Дендрологические методы работы, Химический анализ на содержание фенолов в листьях некоторых сортов роз, Анатомические методы исследования - Характеристика рода Rosa L. во флоре города Краснодара

Сравнительно-морфологический метод.

С помощью этого метода изучали макроструктуру роз, проводя морфологический анализ вегетативных органов, соцветий, цветков и плодов. Он не требует сложного оборудования, что и определяет общедоступность таких исследований [Шиманюк, 1974].

Разница результатов морфологического анализа между исследуемым участком и контрольным участком выражали в процентном соотношении.

Фенологический метод.

Основным методом фенологических наблюдений является регистрация сроков наступления различных сезонных явлений. Наблюдения над важнейшими фазами развития интересующих нас растений проводились по методике Бейдемана [1954]. Метод подразумевает собой составление фенологических спектров и их дальнейшее сравнение, позволяющее сделать соответствующие выводы.

Для составления феноспектра использовали следующие условные обозначения:

- облиствение;

- рост побегов;

- бутонизация;

- цветение;

- созревание плодов;

- листопад.

Химический анализ на содержание фенолов в листьях некоторых сортов роз

Определение фенола основано на том, что в анализируемый раствор вводится избыток бромат-бромидной смеси, которая в кислой среде выделяет свободный бром, который реагирует с фенолом [Алексеев, 1972]. При добавлении к этому раствору иодида калия избыточный, не прореагировавший бром окисляет иодид до йода, который титруют стандартным раствором тиосульфата натрия [Алексеев, 1972].

Реактивы:

    1. Тиосульфат натрия 0,02 М раствор (или стандартизированный); 2. Бромат-бромидная смесь; 3. Серная кислота 1М раствор; 4. Крахмал, 0,5% раствор; 5. Иодид калия, KI (кристаллический).

Посуда:

    1. Колба мерная, 500 мл; 2. Колба коническая, 250-300 мл; 3. Мерный цилиндр, 20 мл; 4. Пипетки 20 и 25 мл; 5. Бюретка, 25 мл.

Выполнение работы.

Рассчитали концентрацию фенола по формуле (1):

Где C(C6H5OH) - концентрация фенола (мг/л);

C(Na2S2O3) - концентрация тиосульфата натрия (мг/л);

V2 - объем тиосульфата натрия, затраченный на титрование аликвоты;

V1 - объем тиосульфата натрия, затраченный на титрование контроля;

M (1/6С6Н5ОН) - молярная масса эквивалента фенола;

Vпр - объем пробы, взятый для анализа [Алексеев, 1972].

Бромат-бромидный раствор приготовили по навеске: 0,334 г KBrO3 и 1,2 г KBr растворили в дистиллированной воде и довели до метки в мерной колбе вместимостью 500 мл, в этом случае концентрация приблизительно равна 0,024 М. Для получения такой же концентрации раствор можно приготовить из фиксанала KBrO3, но в этом случае содержимое запаянной ампулы нужно растворить в 4 л дистиллированной воды [Алексеев, 1972].

Для анализа отобрали аликвоту (10 мл) раствора, в котором содержится 0,02 - 0,4 г/л фенола, пипеткой в коническую колбу для титрования. Прибавили 12 мл (пипеткой) бромат-бромидной смеси, 10 мл 1М раствора серной кислоты, закрыли пробкой и оставили на 30 мин. Затем прибавили 1 г иодида калия, взвешенного на технических весах, и снова закрыли пробкой. Через 5 мин титровали выделившийся йод раствором тиосульфата натрия, прибавляя в конце титрования, когда окраска раствора станет светло-желтой, 2 - 3 мл раствора крахмала. Титрование продолжали до исчезновения синей окраски раствора. Проводили три титрования и рассчитали средний объем V1 из сходящихся результатов [Васильев, 1989].

Определение общей массы брома, выделяющейся из бромат-бромидного раствора, выполнили следующим образом.

В чистые конические колбы прилили дистиллированную воду в том же объеме, в каком был взят анализируемый раствор, прибавили 25 мл (той же пипеткой) бромат-бромидный раствор, 10 мл 1М раствора серной кислоты, закрыли пробкой, выдержали 30 мин, прибавили 1 г иодида калия и также через 5 мин оттитровали выделившийся иод тиосульфатом натрия. Титрование повторили три раза, нашли средний результат V2.

Провели перерасчет концентрации фенола в миллиграммах на килограмм биомассы.

Для анализа содержания фенола в вегетативных органах растений были взяты пробы листьев чайно-гибридных роз с каждого участка. Выбор роз чайно-гибридной группы был обусловлен тем, что представители этой группы росли на каждом из исследуемых участков. Были взяты пробы по 2 г листьев с каждого участка. Сбор проводился в третьей неделе июля.

Анатомические методы исследования

Анатомическое строение листа и стебля представителей рода Rosa L. (сорта Блэк Баккара, Гран-при, Джеральдо) изучали на кафедре биологии и экологии растений.

Для этого были отобраны образцы листьев и стеблей с 5 экземпляров с каждой популяции. Фиксацию материала и изготовление препаратов проводили по общепринятой методике [Прозина, 1960]. Срезы изготавливали вручную, с помощью лезвий, при этом высечки растительного материала были помещены в сердцевину бузины. Окрашивание срезов проводили сафранином, с дальнейшим заключением их в глицерин-желатину, а затем рассматривали под микроскопом "Биолам".

Похожие статьи




Дендрологические методы работы, Химический анализ на содержание фенолов в листьях некоторых сортов роз, Анатомические методы исследования - Характеристика рода Rosa L. во флоре города Краснодара

Предыдущая | Следующая