ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОДВИЖНОСТИ СПЕРМИЕВ, ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ СПЕРМИЕВ - Сперма сельскохозяйственных животных и ее свойства
Подвижность спермиев (активность) -- это способность их к прямолинейно-поступательному движению (ППД). Оценку на подвижность проводят в раздавленной капле, для чего на чистое, подогретое предметное стекло наносят каплю свежеполученной спермы, накрывают ее покровным стеклом. Стекло помещают на электрообогревательный столик, установленный на предметном столике микроскопа. Визуальную микроскопическую оценку проводят в затемненном поле зрения при увеличении в 140 или 280 раз. При этом определяют не подвижность отдельных спермиев, а процент спермиев с ППД во всем поле зрения микроскопа. Результаты оценки выражают в баллах. Принята 10-балльная оценка, причем каждый балл соответствует 10% спермиев с ППД. Свежеполученная сперма считается пригодной, если подвижность не менее 8 баллов для барана и быка, 7 баллов -- для хряка и 5 баллов -- для жеребца.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ СПЕРМИЕВ
Концентрация спермиев определяется в каждом эякуляте. Эти данные необходимы для расчета кратности разбавления спермы. Кратность разбавления устанавливается с таким расчетом, чтобы в каждой дозе разбавленной спермы было предусмотренное ГОСТом число спермиев. Концентрацию спермиев можно определить несколькими методами: подсчетом в камере Горяева; по J оптическому стандарту; при помощи фотоэлектроколориметра; электронным счетчиком частиц. Достаточно точным методом определения концентрации спермиев является подсчет в камере Горяева. Однако он утомителен и требует много времени -- 15--20 мин на оценку каждого эякулята. Для определения концентрации спермиев этим методом цельную сперму разбавляют в меланжере 3%-ным раствором натрия хлорида: быка -- в 100 раз, барана -- в 200 раз, хряка и жеребца -- в 20 раз. Камеру Горяева с притертым покровным стеклом заряжают разбавленной спермой, кладут на предметный столик микроскопа, отыскивают сетку и, отрегулировав освещенность поля зрения, производят подсчет спермиев в пяти больших квадратах, расположенных по диагонали. Для пересчета на 1 см3 пользуются упрощенными формулами: С=Н/100 (баран); С = Н/200 (бык) С = Н/1000 (хряк, жеребец), где С -- концентрация спермиев в млрд/мл; Н -- число подсчитанных спермиев в пяти больших квадратах. Применение оптического стандарта основано на том, что чем больше мутность исследуемой спермы, тем выше концентрация спермиев. Этот метод легко и быстро выполним, но по точности значительно уступает прямому подсчету спермиев. Оптический стандарт для определения концентрации спермиев в сперме хряка (автор С. И. Сердюк) представляет собой запаянную пробирку из прозрачного стекла диаметром 12--14 мм; в ней содержится жидкость, имитирующая по степени мутности сперму хряка с концентрацией спермиев 5 млн/мл. При определении концентрации в другую пробирку того же диаметра наливают 1--2 мл 1%-ного раствора натрия хлорида и вносят микропипеткой как можно точнее 0,1 мл профильтрованной спермы. Снова добавляют раствор натрия хлорида, пока степень мутности не сравняется с таковой стандарта. Затем вычисляют концентрацию спермиев. Если, например, на 0,1 мл спермы пошло 2,9 раствора натрия хлорида (степень разведения 30 раз), концентрация спермиев в исследуемом эякуляте равна 150 млн/мл. Применение фотоэлектроколориметра (ФЭК-56) или фотодиод КФК-2 позволяет оценить эякулят по концентрации спермиев за 1--2 мин. Принцип работы ФЭК заключается в том, что пучок света от специальной лампы проходит через светофильтр, затем через кювету с исследуемой спермой попадает на селеновый фотоэлемент (ФЭК-56) или фотодиод (КФК-2), преобразующий световую энергию в электрическую. Электрическая энергия подводится к миллиамперметру, стрелка которого отклоняется в сторону от нуля. Степень отклонения стрелки зависит от величины электрического тока, а она обратно пропорциональна оптической плотности спермы. Для перевода найденной величины