"ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ" - Методы диагностики болезней рыб
Цель занятия: научить правила взятия и пересылки больных рыб и патологического материала для лабораторных исследований.
Задания для практической работы: взять материал от больных для лабораторного исследования и оформить сопроводительную на исследуемый материал.
Больных или подозрительных рыб доставляют в ветеринарную лабораторию живыми. Для исследования берут 10--15 рыб (старшего возраста -- 5) на различных стадиях болезни с явно выраженными клиническими признаками.
Рыб перевозят в молочных бидонах или других емкостях, заполненных на 3/4 объема водой из того же водоема, откуда они взяты, или водой из артезианской скважины.
Летом при длительной транспортировке воду с рыбой постепенно охлаждают до температуры 12--15 °С, добавляя мелкие кусочки льда. Чтобы не вызвать у рыб температурного шока, нальзя допускать перепад температуры воды исходного водоема и транспортной емкости более 5--7 °С.
Если доставить в лабораторию живую рыбу невозможно, для бактериологического исследования берут кусочки органов и тканей рыб, помешают их в стерильную стеклянную посуду с 40%-ным водным раствором глицерина, закрывают пробкой, заливают парафином и направляют с нарочным.
Кровь, экссудат и другой жидкий патологический материал доставляют в стерильных запаянных пастеровских пипетках. Для микроскопического исследования эти же материалы посылают в лабораторию в виде мазков и препаратов-отпечатков (кляч-препаратов).
Для обнаружения бактерий исследуют выделения, органы и ткани рыб, а также кровь, экссудат, содержимое абсцессов, опухолей, инфильтратов, выделения из язв, паренхиматозные органы, содержимое кишечника, слизь с жабр и поверхности тела.
Летом бактериологические исследования патологического материала проводят не позднее чем через 2 часа после взятия. В исключительных случаях в лаборатории рыбоводного хозяйства делают бактериологические посевы на мясо-пептонный бульон и мясо-пептонный агар.
Для вирусологического исследования берут кусочки пораженных органов и тканей массой не более 3--5 г, замораживают или консервируют в 50%-ном растворе химически чистого глицерина (рН 7,2--7,4) в соотношении 1:5--1:10, помещают в стерильные флаконы, закрывают пробкой и заливают парафином.
Материал для гистологических исследований берут от погибших и вынужденно убитых рыб. Мелких рыб (мальки и сеголетки) после вскрытия брюшной полости фиксируют целиком, а от крупных берут органы или кусочки органов размером 2x3 см и толщиной 0,5-- 1,0 см. Кусочки из пораженных органов и тканей вырезают так, чтобы были захвачены нормальные и измененные участки. Независимо от степени поражения берут кусочки кожи с подлежащей мускулатурой, жабр, печени, почек, селезенки, сердца, кишечника, плавательного пузыря, головного мозга. Кишечник перед фиксацией осторожно вскрывают или делают на нем несколько надрезов, чтобы фиксирующая жидкость проникла в его полость. Головной мозг осторожно извлекают после вскрытия черепной коробки. Подлежащий исследованию материал помещают в широкогорлую стеклянную банку и фиксируют 10%-ным формалином в объеме, в 10 раз превышающем объем взятого материала.
Для гистохимических исследований патологического материала в качестве фиксатора используют жидкость Карнау (спирт абсолютный -- 60 мл, хлороформ -- 30 мл и ледяная уксусная кислота -- 10 мл) или жидкость Буэна (насыщенный раствор пикриновой кислоты -- 75 мл, концентрированный формалин -- 25 мл, ледяная уксусная кислота -- 5 мл). Так как выбор фиксатора зависит от цели дальнейшей обработки материала, на этикетке указывают фиксирующий раствор.
Взятую кровь используют для посева, приготовления мазков, гематологических и биохимических исследований. Цельную кровь стабилизируют гепарином (1000 ЕД/мл) или лимоннокислым натрием. Сыворотку крови получают общепринятым методом, помещают в стерильные запаянные ампулы, а летом консервируют 5%-ным раствором фенола (1--2 капли на 1 мл сыворотки) или тиомерсалом из расчета 10 мг препарата на 10 мл сыворотки. Отобранные жидкие материалы перевозят в термосе со льдом.
Мазки крови для исследования на кровепаразитов, выведения лейкоцитарной формулы готовят обычным способом, высушивают, нумеруют, завертывают каждый в чистую бумагу и направляют в лабораторию.
