Получение посевного материала в производственных инокуляторах или посевных аппаратах - Этапы получения лизина
Эта важная технологическая операция, состоящая в обеспечении основного производства достаточным количеством высококачественной биомассы клеток продуцента для засева промышленных ферментеров.
Начало процесса ферментации в посевных аппаратах, как и в основных ферментерах, начинается с засева их производственным штаммом, выращенным в необходимом количестве на предыдущих стадиях культивирования. В зависимости от продуцента количество посевного материала, передаваемого в посевной аппарат, может варьировать в широких пределах от 1 до 20% (обычно 3-5%) по объему. Коэффициент заполнения посевного аппарата в зависимости от конструкции его отдельных узлов (способ перемешивания, наличие эффективных механических пеногасителей и др.) составляет 0,5-0,7. Перемешивание среды достигается либо в результате барботажа стерильного воздуха, либо турбинной мешалкой со скоростью вращения 300 об/мин.
При выращивании культуры продуцента состав питательных сред может несколько меняться в зависимости от употребляемого штамма и основного источника углерода (см. таблицу 1.4.2.1.).
Таблица 1.4.2.1. Питательная среда для культивирования продуцента лизина в посевном аппарате (в %)
Меласса (по содержанию сахара) |
7,5 |
Кукурузный экстракт (содержание СВ 50%) |
2 |
Сульфат аммония |
2 |
Калия фосфат: однозамещенный |
0,05 |
двухзамещенный |
0,05 |
Мел |
1 |
Пеногаситель синтетический |
0,1 |
Вода |
Остальное |
PH среды |
6,9-7,0 |
Посевную культуру выращивают при температуре 28-32°С в течение 18-24 ч и расходе воздуха 1 объем на 1 объем жидкости в 1 мин. В течение всего процесса культирования pH среды поддерживают на уровне 7,0-7,2. Об окончании процесса судят по оптической плотности культуральной жидкости и морфологическим признакам выросших клеток.
Культивирование продуцентов лизина на ацетатной среде характеризуется рядом особенностей. Поскольку присутствующий в среде ацетат угнетает биосинтез ферментов цикла трикарбоновых кислот, предельно допустимое содержание субстрата не должно превышать 2%. Поэтому при культивировании осуществляют его дробную подачу. Установлено, что наилучших результатов в производстве биомассы удается достичь при использовании в качестве источника углерода смеси уксусной кислоты с ацетатом аммония, взятых в определенном соотношении, устанавливаемом для каждого штамма экспериментально. При этом в пересчете на уксусную кислоту общая концентрация ацетат-ионов не должна превышать 1,5-2,0%.
Наиболее перспективным не только для роста клеток, но и для биосинтеза лизина оказалось применение в качестве субстрата смеси ацетата с легкоусвояемым углеводом -- сахарозой или глюкозой. Источником последних обычно служит та же меласса или гидрол, в исходной питательной среде их количество должно быть сравнимо с ацетатом.
По завершении процесса ферментации в посевных аппаратах готовая культура не должна содержать фагов, посторонней микрофлоры и иметь титр около 109 клеток на 1 мл. После проведения микробиологического контроля выращенный продуцент передают на стадию производственной ферментации.
Похожие статьи
-
Культивирование продуцента и биосинтез лизина в промышленных ферментерах - Этапы получения лизина
Проводят в стандартных биореакторах объемом 50, 63 и 100 м3. Такие аппараты должны обеспечить нормальный рост и развитие промышленного продуцента в...
-
Процесс биосинтеза в производственных условиях начинают с получения посевного материала в инокуляторах и посевных аппаратах. Питательная среда для...
-
Методика исследования влияния температуры, Приготовление питательной среды - Этапы получения лизина
Методика исследования влияния температуры на штамм B-11167 Corynebacterium glutamicum включает в себя следующие этапы: - подготовка разведений на основе...
-
Обзор литературы, Роль лизина в питании человека и животных - Этапы получения лизина
Роль лизина в питании человека и животных Лизин (б, е-диаминокапроновая кислота) - незаменимая основная алифатическая аминокислота. Это специфичная...
-
Объект и методы исследования, Объект исследования - Этапы получения лизина
Объект исследования Штамм Corynebacterium glutamicum B-11167 депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) и имеет...
-
Результаты исследования, Характеристика загрязнителей - Этапы получения лизина
Характеристика загрязнителей Как указывалось ранее, агаризованная среда LB, на которой рекомендовано поддерживать активность культуры Corynebacterium...
-
Подсчет колоний микроорганизмов производился с помощью счетчика колоний Flash&;Go. Изначально с помощью сопутствующей программы производилась калибровка,...
-
Технология биосинтеза лизина - Этапы получения лизина
Производство аминокислот в виде высокоочищенных кристаллических препаратов строится по схеме, типичной для получения и выделения вторичных метаболитов....
-
Методы исследования, Методика оживления и очистки культуры - Этапы получения лизина
В основу эксперимента положена методика культивирования бактерии продуцента лизина штамма B-11167 Corynebacterium glutamicum на основе сред, предложенных...
-
Структура генома, Клеточная структура и метаболизм - Этапы получения лизина
Corynebacterium glutamicum имеет при себе круговую хромосому и несколько плазмид. Ее геном состоит из 3314179 нуклеотидов (в расчет берется геном штамма...
-
Производство высококонцентрированных кормовых препаратов - Этапы получения лизина
При получении высококонцентрированных кормовых препаратов лизина готовую культуральную жидкость предварительно подкисляют серной кислотой до pH 1,6-2,0....