оптической плотности в соответствующую ей концентрацию спермиев необходимо заранее подготовить калибровочную шкалу или найти коэффициент-множитель. Для построения калибровочной шкалы используют разведения спермы с различной концентрацией спермиев. Разбавление спермы проводят путем добавления плазмы спермы, которую получают центрифугированием спермы при 5--8 тыс. об/мин в течение 15-20 мин. Сперму разбавляют спермальной плазмой из расчета получения разведения с интервалом концентрации спермиев 0,1--0,15 млрд/мл. Концентрацию спермиев в каждом разведении уточняют путем подсчета в камере Горяева. Приготовленные разведения колориметрируют и находят соответствующие величины оптической плотности. При построении калибровочной шкалы в определенном масштабе на миллиметровой бумаге по горизонтальной оси откладывают значения оптической плотности, а по вертикальной -- соответствующие величины концентрации спермиев. Точки пересечения восстановленных от указанных величин перпендикуляров соединяют диагональной линией. Калибровочную шкалу строят для каждого ФЭК, для каждого вида животных отдельно. В связи с тем, что по мере износа фотоэлементов показания на ФЭК могут изменяться, калибровочную кривую ежемесячно сверяют с показаниями счетной камеры Горяева. Для получения коэффициента-множителя необходимо провести исследование 15--20 эякулятов. Концентрация спермиев в каждом эякуляте определяется с помощью фотоэлектроколориметра и подсчетом в камере Горяева. Полученные данные суммируют отдельно по каждому способу, а затем сумму концентрации (С) делят на сумму оптической плотности (Д): С/Д = коэффициент-множитель При определении концентрации спермиев полученные на ФЭК показатели оптической плотности умножают на коэффициент-множитель и получают искомую концентрацию спермиев в млрд/мл. Электронные счетчики частиц позволяют наиболее точно определить число спермиев в эякуляте. В этих приборах разбавленную пробу спермы пропускают через капилляр такого диаметра, чтобы только один спермий мог одновременно пройти между двумя электродами; это прохождение регистрируется электронным лучом и подается на монитор. Оценке по объему, подвижности, концентрации спермиев подлежит каждый эякулят. Без этих данных невозможно контролировать спермопродукцию производителей, дозировать ее по числу спермиев с прямолинейно-поступательным движением. На предприятиях и станциях искусственного осеменения прибегают и к другим методам оценки спермы, преимущественно в тех случаях, когда возникает необходимость иметь более полные сведения об эякуляте или дать заключение с состоянии половой системы производителя. Определение густоты проводится микроскопически. Если в поле зрения микроскопа между спермиями нет промежутков, сперма считается густой(Г); если промежуток не превышает размер спермия - средняя(С), а если промежуток превышает размер спермия, такая сперма считается редкой(Р). В густой сперме барана содержится не менее 2 млрд спермиев, быка - 1 млрд. В средней у барана от 1до 2 млрд, у быка - от 400 млн до 1 млрд.
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА СПЕРМИЕВ
Проводится ежемесячно, а также при подозрении на тот или иной патологический процесс в половых органах. Для оценки цельную сперму разбавляют 2,9%-ным раствором натрия цитрата: барана -- в 20--30 раз, быка -- в 10--15, хряка -- в 2--3 раза. Каплю разбавленной спермы помещают на край обезжиренного предметного стекла, делают тонкий мазок; его высушивают на воздухе, фиксируют 2--3 мин в 96° спирте-ректификате, окрашивают раствором генцианвиолета. Оценку спермиев в приготовленном мазке проводят под микроскопом при увеличении в 400 раз, при этом в каждом поле зрения подсчитывают общее количество спермиев и отдельно -- с анормальной морфологией. Всего сосчитывают 200--300 спермиев и вычисляют процент патологических. Повышенное содержание спермиев с анормальной морфологией может быть обусловлено воспалительными процессами в семенниках и придатках, придаточных половых железах, нарушением терморегулирующей функции мошонки, авитаминозом А.