Для биохимических исследований берут цельную кровь в пробирки, добавляют к ней лимоннокислый или щавелевокислый натрий (на 1 мл 2 мг), раствор гепарина (1000 ЕД/мл), наклеивают этикетку и направляют в ветеринарную лабораторию.
Сыворотку крови для биохимических и серологических исследований получают следующим образом. Кровь собирают в небольшие пробирки и оставляют при комнатной температуре для свертывания. Отделившуюся от кровяного сгустка сыворотку отсасывают стерильной пастеровской пипеткой и отправляют в лабораторию в запаянных ампулах. Сыворотку, предназначенную для серологических исследовваний, консервируют 2%-ной борной кислотой, или 0,05%-ным фенолом (1--2 капли 5%-ного фенола на 1 мл сыворотки), или тиомерсалом 1:10000. Цельную кровь и сыворотку транспортируют в термосе со льдом. Материал должен быть доставлен в течение суток после взятия.
У крупных рыб извлекают пораженные паразитами органы (жабры, кишечник, печень и другие ткани) и помещают в банки с консервирующей жидкостью (70%-ный этиловый спирт или 4%-ный раствор формалина). Паразитические организмы, а также кусочки органов и тканей, где обнаружены паразиты, помещают в пробирки или флаконы с консервирующей жидкостью. При подозрении на протозойные болезни из исследуемого материала делают мазок и сразу опускают его на 15-- 20 мин. в жидкость Шаудина (50 мл насыщенного раствора сулемы и 25 мл абсолютного спирта). Маленькие кусочки тканей и органов, пораженных паразитическими простейшими, фиксируют в указанной смеси 30--120 мин. Затем стекла промывают водой и спиртами возрастающей крепости (50--60--70%) и сохраняют в 70%-ном спирте до исследования. Влажные мазки, кусочки органов и тканей с паразитами можно фиксировать также в жидкости Буэна. Фиксация мазков 1--20 мин., кусочков 1--12 час.
Перед консервированием гельминтов тщательно промывают в физиологическом растворе и выдерживают в нем до гибели паразитов.
Моногенетических сосальщиков (дактилогирусы, гиродакгилюсы и др.) консервируют в 4%-ном растворе формалина или глицерин-желатине (под покровным стеклом). Трематод и мелких цестод кладут на предметные стекла, накрывают покровным стеклом и помещают на несколько часов в бактериологическую чашку с 70%-ным спиртом. Затем при помощи кисточки гельминтов перекладывают в пробирку с 70%-ным спиртом.
Нематод и личиночные стадии цестод консервируют в жидкости Барбагалло (3%-ный раствор формалина на изотоническом растворе поваренной соли: 30 мл формалина, 9 г поваренной соли, 1000 мл дистиллированной воды). Для изготовления постоянных препаратов в канадском бальзаме живых нематод лучше консервировать в 70%-ном горячем спирте.
Крупных ленточных гельминтов после умерщвления в физиологическом растворе помещают в 70%-ный спирт.
При консервировании скребней в 70%-ном спирте осторожно выдавливают хоботок из влагалища путем слабого прессования переднего конца скребней под покровным стеклом.
Паразитических рачков консервируют в 3%-ном растворе формалина и сразу же переносят для хранения в 70%-ный спирт.
Пиявок фиксируют в 4%-ном растворе формалина. При этом у них сохраняется пигментация, что облегчает диагностику вида.
Патологический материал, предназначенный для бактериологического, паразитологического и других исследований, снабжают этикеткой, где указывают вид и возраст рыбы, название органа, из которого взят материал. Если в одну посуду помешают несколько объектов исследования, этикетку прикрепляют к каждой рыбе или органу или отдельные кусочки органа завязывают вместе с этикеткой в марлю. Этикетки надписывают простым карандашом и опускают в посуду с материалом таким образом, чтобы можно было легко прочесть надпись.
Пробы воды берут в нескольких точках водоема с таким расчетом, чтобы собранные образцы отражали гидрохимическое состояние водоема или загрязненность его отдельного участка (зоны гибели рыб, места впадения ручья или сбросного канала, района интенсивного поверхностного стока и т. д.), а также в незагрязненном участке (выше по течению). В прудах и других проточных емкостях берут пробы на вытоке воды.
Пробы воды (не менее 2 л) отбирают батометром из поверхностных (на глубине 50 см) и придонных слоев в чистые стеклянные или полиэтиленовые бутылки. Перед заполнением посуду ополаскивают 2--3 раза исследуемой водой. В тех случаях, когда время транспортирования пробы составляет более 1 сут, их рекомендуется фиксировать различными консервантами в зависимости от целей исследования. Зимой воду при транспортировании следует утеплять, чтобы исключить ее замерзание.
