Принцип постановки ПЦР - Герперовирусная инфекция у животных
ПЦР является наиболее чувствительным методом. Реакция обнаруживает вирусные НК. Реакция открыта в 1985 году в США.
Сутью метода является амплификация, т. е. увеличение числа копий строго определенных фрагментов молекул ДНК invitro. ПЦР основана на амплификации ДНК при помощи ДНК-полимеразы, которая осуществляет синтез взаимокомплементарных цепей ДНК начиная с 2-х праймеров (затравок)
Primer - фрагмент ДНК из 20-30 нуклеотидов. Синтезированный искусственно. Праймеры комплементарны противоположным цепям ДНК. Обычно при ПЦР ставят от 25 до 40 циклов в зависимости от возбудителя. Каждый цикл состоит из трех этапов.
Денатурация. 92-95 градусов С, 20-60 секунд. Происходит разрыв водородных связей цепей ДНК.
Отжиг - присоединение праймеров. 50-60 градусов С, 40-60 секунд. Происходит забрасывание праймеров, нуклеотидов и ДНК-полимеразы.
Элонгация - достраивание цепей ДНК. 68-72 градуса С, 40-60 секунд. Число цепочек ДНК удваивается. Образовавшиеся в первом цикле цепочки ДНК служат матрицами для последующих циклов и т. д. Таким образом в каждом цикле идет удвоение числа копий амплифицируемого участка, что позволяет за 25-40 циклов наработать 225-240участков ДНК, что позволяет обнаружить их методом электрофореза.
В ПЦР используют праймеры из консервативных участков ДНК вируса, которые имеют уникальную последовательность для каждого возбудителя.
Похожие статьи
-
Методы культивирования вирусов. - Герперовирусная инфекция у животных
Для культивирования вирусов используют культуры клеток, куриные эмбрионы и чувствительных лабораторных животных. Эти же методы используют и для...
-
ЛЕЧЕНИЕ И МЕРЫ ПРОФИЛАКТИКИ ГЕРПЕСА СОБАК, О вакцинации - Герперовирусная инфекция у животных
После того как собака заразилась вирусом герпеса, она никогда не сможет полностью от него избавиться. Большинство инфицированных собак при первоначальном...
-
Диагностирование по симптомам Проявляющиеся симптомы герпеса могут значительно варьировать у разных больных. Если у пациента проявляются признаки...
-
ОПИСАНИЕ ГЕРПЕРОВИРУСА, Возбудитель герпетической инфекции - Герперовирусная инфекция у животных
Возбудитель герпетической инфекции Герпетическая инфекция - группа заболеваний, поражающая все органы и системы, вызываемая вирусом герпеса. Вирус...
-
КЛИНИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ ГЕРПЕСА СОБАК - Герперовирусная инфекция у животных
Герпесвирусная инфекция у собак беспощадно убивает инфицированных новорожденных щенков. Как правило, щенкам до 2 недель диагноз не ставится, точнее,...
-
ЭТИОЛОГИЯ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ - Герперовирусная инфекция у животных
Геном вируса простого герпеса представлен линейной двухцепочечной ДНК (молекулярная масса 100 млн), кодирующей более 70 вирусных белков. Строение...
-
Для предотвращения отравления сельскохозяйственных и диких животных, в том числе рыб, птиц, пчел, токсическими веществами, применяемыми для обработки...
-
Противовирусная санитарная обработка - Герперовирусная инфекция у животных
Герпес не такой жесткий вирус, как парвовирус. Вирус собачьего герпеса быстро убивается самыми распространенными дезинфицирующими средствами домашнего...
-
Смотри вопрос №7 Общие принципы серологических реакций и их использование в диагностике вирусных болезней В целях определения вида данного вируса при...
-
Возбудители и источники бактериальных инфекций, Туберкулез - Лечение туберкулеза у животных
Туберкулез Туберкулез - инфекционная, преимущественно хроническая болезнь многих видов сельскохозяйственных животных и птицы, характеризующаяся...
-
Адаптация, или приспособление организма к условиям существования, невозможна без соответствующих изменения в органах и системах, обеспечивающих обмен...