Похожие статьи
-
Определение концентрации спермиев в счетной камере. Концентрация спермиев в сперме -- это степень насыщенности спермы сперматозоидами. Она выражается...
-
В пустую пробирку вносят 1,0 мл 1%-ного раствора натрия хлорида. Микропипеткой набирают 0,1 мл свежеполученной профильтрованной спермы. Конец пипетки...
-
ВВЕДЕНИЕ - Сперма сельскохозяйственных животных и ее свойства
В мошонке заключены два яичка. В тонких трубках внутри каждого яичка образуются сперматозоиды со скоростью 10-30 биллионов в месяц. Позади каждого яичка...
-
Оценка спермы по подвижности - Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных
Для проверки качества спермы необходимо использовать подогретые предметные и покровные стекла, находящиеся во время работы на обогреваемом столике...
-
ВЛИЯНИЕ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ И МЕДИКАМЕНТОВ - Сперма сельскохозяйственных животных и ее свойства
Большинство химических соединений для спермиев токсичны. Из неорганических веществ особенно ядовиты соли и окислы тяжелых металлов (ртуть, свинец),...
-
Метод основан на том, что в результате метаболических процессов образуется перекись водорода; при помощи дегидрогеназ водород переносится на метиленовую...
-
При работе со спермой (как свежеполученной, так и сохраняемой) необходимо учитывать влияние на спермиев таких внешних факторов, как температура, свет,...
-
СПЕРМИИ ИХ СТРОЕНИЕ, ВИДЫ И СКОРОСТЬ ДВИЖЕНИЯ - Сперма сельскохозяйственных животных и ее свойства
Спермий имеет микроскопически малую величину. Общая длина спермия составляет 60--70 мкм. В единице объема, соразмерном яйцу млекопитающих, вмещается...
-
Качество спермы - Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных
Успех осеменения зависит также от качества спермиев. Чем активнее их движение, тем меньшую дозу спермы можно применять. До недавнего времени при всех...
-
САНИТАРНАЯ ОЦЕНКА СВЕЖЕПОЛУЧЕННОЙ СПЕРМЫ - Сперма сельскохозяйственных животных и ее свойства
Включает определение общего количества апатогенных бактерий в 1 мл, коли-титр, индикацию патогенных грибов, возбудителей инфекционных болезней (в случае...
-
Хранение и оттаивание спермы - Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных
При работе с семенем (спермой) следует помнить, что на жизнеспособность спермиев влияют следующие факторы: - свет - солнечные лучи убивают спермиев,...
-
Оценка качества эякулята - Ветеринарно-санитарная экспертиза спермы сельскохозяйственных животных
Оценка качества эякулята по внешним показателям. Взятый эякулят подвергают макроскопической оценке. Сперму оценивают визуально по объему, цвету,...
-
В настоящее время в сельском хозяйстве для разведения сельскохозяйственных животных активно применяется на практике метод искусственного осеменения...
-
При выборе метода получения спермы следует ориентироваться на такой, который отвечает следующим основным требованиям: - позволяет получать эякулят без...
-
Проведение ветеринарно-санитарного контроля качества спермы дает нам следующие возможности: Определение репродуктивных способностей производителя;...
-
Исследование коли-титра спермы Коли-титр определяют для санитарной оценки спермы. Санитарно-показательными бактериями считают все разновидности кишечной...
-
Сперма представляет собой смесь спермиев (половых клеток) и секретов придаточных половых желез. Функция спермиев - оплодотворить яйцеклетку, функции...
-
Метод искусственной вагины - Методы получения спермы у самцов животных
На пунктах искусственного осеменения содержат специально выделенных здоровых самок, которых регулярно проверяют на заразные заболевания, или используют...