Пробы грунта (массой 2 кг) берут также из разных зон водоема дночерпателем Экмана или Кирпичникова. Грунт сушат на воздухе и упаковывают в широкогорлые банки или полиэтиленовые мешки (рис. 2).
Рис. 2. Приспособления для взятия проб грунта и планктона: А -- скребок; Б -- дночерпатель; В -- планктонная сетка
Планктон собирают планктонной сеткой, фильтруя такое количество воды, которое необходимо для получения около 50 г живой массы планктона.
Отобранные материалы подробно описывают, этикетируют, упаковывают в водонепроницаемую тару, опечатывают и высылают с нарочным в ветеринарную лабораторию или другое учреждение, где имеются возможности для исследования. В сопроводительном письме сообщают данные обследования водоема, указывают предполагаемый диагноз и какие лабораторные исследования необходимо провести.
Похожие статьи
-
Присланный в лабораторию материал принимают и, по возможности, сразу же начинают исследовать, а, если это невозможно, то материал хранят до исследования...
-
Наружный осмотр рыбы - Методы диагностики болезней рыб
До начала наружного осмотра рыбы следует точно определить видовую принадлежность исследуемого экземпляра, его размеры (длину, высоту и обхват) и вес....
-
При выборе материала учитывают тропизм вирусов и клиническое проявление болезни, вид и возраст животного, стадию болезни, наличие видимых изменений в...
-
"ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ РЫБ" - Методы диагностики болезней рыб
Цель занятия: Научиться проводить патоморфологическое исследование рыб. Задание для практической работы: Провести патоморфологическое вскрытие...
-
Клиническое обследование стада рыб - Методы диагностики болезней рыб
Клинический осмотр проводят выборочно непосредственно в водоеме, при контрольном отлове или посадке рыб в специальные емкости (аквариумы, садки, бассейны...
-
Рефлексологический метод диагностики беременности и бесплодия позволяет диагностировать начальные стадии беременности у взрослых животных с точностью до...
-
Исследование внутренних органов рыбы - Методы диагностики болезней рыб
Кровь. При наружном осмотре рыбы местоположение сердца определяется положением узкого мыса брюшной стенки тела между жаберными крышками. Кровь "берут...
-
Лабораторная диагностика - Диагностика и лечение болезни Ауески у поросят
Основная схема лабораторной диагностики вирусных болезней включает: I .Вирусологический метод 1. Обнаружение вируса 1)микроскопией мазков (лучше...
-
Материал для исследований от заболевших, павших или вынужденно убитых животных следует брать как можно быстрее после появления четких признаков болезни...
-
Патогистологическая диагностика - Судебно-ветеринарная экспертиза трупа животного
В необходимых случаях наря-ду с патологоанатомической диагностикой осуществляют и пато-гистологическую. С этой целью можно рекомендовать исследова-ние...
-
Эпизоотологическое исследование рыбохозяйственных хозяйств - Методы диагностики болезней рыб
Прежде чем приступить к клиническому осмотру и лабораторным исследованиям, необходимо собрать и проанализировать анамнестические, эпизоотологические...
-
Клинический осмотр, Лабораторные исследования - Болезни пищеварительного аппарата жвачных
Все животные из двух выбранных группы были проведены общее клиническое обследование. Особое внимание было уделено осмотру животного, подсчету количества...
-
Материалы и методы исследования - Болезни пищеварительного аппарата жвачных
Выпускная квалифиционная работа была выполнена в условиях фермерского хозяйства "Красносельское" по адресу Ленинградская область, Ломоносовский р-н, дер....
-
Особенности взятия и пересылки патологического материала Материалом для прижизненной диагностики служат кровь и моча, для посмертной - трупы мелких...
-
Правила взятия и пересылки материала для вирусологического исследования - Ветеринарная микробиология
Для вирусологических исследований желательно направлять пробы от животных в трех стадиях болезни: - от свежих трупов (кровь, кость, лимфоузел и...
-
Цель занятия: Изучить основные этапы эпизоотологического исследования рыбохозяйственных хозяйств и методы клинического обследования рыб. Задания для...
-
Клинико-эпизоотологическая или до-лабораторная диагностика - проводится в хозяйствах и позволяет поставить лишь предварительный диагноз, проводится...
-
В условиях производственной обстановки ветеринарные специалисты ощущают острую необходимость в специальных вопросах, где были бы даны отправные сведения,...
