Объект и методы исследования, Объект исследования - Этапы получения лизина
Объект исследования
Штамм Corynebacterium glutamicum B-11167 депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) и имеет регистрационный номер ВКПМ В-11167. И, согласно паспорту, обладает следующими культурально-морфологическими признаками:
- - клетки овальные, размером 1,0-1,5x0,6-0,8 мкм, неподвижные, грамположительные, полиморфны, спор не образуют; - через 3-5 суток роста при 30 °С на МПА образует колонии диаметром 2-4 мм, желтовато - кремовые, поверхность гладкая, форма выпуклая, край ровный, структура однородная тестообразная. При посеве штрихом через 2 суток рост умеренный, край гладкий, поверхность матовая; - через 3-5 суток роста при 30 °С на глюкозоминеральной среде Гловера, содержащей лейцин, биотин и тиамин, колонии 1 - 2 мм, край ровный, структура однородная, консистенция тестообразная, поверхность гладкая, цвет колоний светло-кремовый. Рост штриха на этой среде через 2 суток умеренный.
Указанный штамм обладает следующими физиолого-биохимическими признаками:
- - аэроб; - желатину не разжижает; - хорошо растет на глюкозе, сахарозе, мальтозе, фруктозе, маннозе, этаноле, уксусной кислоте. Не растет на ксилозе, арабинозе, лактозе, раффинозе; - усваивает азот в форме солей аммония и мочевины. Не усваивает нитратный азот; - растет при температуре 24-40 °С. Оптимальная температура 30-32 °С; - растет на средах с рН от 6 до 8,5. Оптимальное значение рН 6,8-7,2; - при росте в минимальной среде нуждается в биотине, тиамине и L-лейцине; - устойчив к аналогу лизина S-(2-аминоэтил)-L-цистеину (АЭЦ); - устойчив к стрептомицину.
Штамм обладает следующими генетическими характеристиками:
В составе ключевых генов, влияющих на уровень продукции лизина - генов аспартакиназы (lys С), гомосерин дегидрогеназы (hom), пируват карбоксилазы (рус) выявлены следующие мутации:
- - в гене lysC - точечная замена в позиции нуклеотидов G835A и двойная замена в триплете ТСС на GCT в позициях T949G и С951Т, что ведет к замене аминокислот А279Т и S317A, соответственно. - в гене hom - точечная замена в позиции нуклеотидов G443C, что ведет к замене аминокислоты G148A. - в гене рус - точечная замена в позиции нуклеотидов C1364G, что ведет к замене аминокислоты A455G. - штамм несет мутацию устойчивости к аналогу лизина S-(2-аминоэтил)-L-цистеину (АЭЦ) и мутацию устойчивости к антибиотику стрептомицину.
Предположительно данный штамм был получен методом классического или случайного мутагенеза, который включает в себя повторное мутации, выбор желаемого мутанта и последующей возгонки продуктивности с помощью постоянных пересевов.
Продуктивность штамма составляет не менее 130 г лизина с 1 л рабочего объема реактора при росте на среде, содержащей в качестве источников углерода глюкозный сироп и гидролизат глютена, что в принципе не является наибольшей величиной среди штаммов-продуцентов этого типа.
Похожие статьи
-
Культивирование продуцента и биосинтез лизина в промышленных ферментерах - Этапы получения лизина
Проводят в стандартных биореакторах объемом 50, 63 и 100 м3. Такие аппараты должны обеспечить нормальный рост и развитие промышленного продуцента в...
-
Результаты исследования, Характеристика загрязнителей - Этапы получения лизина
Характеристика загрязнителей Как указывалось ранее, агаризованная среда LB, на которой рекомендовано поддерживать активность культуры Corynebacterium...
-
Обзор литературы, Роль лизина в питании человека и животных - Этапы получения лизина
Роль лизина в питании человека и животных Лизин (б, е-диаминокапроновая кислота) - незаменимая основная алифатическая аминокислота. Это специфичная...
-
Методика исследования влияния температуры, Приготовление питательной среды - Этапы получения лизина
Методика исследования влияния температуры на штамм B-11167 Corynebacterium glutamicum включает в себя следующие этапы: - подготовка разведений на основе...
-
Методы исследования, Методика оживления и очистки культуры - Этапы получения лизина
В основу эксперимента положена методика культивирования бактерии продуцента лизина штамма B-11167 Corynebacterium glutamicum на основе сред, предложенных...
-
Влияние температуры на рост культуры - Этапы получения лизина
Следующий эксперимент был разделен на 2 части: было измерено количество колоний в чашках Петри для анализа объемов роста и были измерены размеры колоний...
-
Эта важная технологическая операция, состоящая в обеспечении основного производства достаточным количеством высококачественной биомассы клеток продуцента...
-
Технология биосинтеза лизина - Этапы получения лизина
Производство аминокислот в виде высокоочищенных кристаллических препаратов строится по схеме, типичной для получения и выделения вторичных метаболитов....
-
Процесс биосинтеза в производственных условиях начинают с получения посевного материала в инокуляторах и посевных аппаратах. Питательная среда для...
-
Производство высококонцентрированных кормовых препаратов - Этапы получения лизина
При получении высококонцентрированных кормовых препаратов лизина готовую культуральную жидкость предварительно подкисляют серной кислотой до pH 1,6-2,0....
-
Подсчет колоний микроорганизмов производился с помощью счетчика колоний Flash&;Go. Изначально с помощью сопутствующей программы производилась калибровка,...
