Ацетиленовый метод - Методы экологических исследований

Инкубация с ацетиленом предполагает в качестве обязательного условия быстрое и равномерное перемешивание газов в исследуемой системе. Последней может быть образец почвы нарушенного или естественного (монолит) сложения, участок почвы известной площади, вегетационный сосуд с растениями и пр. Благодаря хорошей растворимости ацетилена в воде это условие хорошо выполняется для водных и песчаных культур растений, для почв легкого механического состава. Более сложно протекает газообмен в почвах тяжелого механического состава и в переувлажненных почвах, что приводит к недооценке реальной интенсивности азотфиксации. Одним из способов усиления газообмена является принудительная подача ацетилена в толщу почвы.

Длительная инкубация с ацетиленом оказывает и ряд других воздействий на азотфиксирующую систему. Это проявляется в форме вторичной реакции растений и микроорганизмов на изменение температуры и повышение концентрации С02 в замкнутом объеме инкубационной камеры (парниковый эффект). Наиболее значимо это при изучении азотфиксации в системе почва - растение, в которой при длительной инкубации создаются условия, способствующие усилению микробной активности. Стимуляция их происходит как из-за патологической реакции растений и микроорганизмов на присутствие ацетилена и этилена, так и в результате активизации фотосинтеза.

Следовательно, первым общим правилом при использовании ацетиленового метода является сведение к минимуму времени инкубации азотфиксирующих систем в атмосфере ацетилена: в зависимости от конкретных задач исследования время инкубации может составлять от 15-30 мин до 1 - 1,5 ч и не должно превышать 2 ч. Второе условие - контроль за неспецифическим образованием этилена. Этилен образуется многими почвенными грибами и бактериями, выделяется корнями растений, постоянно присутствует в техническом ацетилене. Он нередко обнаруживается в воздухе лабораторных помещений, где источниками его являются пламя газовых горелок и спиртовок, а также разрушающиеся на свету или при нагревании резина и полиэтилен.

В почве интенсивность неспецифического этиленогенеза зависит от ее свойств: почвы, богатые органическим веществом, выделяют этилен в наибольших количествах. Повышенному образованию этилена способствует избыточное увлажнение. Напротив, азотные удобрения, соединения железа и марганца тормозят этиленообразование в почве.

Помимо выделения этилена в почве постоянно протекает и его поглощение - путем адсорбции и главным образом за счет окисления микроорганизмами, многие из которых способны использовать этилен в качестве единственного источника энергии или в процессе соокисления. Однако при наличии ацетилена в газовой фазе почв деятельность таких микроорганизмов резко тормозится и окисление этилена полностью прекращается уже при содержании С2Н2 в 0,0001 атм. Следовательно, окислением С2Н4 в почве при использовании ацетиленового метода можно пренебречь, поскольку Км для С2Н2-редукции у азотфиксирующих бактерий колеблется в пределах от 0,1 до 0,75 атм., что заведомо превышает ингибирующую концентрацию.

Газохроматографический анализ может проводиться на хроматографах любой конструкции, снабженных пламенно-ионизационным детектором. В качестве газа-носителя применяют азот марки "особо чистый" (ТУ 6-21-27) или аргон той же марки (ГОСТ 10157). Для питания пламенно-ионизационного детектора необходимы Н2 и воздух, тщательно очищенные от пыли. Водород можно получать из генераторов водорода, например, типа СГС-2.

Хроматографическая колонка прибора должна обеспечивать четкое разделение и "линейность" пиков следующих газов: СН4, С3Н8, С2Н2 и С2Н4. Метан нередко присутствует в почвенном воздухе, а пропан используется в качестве внутреннего стандарта.

При анализе методом газоадсорбционной хроматографии для наполнения колонок используют силикагель, сферосил, молекулярные сита. При газожидкостной хроматографии твердыми носителями могут быть силикагель, кизельгур, бентонит, а в качестве стационарной фазы - высококипящие эфиры.

Похожие статьи




Ацетиленовый метод - Методы экологических исследований

Предыдущая | Следующая