-
Лабораторные животные, цели и методы их использования в вирусологии - Ветеринарная вирусология
В связи с тем, что вирусы могут размножаться только в живых клетках, на самых ранних этапах развития вирусологии широко применяли культивирование вирусов...
-
Материалы и методы исследований При написании данной курсовой работы я пользовалась ветеринарным законодательством том 4 (инструкция по борьбе с...
-
Обращают внимание на состояние кормовой базы, качество кормов, на уровень и тип кормления, и структуру рациона, режим кормления, поения и качество воды....
-
ЭНТЕРАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ ВВЕДЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ - Внутренние болезни животных
Введение лекарственных веществ через рот (Per os) . При избрании способа введения лекарственных средств необходимо руководствоваться фармакологическими...
-
Лабораторная диагностика - Лейкоз крупного рогатого скота
Диагноз на лейкоз ставят на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патанатомических изменений и результатов лабораторных...
-
Диагностика, Лечение, Профилактика - Гаффская болезнь
Гаффский болезнь кошка рыба Токсичность рыбы проверяют в биопробах на кошках. Так описано клиническое течение Сартланской болезни у подопытных животных:...
-
Схема лабораторной диагностики вирусных инфекций - Ветеринарная вирусология
Лабораторная диагностика - это система мер по обнаружению, индикации вируса. В нее входят: получение посланного патологического материла, исследование...
-
Существующие методы лечения и профилактики - Болезни пищеварительного аппарата жвачных
В последние годы накопилось большое количество данных о лечении ацидоза рубца, так например Г. Г. Щербаков, А. В. Коробов и др, (2002) для лечения...
-
Собственные исследования - Болезни пищеварительного аппарата жвачных
Моча При обследовании животных контрольной и опытной группы на ацидоз рубца анализ мочи имеет очень большое диагностическое значение. Сбор мочи...
-
Смотри вопрос №7 Общие принципы серологических реакций и их использование в диагностике вирусных болезней В целях определения вида данного вируса при...
-
Серологический метод диагностики лейкоза - Лейкоз скота
Основан на выявлении в сыворотке крови животных при помощи РИД антител к антигену ВЛКРС. Специфические антитела появляются в крови крупного рогатого...
-
Дифференциальная диагностика болезни - Диагностика и лечение болезни Ауески у поросят
Болезнь Ауески у свиней следует дифференцировать от болезни Тешена и бешенства. Болезнь Тешена (энтеровирусный энцефаломиелит свиней) -...
-
Паразитарные болезни лабораторных грызунов
За последние два десятилетия у людей во многих странах мира существенно возрос интерес к содержанию мелких и экзотических животных, таких как морские...
-
Цели и задачи исследования Целью данной работы является разработка метода укоренения микрорастений сортов земляники садовой ex vitro, то есть в...
-
Методы введения лекарственных средств - Внутренние болезни животных
Всякое вмешательство ветеринарного врача, в целях оказания лечебной помощи больному животному, должно проводиться в обстановке, обеспечивающей больного...
-
Специальное исследование, Результаты лабораторных исследований - Особенности биопсии печени
Исследование сердечно-сосудистой системы. Сердечный толчок боковой - толчкообразные сотрясения грудной клетки с обеих сторон. Изменений колебания грудной...
-
СИМПТОМАТИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ, Методы терапии - Внутренние болезни животных
Сущность ее заключается в использовании средств терапии, направленных на ликвидацию или ослабление наиболее угрожающих для жизни животного симптомов...
-
Клинические признаки болезни - Диагностика и лечение цистита у животного
Очень важно своевременно распознать типичные признаки заболевания: 1. ненормальное мочеиспускание, включая кровь в моче, ненормальный цвет мочи,...
-
Причиной возникновения дисфункции молочной железы являются колебания вакуума при машинном доении, передержка доильных стаканов после опорожнения вымени,...
-
Материалы и методы. - Исследование инкубационного периода при остром течении африканской чумы свиней
Выборка данных инкубационных периодов из публикаций. Всего было идентифицировано и использовано 16 ранних (1958-1999 годы) и 5 поздних (2004-2013 годы)...
-
Этиология болезни - Диагностика и лечение цистита у животного
Патология мочевыводящей системы, а в первую очередь мочекаменная болезнь (МКБ), занимет одно из первых мест по частоте обращений в ветеринарные клиники....
-
Материал исследования Исследование проводилось в 2014 году в период с 17.06.14 по 27.07.14 и с 02.09.14 по 12.10.14. В лаборатории биотехнологии...
"ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ" - Методы диагностики болезней рыб