Использование беспозвоночных в качестве индикаторных организмов. - Предмет аналитической химии

Ответным сигналом простейших на изменение химического состава среды является раздражение, приводящее к каким-либо изменениям других биохимических и физиологических функций организма.

Наиболее изученными с точки зрения использования в аналитических целях являются инфузории Paramecium caudatum. C их помощью возможно определение ионов тяжелых металлов, однако они непригодны для обнаружения и определения анионов. Скорость движения инфузорий повышается при введении в среду их обитания микроколичеств этанола, сахарозы, фурфурола(C5H4O2- от лат. furfur-отруби-жидкость с запахом свежего ржаного хлеба), альдегидов, уксусной кислоты, хлоридов кальция и аммония; добавление хлорида бария замедляет движение клеток. Элементоорганические соединения при определенных концентрациях могут действовать как стимуляторы их размножения. Поведенческие реакции, скорость размножения инфузорий используют для определения указанных выше веществ.

Водных беспозвоночных - ракообразных (чаще всего ветвистоусых рачков, дафний) широко применяют для оценки санитарно-гигиенического состояния вод. В качестве аналитического сигнала в этом случае используют некоторые физиологические показатели: выживаемость, поведенческие реакции, частоту движения ножек, период сокращения сердца (у дафний), окраску тел погибших организмов. Патологические процессы в организмах в зависимости от концентрации определяемого химического соединения могут протекать быстро: сначала наблюдается общее возбуждение, переходящее в депрессию, а затем в результате нарушения деятельности органов движения, дыхания, кровеносной и нервной систем наступают потеря подвижности и летальный исход.

Регистрацию изменения скорости и траектории движения, фототаксического поведения насекомых (личинок комаров, жука долгоносика, дрозофилы), выживаемости этих организмов используют для определения остаточных количеств пестицидов в воде, экстрактах из почв, растительных и животных тканях.

Наблюдения под микроскопом формы и скорости движения червей, например нематод, пиявок и коловраток, фиксирование продолжительности их жизни позволяют определять микроколичества ионов металлов. В зависимости от концентрации металла в растворе нематоды ведут себя по-разному: в разбавленных растворах они быстро изгибаются то в одну, то в другую сторону, совершая как бы S-образные движения; с повышением концентрации движения становятся вялыми, замедляются. При достижении определенной критической концентрации металла организмы могут погибнуть, о чем свидетельствует выпрямление их тел. Методами последовательного разбавления анализируемого раствора до отрицательной реакции нематод на введение ионов, а также фиксирования продолжительности их жизни в зависимости от концентрации ионов металлов возможно определение микрограммовых количеств серебра, кадмия, цинка и меди.

Микроорганизмы как аналитические индикаторы.

К широко используемым в неорганическом анализе микроорганизмам относятся плесневые грибы рода Aspergillus. Наибольшим токсическим действием на эти культуры обладают нитраты ртути (II), кадмия, таллия, что объясняется блокированием ими SH-групп молекул белка микроорганизмов.

Грибы как аналитические индикаторы широко используют при анализе почв на содержание (на уровне 1 пг/мл - 10 нг/мл) биогенных элементов минерального питания высших растений, например цинка, меди, марганца, железа, молибдена. Возможно также определять в почвах усвояемые формы калия, фосфора, углерода, азота, серы. При этом учитывают то, что эффективности физиологического воздействия различных элементов на растения и микроорганизмы принципиально не различаются. Микробиологические методы анализа в данном случае часто оказываются более информативными, чем химические, так как позволяют определять не валовое содержание элементов, а их физиологически активные формы, влияющие на жизнедеятельность растений. Это позволяет наиболее полно характеризовать плодородие почв.

Ростовые реакции микроорганизмов, изменяющиеся под действием различных химических соединений, применяют в анализе природных и сточных вод. С использованием бактерий и дрожжей разработан диффузионный метод обнаружения в сточных водах фенолов, нефтепродуктов, фосфор - и элементоорганических соединений.

