Виды культур клеток и их использование в вирусологии. Краткая характеристика каждого вида - Ветеринарная вирусология
Культура клеток (КК) - это клетки многоклеточного организма, живущие и размножающиеся в искусственных условиях вне организма. Методика культивирования особенно успешно стала развиваться после 40-х годов. Этому способствовали следующие события: открытие антибиотиков, предотвращающих бактериальное заражение КК, открытие Хангом и Эндерсом способности вирусов вызывать специфическую деструкцию клеток. Дульбекко и Фогт (1952) предложили методику трипсинизации тканей и получения однослойных КК. Применяют следующие КК: 1) ПТКК - клетки, полученные непосредственно из органов или тканей организма, растущие invitroв один слой. КК можно получить практически из любого органа или ткани человека или животного. Лучше это удается сделать из эмбриональных органов, т. к. клетки эмбрионов обладают более высокой потенцией роста. Чаще всего для получения их используют почки, легкие, кожу, тимус, тестикулы. Для получения первичных клеток от здорового животного не позднее 2-3 часов после убоя берут соответствующие органы или ткани, измельчают, обрабатывают трипсином, панкреатином, коллагеназой. Ферменты разрушают межклеточные вещества, полученные при этом отдельные клетки суспендируют в питательной среде и культивируют на внутренней поверхности пробирок или матрасов в термостате при 37С. Клетки прикрепляются к стеклу и начинают делится. На стекле формируется слой толщиной в одну клетку, обычно через 3-5 дней. Питательную среду меняют по мере загрязнения ее продуктами жизнедеятельности клеток. Монослой сохранят жизнеспособность в течение 7-21 дня. При культивировании вирусов в КК удается получать препараты с высоким титром вируса, что важно при получении АГ и вакцин. 2) Субкультуры - их часто используют и получают из первичных клеток, выращенных в матрасах, путем снятия их со стекла раствором версена или трипсина, ресуспендирования в новой питательной среде и пересева на новые матрасы или пробирки. Через 2-3 суток формируется монослой. Они по чувствительности не уступают ПТКК, более экономичны. 3) Перевиваемые КК - клетки, способные к размножению вне организма неопределенно длительное время. В лаборатория их поддерживают путем пересевов из одного сосуда в другой (при условии замены питательной среды). Получают их из первичных КК с повышенной активностью роста путем длительных пересевов в определенном режиме культивирования. Клетки перевиваемых культур имеют одинаковую форму, гетероплоидный набор хромосом, стабильны в условиях ростаinvitro, некоторые из них обладают онкогенной активностью. "+" перед первичными - проще готовить, заранее можно проверить на наличие латентных вирусов и микрофлоры; клональные линии обеспечивают более стандартные условия для размножения вирусов, чем первичные. Большинство перевиваемых клеток обладает более широким спектром чувствительности к вирусам, чем соответствующие первичные культуры. Но они склонны к злокачественному перерождению. 4)Диплоидные КК - морфологически однородная популяция клеток, стабилизированная в процессе культивированияinvitro, имеющая ограниченный срок жизни, характеризующаяся 3 фазами роста, сохраняющая в процессе пассирования кариотип свойственный исходной ткани, свободная от контаминантов и не обладающая туморогенной активностью при трансплантации хомячкам. Их тоже получают из первичных клеток. В отличие от них имеют ограниченные возможности пассирования. Максимальное число пассажей 50 -+ 10, затем количество делящихся клеток резко уменьшается и они гибнут. Преимущества перед перевиваемыми КК - 10-12 дней могут быть в жизнеспособном состоянии без смены питательной среды; при смене среды один раз в неделю остаются жизнеспособны в течение 4 недель; особенно пригодны для длительного культивирования вирусов, у них сохранена чувствительность исходной ткани к вирусам. 5)Суспензионные КК - перевиваемые культуры клеток в суспензии.
Похожие статьи
-
ПТКК - клетки, полученные непосредственно из органов или тканей организма, растущие invitroв один слой. КК можно получить практически из любого органа...
-
Для заражения отбирают пробирки (матрасы) со сплошным клеточным монослоем, просматривая их под малым увеличением микроскопа. Ростовую питательную среду...
-
См вопрос №8 Патогенез вирусных инфекций Тропизм - склонность вируса к тому или иному вороту инфекции. При респираторных инфекциях - вирус локализуется в...
-
1. Противовирусный иммунитет связан с своеобразными защитными механизмами, т. к. вирусы не способны развиваться и размножаться в неживой клетке. Защитное...
-
Лабораторные животные, цели и методы их использования в вирусологии - Ветеринарная вирусология
В связи с тем, что вирусы могут размножаться только в живых клетках, на самых ранних этапах развития вирусологии широко применяли культивирование вирусов...
-
Интерферон и его роль в противовирусном иммунитете - Ветеринарная вирусология
В клетках человека имеется 27 генетических локусов для интерферонов (далее И) - 14 функционирующие. И закодированы в генетическом аппарате клетки....
-
Смотри вопрос №7 Общие принципы серологических реакций и их использование в диагностике вирусных болезней В целях определения вида данного вируса при...
-
Иммунитет - состояние невосприимчивости организма к воздействию патогенных микробов, их токсинов и других чужеродных веществ биологической природы....
-
Биологическая характеристика вируса ящура. Принцип диагностики - Ветеринарная вирусология
Ящур - остро протекающая высококонтагиозная болезнь парнокопытных, проявляющаяся лихорадкой, везикулярным поражением слизистых оболочек рта, кожи венчика...
-
РСК. Иммунологическая основа и характеристика компонентов реакции - Ветеринарная вирусология
Реакция связывания комплемента (РСК) -- одна из традиционных серологических реакций, применяемых для диагностики многих вирусных болезней. Само название...