-
Определение гумуса в почве - Изучение физико-химических свойств почв
Определение гумуса в почве вели по методике описанной в [24] Приготовили хромовую смесь, растворив 20г бихромата калия K2Cr2O7 в воде объемом 400 мл....
-
ЕСТЕСТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ И ЕГО ТИПЫ - Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных
Процесс оплодотворения - это процесс соединения (слияния) воедино женской (яйцеклетки) и мужской (спермия) половых клеток. Появление оплодотворения,...
-
Таблица 1 Размеры положительных АЧС выборок (количества страт и животных по видам), использованные в расчетах для определения диагностической...
-
При этом методе упрощается вся работа по подготовке и получению спермы, а самое главное, удается получать идеально чистую, стерильную сперму, обладающую...
-
Оплодотворение яйцеклеток происходит в яйцепроводе. Образовавшиеся зиготы подвергаются дроблению, и большинство из них у крупного рогатого скота попадают...
-
Результаты суперовуляции определяются эффективным осеменением коров-доноров. Проблема оплодотворения яйцеклеток и получения биологически полноценных...
-
Техника искусственного осеменения овец - Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных
Овцы относятся к животным с влагалищным типом осеменения, у которых сперма при естественном осеменении изливается во влагалище, как можно ближе к...
-
Оптимальное время и кратность осеменения - Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных
Выбор сроков осеменения самок - один из наиболее важных факторов при организации и проведении искусственного осеменения. Оптимальным сроком осеменения...
-
Искусственное осеменение, его становление и развитие Первыми опытами по искусственному осеменению можно считать работы итальянца Лазаро Спалланцани...
-
Визоцервикальный способ осеменения - Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных
Способ получил название по греческим словам: "визо" - смотрю и "цервикс" - шейка. Иными словами - осеменение с визуальным контролем локализации шейки...
-
Эпицервикальный способ осеменения - Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных
Название способ получил по греческим словам "эпи" - около и "цервикс" - шейка. Иными словами - введение спермы как можно ближе к каналу шейки матки....
-
Разработка способов искусственного осеменения коров и телок базируется на трех основных положениях: Во-первых: Крупный рогатый скот принадлежит к...
-
Нормированное кормление производителей различных видов - Кормление сельскохозяйственных животных
Быки - производители Полноценное кормление быков в сочетании с правильным содержанием и режимом использования обеспечивает хорошее их состояние, высокую...
-
Строение и функции половых органов самцов - Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных
К половым органов самцов относятся: мошонка, семенники, придатки семенника, семенной канатик, спермопроводы, мочеполовой канал, придаточные половые...
-
При организации искусственного осеменения коров и телок руководствуются "Ветеринарно-санитарными правилами при воспроизводстве сельскохозяйственных...
-
Для определения нитрифицирующей способности почв ее компостируют в течение 12 дней, а затем определяют количество накопившихся в ней нитратов....
-
Химико-токсикологический анализ в ветеринарной токсикологии имеет решающее значение. При установлении диагноза на отравление, изучении миграции...
-
Введение - Кормление сельскохозяйственных животных
Кормление производитель телочка рацион Знание научных основ и систем полноценного кормления животных, использование новейших достижений в области...
-
Проводя испытания по качеству потомства необходимо учитывать такие факторы, как место, где проводилось испытание, его форма, число производителей и...
-
Правила получения спермы - Получение спермы посредством искусственной вагины
Получают сперму от производителей в условиях теплого, светлого, просторного манежа и идеальной чистоты. За 1,5 -- 2 ч до получения спермы в манеже и...
-
Ооцит беременность бесплодие животное Вымя коровы является одним из наиболее уязвимых органов. Одно из заболеваний вымени - мастит, возникает при...
-
Определение нитратов в почве - Изучение физико-химических свойств почв
Наличие нитратов в почве указывает на то, что растения получают азотное питание. Но эти соли очень подвижны, содержание их в почве постоянно меняется....
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОДВИЖНОСТИ СПЕРМИЕВ, ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ СПЕРМИЕВ - Сперма сельскохозяйственных животных и ее свойства