Чрезвычайно высокой чувствительностью определения некоторых биологически активных соединений отличается биолюминесцентный метод, основанный на реакции окисления кислородом воздуха субстрата люциферина (от лат. lucifer-несущий свет-класс светоизлучающих биологических пигментов, обнаруженных в организмах, способных к биолюминесценции), катализируемой ферментами люциферазами, выделенными из различных видов морских светящихся бактерий Photobacterium, Beneckea или жуков-светляков. Наряду с люциферином и люциферазой для протекания указанной реакции необходима аденозинтрифосфорная кислота (АТФ), которая участвует в многочисленных метаболических реакциях в организме, являясь аккумулятором энергии и ее источником для самых разных процессов, протекающих в живой клетке. Содержание АТФ в тканях, растительных и живых клетках свидетельствует об энергетическом состоянии клеток. При угнетающем или стимулирующем действии каких-либо веществ на рост микроорганизмов содержание АТФ в них соответственно понижается или повышается. Специфичность действия люциферазы светляков по отношению к АТФ, высокий квантовый выход реакции позволили создать на этой основе высокочувствительные и селективные методы определения АТФ, а также различных метаболитов, в процессе превращения которых образуется АТФ. Биолюминесцентный метод определения содержания АТФ в живых (растущих или гибнущих) клетках используют для экспресс-определения антибиотиков в крови, микробных бактерий в моче, для изучения повреждения клеточных мембран и других биохимических анализах и исследованиях.

Микроорганизмы широко применяют при изучении антибиотической активности веществ, их биологической роли, контроле технологических процессов промышленного производства антибиотиков, витаминов и аминокислот. Следует отметить еще один важный аспект применения микроорганизмов в химическом анализе - концентрирование и выделение микроэлементов из разбавленных растворов. Потребляя и усваивая микроэлементы в процессе жизнедеятельности, микроорганизмы могут селективно накапливать некоторые из них в своих клетках, очищая при этом питательные растворы от примесей. Например, плесневые грибы применяют для избирательного осаждения золота из хлоридных растворов, очистки растворов от ионов меди, цинка, железа.

Измерение аналитического сигнала в химических методах.

Гравиметрический анализ.

Гравиметрический анализ заключается в выделении вещества в чистом виде и его взвешивании. Гравиметрические определения можно разделить на 3 группы методов:

    1) осаждения 2) отгонки 3) выделения

Методы осаждения основаны на осаждении определяемого компонента в виде малорастворимого химического соединения, фильтровании, прокаливании (или высушивании) до постоянной массы и последующем определении массы полученного вещества. Методы отгонки основаны на отгонке определяемого компонента в виде летучего соединения с последующим определением массы отогнанного вещества (прямое определение) или массы остатка (косвенное определение). Например прямое определение CO2, выделяющегося при кислотном разложении карбонатов:

CaCO3+2HCl=CaCl2+CO2^+H2O

CO2+2NaOH=Na2CO3+H2O

Массу CO2 Определяют по увеличению массы поглотительной трубки, заполненной асбестом, пропитанным CaO и NaOH. Примером косвенного определения может служить метод определения кристаллизационной воды в неорганических соединениях:

BaCl2.2Н2O= BaCl2+2Н2O (при нагревании)

Содержание кристаллизационной воды определяют по разности массы образца до и после прокаливания.

Методы выделения основаны на количественном выделении определяемого компонента из анализируемого раствора путем химической реакции с последующим определением массы выделенного вещества. Этот принцип положен в основу электрогравиметрического анализа, в котором определяемый компонент выделяется из раствора в результате электрохимических реакций, протекающих на электродах. Среди гравиметрических методов анализа наиболее широко применяют метод осаждения, который и будет рассмотрен в дальнейшем.

Сущность метода.

Гравиметрическое определение обычно состоит из нескольких этапов:

    1) осаждение соединения, содержащего определяемое вещество (осаждаемая форма) 2) фильтрование полученной смеси для отделения осадка от надосадочной жидкости 3) промывание осадка для удаления надосадочной жидкости и адсорбированных примесей с его поверхности 4) высушивание при относительно низкой температуре для удаления воды или прокаливание при высокой температуре для превращения осадка в более подходящую для взвешивания форму (гравиметрическая форма) 5) взвешивание полученного осадка

Большинство аналитических методов используют зависимость между измеряемым свойством у и количеством определяемого вещества (или его концентрацией), которая в идеальном случае (отнюдь не всегда) линейна:

С=ку

Где к-константа

Обычно значение к находят эмпирически, измеряя сигнал у от одного или более образцов с известной концентрацией. Из этого правила есть 2 исключения: кулонометрический и гравиметрический. В гравиметрии к-гравиметрический фактор F, который можно рассчитать непосредственно из общеизвестных констант. В общем случае:

F=а-молекулярная масса определяемого вещества/b-молекулярная масса гравиметрической формы

А и b-числа, необходимые для уравнивания числа молей определяемого вещества в числителе и знаменателе. Различают осаждаемую форму-форма в виде которой определяемое вещество осаждают, и гравиметрическую форму осадка-форму в виде которой определяемое вещество взвешивают. Гравиметрическая форма может совпадать с осаждемой:

Ba2++SO42-=BaSO4(осаждаемая форма) - нагревание> BaSO4(гравиметрическая форма)

Или отличаться от нее:

2Fe3++6OH-=2Fe(OH)3(осаждаемая форма) - нагревание>Fe2O3(гравиметрическая форма)

Требования, предъявляемые к осаждаемой форме:

    1) в осадок должна выделяться только осаждаемая форма. Селективность осаждения достигается не только выбором селективного осадителя, но и регулированием pH раствора и применением веществ, маскирующих посторонние примеси. 2) осадок должен быть практически не растворим. Определяемый компонент должен выделяться в осадок количественно: его концентрация в растворе после осаждения не должна превышать 10-6M. При этом остаточное количество осаждаемого вещества находится за пределом точности взвешивания на аналитических весах (0,0002 гр). 3) осадок должен быть чистым, т. е. не должен содержать посторонние примеси. Крупнокристаллические осадки получаются более чистыми, чем мелкокристаллические или аморфные, т. к. захватывают меньше примесей.

Требования, предъявляемые к гравиметрической форме:

    1) гравиметрическая форма должна быть стехиометрическим соединением известного состава. 2) должна быть устойчива: не должна окисляться кислородом воздуха, поглощать из воздуха влагу или углекислый газ. 3) Желательно, чтобы значение F было мало (для снижения относительной погрешности результата определения нужного компонента).

Образование осадка.

При добавлении реагента-осадителя к раствору осаждаемого вещества образование твердой фазы не наблюдается более или менее длительный период. Даже если достигнуто ПР, т. е. содержание осаждаемого вещества равно растворимости или превышает ее, система остается гомогенной. Раствор, концетрация вещества в котором выше его растворимости, является пересыщенным. Такой раствор метастабилен, хотя и может существовать в отсутствие центров кристаллизации (которыми могут быть например пылинка) долгое время. Он играет роль переходного состояния. Для пересыщенного раствора существует некоторая предельная концентрация, называемого сверхрастворимостью, выше которой система становится неустойчивой, появляются мельчайшие твердые частицы-зародыши, и система из гомогенной переходит в гетерогенную.

Растворимость и сверхрастворимость зависят от природы вещества и теимпературы.

В области ниже кривой 1 раствор ненасыщен, область между кривыми 1 и 2 является метастабильной, в области над кривой 2 получаются зародыши, которые растут по мере добавления к раствору осадителя. Если добавить к раствору осаждаемого иона осадитель в количестве, не превышающем сверхрастворимость, то осадка сначала не будет, затем при достижении сверхрастворимости (точка b на кривой 2) образуются первые зародыши. Если далее добавить осадитель в количестве не превыщающем сверхрастворимости (до концентрации х) новые зародыши не образуются и осадитель тратится на рост уже имеющихся частиц. В этом случае следует ожидать образование крупнокристаллического осадка. В противном случае, если сверхрастворимость будет превышена сразу или же будет постоянно превышаться при добавлении осадителя (до у), то будут появляться все новые зародыши, в результате осадок будет мелкодисперсным. Например, несмотря на близкую растворимость осадков BaSO4(kS=1,3-10-10) и AgCl(kS=1,8-10-10), сверхрастворимость BaSO4 превышает растворимость в 30 раз, а AgCl менее, чем в 2 раза. Превысить сверхрастворимость AgCl легче, чем BaSO4, в результате осадок BaSO4-кристаллический, а AgCl-аморфный, состоящий из множества мелких частиц. Ясно, что сверхрастворимость малорастворимых осадков легче превысить, даже если она значительно отличается от растворимости и осадитель добавляют малыми порциями. Таким образом, дисперсность осадка определяется двумя процессами-образованием зародышей и ростом частиц. Скорость обоих процессов зависит от пересыщения.