-
Производство кормового препарата ЖКЛ (жидкого концентрата лизина) - Этапы получения лизина
Технология производства ЖКЛ основана на упаривании готовой культуральной жидкости до содержания 40% АСВ. Для этого предварительно нагретую до температуры...
-
Структура генома, Клеточная структура и метаболизм - Этапы получения лизина
Corynebacterium glutamicum имеет при себе круговую хромосому и несколько плазмид. Ее геном состоит из 3314179 нуклеотидов (в расчет берется геном штамма...
-
Исследование морфологии клеток - Этапы получения лизина
В ходе эксперимента нам удалось пронаблюдать некоторые отличия от данных исходного паспорта штамма B-11167 Corynebacterium glutamicum. К примеру, длины...
-
Применение в биотехнологии - Этапы получения лизина
Некоторые характеристики Corynebacterium glutamicum делают ее чрезвычайно полезной в биотехнологии. Она не патогенна, не образует спор, быстро растет,...
-
Пути микробного синтеза - Этапы получения лизина
Производство аминокислот в промышленных масштабах является третьим наиболее важным направлением в белой биотехнологии, не превосходящим по своим объемам...
-
Статистическая обработка результатов - Этапы получения лизина
Математическую статистику, прежде всего, используют для планирования опытов. Ее основной задачей является определение достоверности полученных...
-
Приготовление разбавлений - Этапы получения лизина
Для микробиологического анализа микрофлоры сыра мы использовали три разбавления - 1:106, 1:107 и 1:108. Стерильную дистиллированную воду разливали по 9...
-
1. Ознакомиться с методами регрессионного анализа и планирования эксперимента; 2. Определить коэффициенты статистической характеристики объекта...
-
Характеристика Corynebacterium glutamicum - Этапы получения лизина
Систематическое положение: домен - Bacteria; тип - Actinobacteria; класс - Actinobacteria, порядок - Actinomycetales; семейство - Corynebacteriaceae, род...
-
Современные методы исследования в химии - Этапы становления химии
С середины 20 в. происходят коренные изменения в методах химических исследований, в которые вовлекается широкий арсенал средств физики и математики....
-
В большинстве случаев структурная неопределенность вызвана неполнотой знания аналитической структуры уравнений модели объекта управления. При не...
-
Объект исследования и его модель - Основы научных исследований
Объект исследования - это первичное, не сводимое к более простым, понятие. Поэтому дать его общее определение невозможно. Однако можно указать примеры...
-
Из перечисленного обзора типов ММ, составляющих предмет ИСО, можно выделить следующие особенности ММ ИСО [3]. - Системный подход, заставляющий...
-
Пористые полупроницаемые мембраны, применяемые для диали-за, электродиализа, ультрафильтрации и осмометрии, как правило, не являются инертными чисто...
-
Общая схема исследования: 1. Составление среднего образца. 2. Извлечение пестицидов из пробы. 3. Очистка экстракта. 4. Анализ экстракта. Прием образцов в...
-
Вычисления для следующих входных данных F=1000H m=200 кг m'=1 кг/сек k=2 t0=0 сек V0=0 м/сек B=50 n=50 V1 (t) - результаты, полученные с помощью...
-
Конденсационные методы получения коллоидных систем - Методы очистки и получения коллоидных растворов
Из классификации дисперсных систем по размеру частиц следует, что коллоидные растворы (золи) занимают промежуточное положе-ние между молекулярными и...
-
Общие вопросы Привести объекты судебно-химического (химико-токсикологического) анализа. Дать понятие "вещественным доказательствам". Значение наружного...
-
Z -преобразование является одним из математических методов, разработанных для анализа и проектирования дискретных систем. Аппарат Z -преобразования...
-
Уравнение динамики теплообменника: Передаточные функции объекта получим по его уравнению динамики. Для этого запишем уравнение по заданному каналу. Затем...
-
Адсорбционные методы исследования свойств поверхности позволяют количественно охарактеризовать происходящие при адсорбции межмолекулярные взаимодействия,...
-
Этапы экономико-математического моделирования - Методы экономико-математического моделирования
Основные этапы процесса моделирования уже рассматривались выше. В различных отраслях знаний, в том числе и в экономике, они приобретают свои...
-
Обогащение калийной руды производится двумя методами: флотационным и химическим (галургическим). Флотационный метод Флотационный метод стал...
-
В предыдущем разделе обсуждается важность учета пространственных взаимодействий при изучении влияния факторов арендной ставки на рынке недвижимости, как...
-
Одно дерево бразильской гевеи в среднем, до недавнего времени, было способно давать лишь 2-3 кг каучука в год; годовая производительность одного гектара...
-
Сравнение методов получения хлорида калия - Производство хлорида калия галургическим способом
Флотационный метод обогащения по сравнению с галургическим (растворение и кристаллизация) имеет следующие преимущества: - флотация проходит при...
-
МЕТОД ПЛОСКОПАРАЛЛЕЛЬНОГО ПЕРЕМЕЩЕНИЯ - Основы моделирования геометрических объектов
Изменение взаимного положения проецируемого объекта и плоскостей проекций методом плоскопараллельного перемещения осуществляется путем изменения...
-
Полимерами называют вещества, молекулы которых (макромолекулы) состоят из одного или большего числа составных звеньев. Молекулярная масса (число атомов)...
-
Статистический характер экспериментальных исследований Любое экспериментальное исследование, в конечном итоге, сводится к изучению причинно-следственных...
Объект и методы исследования, Объект исследования - Этапы получения лизина