-
Статистическая обработка результатов - Этапы получения лизина
Математическую статистику, прежде всего, используют для планирования опытов. Ее основной задачей является определение достоверности полученных...
-
Влияние температуры на рост культуры - Этапы получения лизина
Следующий эксперимент был разделен на 2 части: было измерено количество колоний в чашках Петри для анализа объемов роста и были измерены размеры колоний...
-
Исследование морфологии клеток - Этапы получения лизина
В ходе эксперимента нам удалось пронаблюдать некоторые отличия от данных исходного паспорта штамма B-11167 Corynebacterium glutamicum. К примеру, длины...
-
Производство кормового препарата ЖКЛ (жидкого концентрата лизина) - Этапы получения лизина
Технология производства ЖКЛ основана на упаривании готовой культуральной жидкости до содержания 40% АСВ. Для этого предварительно нагретую до температуры...
-
Применение в биотехнологии - Этапы получения лизина
Некоторые характеристики Corynebacterium glutamicum делают ее чрезвычайно полезной в биотехнологии. Она не патогенна, не образует спор, быстро растет,...
-
Характеристика Corynebacterium glutamicum - Этапы получения лизина
Систематическое положение: домен - Bacteria; тип - Actinobacteria; класс - Actinobacteria, порядок - Actinomycetales; семейство - Corynebacteriaceae, род...
-
Приготовление разбавлений - Этапы получения лизина
Для микробиологического анализа микрофлоры сыра мы использовали три разбавления - 1:106, 1:107 и 1:108. Стерильную дистиллированную воду разливали по 9...
-
Пути микробного синтеза - Этапы получения лизина
Производство аминокислот в промышленных масштабах является третьим наиболее важным направлением в белой биотехнологии, не превосходящим по своим объемам...
-
Процессы, основанные на микробиологической ферментации, разработаны и для получения ряда других органических кислот. Среди них -- глюконовая кислота и ее...
-
В конце XIX в. началось промышленное производство молочной кислоты при участии молочнокислых бактерий Lactobacillus delbrueckii, L. leichmannii и L....
-
К числу бактерий, способных вырабатывать салициловую кислоту (рис. 4.4) при росте в средах с нафталином, принадлежат многие виды Pseudomonas,...
-
Выбор конструкционного материала - Колонные аппараты
При выборе конструкционного материала учитываются следующие факторы: рабочее давление в аппарате, температура среды и ее коррозионная активность. В...
-
Технология получения стекла Технология получения стекла состоит из двух производственных циклов. Цикл технологии стекломассы включает операции: А)...
-
Описание конструкции колонны и обоснование ее выбора Основными показателями при выборе типа тарелки являются ее эффективность (или число единиц переноса...
-
АБСОРБЦИЯ ТРИОКСИДА СЕРЫ. - Получение серной кислоты
Последней стадией процесса производства серной кислоты контактным способом является абсорбция триоксида серы из газовой смеси и превращение его в серную...
-
Отбор пробы воды следует рассматривать как стадию, в значительной степени определяющую правильность последующего анализа, причем ошибки, допущенные в...
-
Азотный кислота утилизация оксид Методы получения азотной кислоты Первый завод по производству HNO3 из аммиака коксохимического производства был пущен в...
-
Процесс получения винилхлорида сбалансированным методом из этилена состоит из шести стадий: 1. синтез 1,2-дихлорэтана прямым жидкофазным хлорированием...
-
При использовании разомкнутых химико-технологических систем в большинстве случаев принципиально невозможно проведение процессов при практически полной...
-
Закалочно-испарительный аппарат (Х-1) представляет собой теплообменник смешения. Поток пирогаза охлаждается водой, которая, испаряясь, забирает часть...
-
ПОДГОТОВКА ОБЖИГОВОГО ГАЗА К КОНТАКТНОМУ ОКИСЛЕНИЮ. - Получение серной кислоты
Подготовка обжигового газа к контактному окислению заключается в удалении из него примесей, присутствие которых может вызвать затруднения при проведении...
-
Производство лимонной кислоты методом ферментации - Бродильное производство органических кислот
Производство лимонной кислоты методом ферментации при участии грибов также принадлежит к числу давних биотехнологических процессов; оно было налажено в...
-
В человеческом организме количество магния составляет всего несколько десятых или сотых долей процента, однако он играет немаловажную роль в процессах...
-
МЛЭ - один из современных и много обещающих технологических методов выращивания тонких монокристаллических полупроводниковых структур. Для осаждения...
-
Способы получения благородных газов - Благородные газы и их свойства
Благородные газы встречаются в земной коре и атмосфере. Гелий - второй по распространенности элемент во Вселенной, в земной коре содержание гелия...
-
Отсутствие моделей и количественных методик, позволяющих оценить эффект от намеченных интеграционных процессов и степень их влияния на экономическую...
-
Действие на организм, Получение аммиака - Аммиак
Аммиак сильно раздражает слизистые оболочки уже при 0,5%-ном содержании его в воздухе. Острое отравление аммиаком вызывает поражения глаз и дыхательных...
-
Заключение, Список использованной литературы - Колонные аппараты
В курсовом проекте в соответствие с заданием приведены следующие разделы: - описание технологической схемы; - выбор конструкции колонны и...
-
ВВЕДЕНИЕ. - Получение серной кислоты
Химическое производство представляет собой сложную химико-технологическую систему (ХТС), сложность которой определяется как наличием большого количества...
Получение посевного материала в производственных инокуляторах или посевных аппаратах - Этапы получения лизина