Обозначим концентрацию растворенного вещества в какой-либо момент времени-Q, растворимость в состоянии равновесия-S. Относительное пересыщение равно:

(Q-S)/S

Скорость образования зародышей V1 и скорость их роста V2 Зависят от относительного пересыщения следующим образом:

V1=k1 -(Q-S)N/SN

V2= k2-(Q-S)/S

K1 И k2-константы (обычно k2>k1), n близко к 4. Очевидно, что при низком относительном пересыщении доминирует рост частиц, а при высоком-образование новых центров кристаллизации.

Образование зародышей может быть спонтанным (гомогенная нуклеация) и индуцированным (гетерогенная нуклеация). При гомогенной нуклеации зародыш появляется в результате скопления около одного центра группы ионов или ионных пар (под действием химических сил). При гетерогенной нуклеации ионы собираются вокруг посторонней твердой частицы (затравки, например пылинки); при этом ионы (или ионные пары) диффундируют к поверхности затравки и адсорбируются на ней. На практике имеет место гетерогенная нуклеация, поскольку в растворе всегда достаточно посторонних твердых частиц. К сожалению, основные теоретические положения относятся к спонтанной нуклеации.

Рассмотрим образование зародышей с термодинамической и кинетической точек зрения. Зародыш очень маленькая частица, поэтому большинство образующих его ионов находятся на внешней части-гранях, ребрах, углах. Такие ионы обладают повышенной свободной энергией, так как сила, действующая со стороны свободных ионов, больше, чем со стороны растворителя. Зародыш с максимальным поверхностным натяжением называется критическим. Он играет роль активированного комплекса в химической реакции. Все зародыши, не достигшие критического размера, распадаются, а достигшие его-растут. Процесс образования зародышей проходит индукционный период, продолжительность которого зависит от концентрации и природы ионов.

T=kcN,

N=2,5-9

Нет однозначного указания на размеры критического зародыша. Если руководствоваться термодинамическим подходом (исходя из значений поверхностного натяжения), он должен содержать около ста ионов. Если же исходить из прямой зависимости индукционного периода от скорости образования зародышей, то критический зародыш должен быть очень небольшим (от 2 до 9 ионов), например (CaF2)3, (BaSO4)4.

Рост частиц включает 2 стадии: диффузию вещества к их поверхности и кристаллизацию. Какая из этих стадий будет лимитирующей, зависит от скорости осаждения и концентрации реагирующих ионов. При медленном осаждении лимитирующей стадией является кристаллизация, частица при этом окружена однородным слоем оосаждающихся ионов и в результате получаются кристаллы более или менее правильной формы. При высоких концентрациях ионов лимитирующей стадией может стать диффузия. Тогда подвод вещества к углам и ребрам будет больше, чем к граням. В результате получаются нити, усы, дендриты, кристаллы неправильной формы с большой поверхностью.

Большую роль при формировании осадка играет относительное пресыщение раствора. Чем выше относительное пресыщение раствора, тем больше зародышей образуется в данный отрезок, тогда осадок состоит из большого числа мелких частиц. Наоборот, при низком относительном пресыщении зародышей образуется мало, они при дальнейшем добавлении в раствор осадителя увеличиваются в размерах-выпадает осадок, состоящий из крупных кристаллов. С величиной относительного пресыщения связано 2 фактора, определяющих свойства осадков:

    1) скорость ориентации, с которой ионы ориентируются, распологаясь в кристаллической решетке 2) скорость агрегации, с которой ионы присоединяются на поверхности уже образовавшихся зародышей осадка.

Если пресыщение невелико, то скорость ориентации превышает скорость агрегации и образуется кристаллический осадок. При высоком относительном пресыщении скорость агрегации выше, чем скорость ориентации и образуется большое число неправильных по форме частиц-выделяется аморфный осадок.

Для получения крупных кристаллических осадков (они имеют малую поверхность, что способствует меньшему загрязнению осадка посторонними веществами за счет адсорбции, они легко фильтруются и промываются) следует проводить осаждение при минимальном пресыщении. Для этого необходимо понижать Q и повышать S.

