1. Носителями...

• Реакция окисления углерода - Основы теории окислительной плавки

  Основная составляющая шихты при выплавке стали - чугун - содержит в среднем 4%. В готовой стали содержание углерода в большинстве случаев исчисляется...

• Статистические методы изучения взаимосвязей социально-экономических явлений, Причинность, регрессия, корреляция - Основы эконометрики

  Причинность, регрессия, корреляция Исследование объективно существующих зависимостей и взаимосвязей между явлениями и процессами - важнейшая задача...

• Оценка токсичности отработавших газов - Имитация рабочего процесса поршневых двигателей на основе моделей химических реакций, турбулентности и теплообмена

  Система усовершенствованных моделей позволяет удовлетворительно воспроизводить кинетику СО-токсичности ДВС при изменении нагрузки, цикловой подачи...

• Основные идеи и допущения, Структура и возможности моделей горения - Имитация рабочего процесса поршневых двигателей на основе моделей химических реакций, турбулентности и теплообмена

  Прототипом разработанной автором системы моделей служит "точечная" модель [1], представляющая собой пространственно осредненный вариант уравнений горения...

• СИНТЕЗ ВЫСОКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ СОЕДИНЕНИЙ - Пластические массы и изделия на их основе

  Природные (естественные) органические высокомолекулярные соединения образуются в процессе биосинтеза в клетках растений и живых организмов и для...

• Применение катализа в промышленности - Гомогенный и гетерогенный катализ. Промышленный катализ. Технологические приемы ускорения и замедления реакций

  Гидрирование Большое число каталитических реакций связано с активацией атома водорода и какой-либо другой молекулы, приводящей к их химическому...

• Реакции SN1, Гидролиз солей диазония, Превращение арилталлиевых соединений в фенолы - Особенность синтеза фенолов

  Реакции с механизмом SN1 для ароматических соединений встречаются крайне редко и, по сути, характерны только для солей диазония. Эти реакции идут в...

• Задачи и методы качественного анализа - Основы аналитической химии

  Обнаружение или, как иногда говорят, "открытие" отдельных элементов или ионов, входящих в состав веществ - это задачи качественного анализа. Качественный...

• Методы изучения связи качественных признаков - Основы эконометрики

  При наличии соотношения между вариацией качественных признаков говорят об их ассоциации, взаимосвязанности. Для оценки связи в этом случае используют ряд...

• Собственно-корреляционные параметрические методы изучения связи - Основы эконометрики

  Измерение тесноты и направления связи является важной задачей изучения и количественного измерения взаимосвязи социально-экономических явлений. Оценка...

• Парная регрессия на основе метода наименьших квадратов и метода группировок - Основы эконометрики

  Парная регрессия Характеризует связь между двумя признаками: результативным и факторным. Аналитически связь между ними описывается уравнениями: Прямой...

• Основное значение для производства соды имеет аммиачный метод, основанный на реакции - Щелочные металлы

  NаСl + NН4НСО3 NаНСО3 + NН4Сl Равновесие которой почти нацело смещено вправо (вследствии очень малой растворимости NаНСО3 в растворе NН4Сl)....

• Индивидуальные реакции катионов аналитических групп 1-3 - Основы качественного анализа

  С учетом цвета осадков, приведенных выше в таблице 3, нам остается распознать только те катионы, которые образуют черные сульфиды: Группа 2: Bi3+, Pb2+,...

• СТАТИСТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ, СУЩНОСТЬ СТАТИСТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ - Основы прогнозирования

  СУЩНОСТЬ СТАТИСТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ Динамический или временной ряд представляет собой совокупность численных данных, характеризующих...

• Реакция окисления кремния - Основы теории окислительной плавки

  Кремний сплавляется с железом в любых соотношениях, образуя соединения FeSi. Вследствие высокой активности по отношению к кислороду используется как...

• Влияние температуры на скорость химической реакции. Правило Вант-Гоффа. Энергия активации - Основы химии

  Зависимость скорости реакции от температуры определяется правилом Вант-Гоффа : При повышении температуры на каждые 10о скорость большинства реакций...

• Задачи и методы количественного анализа - Основы аналитической химии

  Количественный анализ - это совокупность химических, физико-химических и физических методов определения количественного соотношения компонентов, входящих...

• Особенности аппроксимации функции предпочтений ЛПР с помощью аппарата нейро-нечеткого вывода, Исследование эффективности методов - Многокритериальная оптимизация на основе нейросетевой, нечеткой и нейро-нечеткой аппроксимации функции предпочтений лица, принимающего решения

  Используется адаптивная нейро-нечеткая система вывода ANFIS, функционально эквивалентная системе нечеткого вывода Сугено. Вывод осуществляется за два...

• Реакция окисления марганца - Основы теории окислительной плавки

  Марганец в сталях присутствует как раскислитель и легирующий компонент. Раскислительная способность его мала и в этом качестве он используется при...

• Методы отбора выборок - Основы научных исследований

  Известны три метода отборок выборок: случайный, систематический и комбинированный. В результате случайного отбора получается случайная выборка. Выборка...

• Автоколебания в химических реакциях, Вывод расчетных формул - Автоколебания в химических реакциях. Численные методы

  Модель Лефевра-Николиса описывает колебательные процессы в следующей цепочке химических реакций: Предполагается, что концентрации веществ A, B, D, E...

• Метод наименьших квадратов - Основы научных исследований

  Пусть проведен однофакторный эксперимент, в котором исследована зависимость У от Х . Установлено, что основные предпосылки регрессионного анализа...

Молекулярные основы метода ПЦР - Полимеразная цепная реакция

Предыдущая | Следующая