-
Типы взаимодействия, основные исходы взаимодействия вируса с клеткой - Ветеринарная вирусология
1)Продуктивное взаимодействие - когда вирусы размножаясь в клетке образуют новое поколение 2)Абортивное - когда циклы репродукции прерывается на какой...
-
Наиболее широко используют при работе с КК растворы Хенкса и Эрла, которые готовят на бидистиллированной воде с добавлением различных солей и глюкозы....
-
Представляют собой чрезвычайно разнородный класс биологических макромолекул. Обязательными компонентами белков являются АК. Альфа-АК - это сравнительно...
-
РТГА и ее использование в вирусологии. Достоинства и недостатки - Ветеринарная вирусология
Одной из простейших серологических реакции является реакция торможения гемаглютинации. Она основана на том, что АТ при встрече с гомологичным АГ...
-
Разные группы вирусов обладают неодинаковой устойчивостью во внешней среде. Наименее устойчивы вирусы, имеющие липопротеидные оболочки, наиболее...
-
Бактериофаги, их значение и основные свойства - Ветеринарная вирусология
Бактериофаги (от. Лат. Bacteriophaga) - разрушающий бактерии. Это вирусы, обладающие способностью проникать в бактериальные клетки репродуцироваться в...
-
Яровой биологический ячмень урожайность ЗАО "Иковское" расположено в центральной части Викуловского района в 116 км от железнодорожной станции Ишим и в...
-
Материал для исследований от заболевших, павших или вынужденно убитых животных следует брать как можно быстрее после появления четких признаков болезни...
-
1) насекомые 2) паукообразные - клещи 3) моллюски - брюхоногие 4) черви - нематоды 5) млекопитающие - грызуны и зайцеобразные. Насекомые Тело насекомых...
-
Инактивированные вакцины - сложные по составу препараты. Производство их требует большого количества вируса. Основное требование, предъявляемое к убитым...
-
Инициация культуры in vitro - Анализ проблемы укоренения сортов земляники садовой ex vitro
Для подготовки введения в культуру собранные розетки промывают проточной водой, затем с помощью скальпеля отрезают листья и корни. Выделенный...
-
В основе метода лежит явление люминесценции, сущность которого в том, что поглощая различные виды энергии (световую, электрическую) атомы некоторых...
-
Транскрипция - переписывание ДНК на РНК - осуществляется с помощью фермента РНК-полимеразы, продуктами является биосинтез и-РНК. ДНК-содержащие вирусы,...
-
Живые противовирусные вакцины представляют собой лиофилизированные взвеси вакцинных штаммов вирусов, выращенных в различных биологических системах (КЭ,...
-
Периоды и этапы репродукции вирусов. Типы взаимодействия - Ветеринарная вирусология
Взаимодействие вирусов с клетками хозяев и репродукция вирусов. Вирусы проходят в клетке сложный цикл развития. Морфогенез вирусов представляет собой...
-
Принцип получения бактериофагов. Определение активности - Ветеринарная вирусология
Бактериофаги (от. Лат. Bacteriophaga) - разрушающий бактерии. Это вирусы, обладающие способностью проникать в бактериальные клетки репродуцироваться в...
-
Краткая характеристика заболевания - Диагностика и профилактика лептоспироза
Лептоспироз (лат., англ. -- Leptospirosis; болезнь Вейля, тиф собак) -- в основном остро протекающая природно-очаговая болезнь животных многих видов и...
-
Введение, Характеристика основных культур растениеводства. - Растениеводство в Российской Федерации
Растениеводство - отрасль сельского хозяйства, занимающаяся возделыванием культурных растений. Отрасли растениеводства производят более 40% всей...
-
Для формирования экологически устойчивых насаждений следует создавать смешанные типы лесокультур с участием главных пород до 70%, сопутствующих до 20,...
-
Есть описание около 600 видов малины, произрастающих в условиях умеренного климата. Малина - одна из древнейших ягодных культур, используемых человеком....
-
Методи захисту сільськогосподарських культур від шкідників До основних методів захисту сільськогосподарських культур належать:...
-
Технология возделывания зерновых культур должна соответствовать почвенно-климатическим условиям региона, а техника должна отвечать требованиям...
-
Биологические особенности картофеля Картофель (Solanum tuberosum) - это однолетнее травянистое растение. вырастающее до 100 сантиметров в высоту и...
-
Характеристика вируса-возбудителя - Диагностика и лечение болезни Ауески у поросят
Вирус относится к семейству Herpesviridae, содержит двуспиральный линейный ДНК-нуклеоид. Нуклеоид окружен икосаэдрическим капсидом диаметром 100--110 нм,...
-
Первое упоминание о жимолости относится к XVII в., когда Камчатка была открыта В. Атласовым. Русские первопроходцы обратили внимание на дикорастущий...
-
Общество с ограниченной ответственностью "Нива" является сельскохозяйственным предприятием, занимающимся растениеводством и животноводством. Осуществляет...
-
Понятие о конституции животных - Основы зоотехнии
Продуктивность животное кормление Сущность учения о конституции заключается в познании связи строения тела и отдельных органов с функциями организма. Под...
-
Кемеровский научно-исследовательский институт сельского хозяйства расположен в Кемеровском районе, Кемеровской области на расстоянии 21км от областного...
-
Использование данных экономической оценки пашни по условиям выращивания культур - Оценка земель
Данные экономической оценки земель применяются при рациональном размещении культур и отраслей в отдельных зонах, областях, районах и хозяйствах. Для...
-
1. В практике эпизоотологии увеличение размеров и плотности поголовья животных возрастает риск появления эпизоотий. Главным принципом в борьбе с ними...
Виды культур клеток и их использование в вирусологии. Краткая характеристика каждого вида - Ветеринарная вирусология