Способы понижения Q:

    1) Разбавление раствора осаждаемого вещества осадителя, медленное прибавление раствора осадителя, непрерывное перемешивание осаждаемого раствора. 2) Применение метода возникающих реагентов. При этом осадитель не вводится в раствор, а возникает в результате медленно протекающей химической реакции. Например для получения крупнокристаллического BaSO4 в разбавленный раствор соли Ba2+ вводят диметил сульфат, который медленно реагирует с водой, образуя осадитель H2SO4:
      (CH3)2SO4+2H2O=H2SO4+2 CH3OH

Ba2++ SO42-= BaSO4

3) Применение реакции комплексообразования. Иногда можно осаждаемый ион связывать в комплексы. Например можно получить в легко фильтруемой форме студенистый осадок CoS, если Co2+ Предварительно связывать в комплекс с пиридилом Pu. При диссоциации комплекса образуются в растворе ионы Co в низкой концентрации:

[Co(Pu)2]2+= Co2++ 2Pu

При медленном прибавлении S2- ионов, это равновесие смещается, что способствует выделению CoS в условиях сравнительно низкого относительного пресыщения раствора.

Способы повышения S:

    1) Нагревание раствора перед осаждением 2) Повышение кислотности 3) Введение в осаждаемый раствор реагентов, повышающих растворимость

Таким образом, в гравиметрическом анализе с целью получения кристаллических осадков, осаждение проводят из горячих разбавленных растворов (для повышения S и понижения Q) медленным добавлением раствора осадителя при непрерывном перемешивании осаждаемого раствора. В условиях аналитического осаждения формирование осадков происходит быстро и поэтому кристаллы образуются разных размеров и не совершенной формы. Поэтому после окончания процесса осаждения кристаллы оставляют в горячем растворе на некоторое время. Эта процедура называется старением осадка. Под старением понимают все необратимые структурные изменения, которые происходят в осадке при настаивании его под маточным раствором. При этом уменьшается общая поверхность осадка за счет укрепления кристаллов и совершенствуется форма кристаллов.

Аморфные осадки очень склонны к загрязнению, поэтому их перед фильтрованием не оставляют для настаивания под маточным раствором, а отфильтровывают сейчас же после осаждения.

Аморфные осадки состоят из частиц с беспорядочной структурой, образующих рыхлую, пористую массу с большой поверхностью. При фильтровании они забивают поры фильтра. С целью увеличения плотности аморфных осадков их следует осаждать из концентрированных и теплых растворов, осаждение проводить с участием электролитов и затем сразу фильтровать.

В гравиметрическом анализе более выгодны кристаллические осадки, они меньше загрязняются, легко фильтруются и промываются.

Загрязнение осадка.

Осадки могут загрязняться за счет: совместного осаждения, последующего осаждения, соосаждения.

При совместном осаждении одновременно превышается ПР осаждаемого и постороннего соединений. Например при pH=2-3 совместно осаждаются гидраты оксидов Fe(3) и Al.

Последующее осаждение наблюдается, если осаждаемое и постороннее соединение имеют общий ион, но скорость образования осадка примеси меньше. Тогда раствор после выпадения основного осадка остается пересыщенным относительно примеси. Твердые частицы осадка могут служить затравкой для примеси, и через какое-то время происходит последующее осаждение постороннего соединения. Классическим примером является последующее осаждение MgC2O4 на осадке CaC2O4-H2O. MgC2O4 проявляет склонность к образованию пересыщенного раствора, вероятно, вследствие довольно высокой растворимости, а также комплексообразованию с избытком C2O42-.Выпавшие частицы CaC2O4-nH2O служат звародышами для MgC2O4:на их поверхности адсорбируются C2O42-, концентрация которых оказывается достаточной для превышения ПР MgC2O4.В результате набюдается замедленное осаждение MgC2O4. При гравиметрических определениях совместное и последующее осаждение сводят к минимуму путем предварительного разделения и правильного выбора условий осаждения. Основной причиной загрязнения является соосаждение.

Соосаждение-загрязнение осадка веществами, которые в условиях осаждения определяемого компонента должны оставаться в растворе, но в силу различных причин осаждаются вместе с ним; другими словами, при соосаждении происходит захват примесей из ненасыщенного раствора. Примеси могут оказаться на поверхности осадка(адсорбция) и внутри его(абсорбция).

По механизму захвата посторонних веществ различают несколько видов соосаждения: адсорбция, инклюзия, окклюзия.

Причиной адсорбции является некомпенсированность заряда ионов на поверхности кристаллов. Количественно адсорбция зависит от:

    1) общей площади поверхности осадка 2) концентрации загрязняющих веществ 3) температуры (с увеличением температуры адсорбция уменьшается, поскольку этот процесс изотермический)

Существуют ряд правил, определяющих, какие из ионов будут адсорбироваться предпочтительнее:

    1) правило Панета-Фаянса-Хана: из двух одинаковых заряженных ионов равной концентрации преимущественно адсорбируется тот, который сильнее притягивается ионами кристалла 2) при прочих равных условиях преимущественно адсорбируется ион, концентрация которого больше. 3) многозарядные ионы адсорбируются сильнее, чем однозарядные 4) преимущественно адсорбируются ионы примерно такого же размера, что и ионы решетки

Инклюзия представляет собой равномерное распределение индивидуальных ионов или молекул по всему кристаллу.

Окклюзия, наоборот, представляет собой неравномерное распределение многочисленных ионов или молекул примеси, попавших в кристалл вследствие несовершенства кристаллической решетки. Окклюзия возникает в тех случаях, когда целые капельки раствора, содержащего загрязняющие примеси, захватываются и окружаются быстро растущим кристаллом. Поскольку примеси оказываются внутри кристалла, их трудно удалить промыванием. Степень окклюзии можно значительно понизить более медленным осаждением с тем, чтобы частички примеси успели удалиться с поверхности твердой фазы, прежде чем они окажутся внутри кристалла. Еще более эффективным способом уменьшения окклюдированных примесей является старение осадка.

Преимущества гравиметрии:

    1) Абсолютный (без эталонный) метод. Нет необходимости использовать стандартные растворы. 2) Метод не требует особой аппаратуры, кроме аналитических весов, т. е. метод не дорогостоящий. 3) При простом составе пробы метод может отличаться высокой точностью и хорошей воспроизводимостью.

Недостатки гравиметрии:

    1) не экспрессивный метод 2) не отличается высокой воспроизводительностью 3) точность определения зависит от точности весов

Заключение.

Радиоактивационный анализ. Из всего сказанного о радиоактивационном анализе следует, что метод основан на образовании радиоактивных изотопов определяемого элемента при облучении пробы ядерными или - частицами и регистрации полученной при активации искуственной радиоактивности. Следовательно, аналитическим сигналом в радиоактивационном анализе является радиоактивность А. При этом радиоактивность можно измерить 3 видами счетчиков радиоактивных излучений:

    1) ионизационные счетчики 2) сцинтилляционные счетчики 3) черенковские счетчики

Для получения информации о составе образца некоторое время измеряют его радиоактивность и анализируют полученную кривую:

Зная радиоактивность А, определяют массу элемента по формулам 4 и 5.

В зависимости от характера облучающих частиц различают 4 типа радиоактивационного анализа:

    1) нейтронно-активационный анализ на тепловых нейтронах(НАА) 2) активационный анализ на быстрых нейтронах(БНАА) 3) активационный анализ на заряженных частицах(ЗЧАА) 4) фотонный активационный анализ(ФАА)

Радиоактивационный анализ осуществляется в 2-х вариантах:

    1) радиохимический вариант 2) инструментальный вариант

Биологические методы анализа. Из всего сказанного о биологических методах следует, что это методы качественного обнаружения и количественного определения неорганических и органических соединений, основанные на применении живых организмов в качестве аналитических индикаторов. Следовательно, аналитическим сигналом в биологических методах является ответная реакция организма при изменении строго определенного химического состава среды, необходимого для роста, размножения, функционирования живых существ. С помощью биологических методов можно определить различные соединения. В качестве примера рассмотрим следующую таблицу:

Гравиметрический анализ. Из всего сказанного о гравиметрическом анализе следует, что гравиметрический анализ заключается в выделении вещества в чистом виде и его взвешивании. Следовательно, аналитическим сигналом в гравиметрии является масса. Измерение массы осадка производят с помощью аналитических весов. Различают 2 формы осадка в гравиметрии:

    1) осаждаемая форма 2) гравиметрическая форма

Осадки могут загрязняться за счет осаждения, последующего осаждения, соосаждения.

Похожие статьи




Использование беспозвоночных в качестве индикаторных организмов. - Предмет аналитической химии

Предыдущая | Следующая