-
Методы сравнительной оценки быка-производителя по потомству зависят от места проведения, условий, в которых проводят оценку, а также от общей...
-
Таблица 1 Размеры положительных АЧС выборок (количества страт и животных по видам), использованные в расчетах для определения диагностической...
-
Постановка Реакции агглютинации - Сап
Реакцию проводят на чистых сухих металлических эмалированных пластинках с лунками при температуре (18-30)гр. С. На бортиках пластинки против каждой лунки...
-
Искусственное осеменение, его становление и развитие Первыми опытами по искусственному осеменению можно считать работы итальянца Лазаро Спалланцани...
-
Патологоанатомические признаки - Бешенство у животных
Предварительный диагноз ставят с учетом эпизоотологических и клинических показателей. Принимают во внимание характер эпизоотической ситуации в данной...
-
Разбор анамнестических данных Животное содержалось в сарае на деревянном полу, качестве подстилки использовалось солома, уборка навоза ручная, 2 раза в...
-
Профилактика и меры борьбы - Лечение туберкулеза у животных
В целях недопущения заболевания животных туберкулезом не следует допускать перемещения их из других хозяйств, а также внутри колхоза или совхоза без...
-
Возбудитель туберкулеза - Лечение туберкулеза у животных
Возбудитель туберкулеза. Микобактерия (Mycobacterium tuberculosis). Размер 0.8 - 5 мкм. Представляет собой тонкие слегка изогнутые палочки, имеют...
-
Гиподерматоз необходимо дифференцировать от фурункулеза, при котором в центре созревшего фурункула возвышается небольшой флюктуирующий гнойничок,...
-
Число потомков от одной особи, как правило, у высших животных бывает небольшим, а специфический комплекс генов, определяющий высокую продуктивность,...
-
В качестве реципиента отбирают гинекологически здоровых коров после двух-трех нормальных половых циклов. Для отбора реципиентов основным показателем...
-
Приготовление кормов. На современных животноводческих предприятиях для подготовки кормов строят специальные цехи. На комплексах их обязательно размещают...
-
Подвижность спермиев (активность) -- это способность их к прямолинейно-поступательному движению (ППД). Оценку на подвижность проводят в раздавленной...
-
1) насекомые 2) паукообразные - клещи 3) моллюски - брюхоногие 4) черви - нематоды 5) млекопитающие - грызуны и зайцеобразные. Насекомые Тело насекомых...
-
Морфологические признаки почв - Принципы растениеводства
Почва удобрение зерно Морфологические признаки - это внешние признаки почв. Для их исследования не нужно специальной лабораторной базы. Они изучаются...
-
Топливные насосы и форсунки дизельных двигателей хранят в закрытых помещениях, допускается оставлять и на двигателе. В любом случае необходимо удалить...
-
Очистка и мойка. Машины тщательно очищают грязи, пыли, удобрений, ядохимикатов. Моют машины в специально отведенных для этого местах, используя различные...
-
Хроническая болезнь растущих животных, характеризуется расстройством фосфорно-кальциевого обмена и сопровождается нарушением минерализации костей....
-
Ооцит беременность бесплодие животное Вымя коровы является одним из наиболее уязвимых органов. Одно из заболеваний вымени - мастит, возникает при...
-
Калицивирусная инфекция - Калицивироз кошек. Клинический случай
Калицивирусная инфекция (калицивироз) кошек - (англ. -- Feline calicivirus disease; калицивироз, ринотрахеит-калицивироз) -- остро протекающая...
-
При этом методе упрощается вся работа по подготовке и получению спермы, а самое главное, удается получать идеально чистую, стерильную сперму, обладающую...
-
Химико-токсикологический анализ в ветеринарной токсикологии имеет решающее значение. При установлении диагноза на отравление, изучении миграции...
-
Клинико-эпизоотологическая или до-лабораторная диагностика - проводится в хозяйствах и позволяет поставить лишь предварительный диагноз, проводится...
-
Для заражения отбирают пробирки (матрасы) со сплошным клеточным монослоем, просматривая их под малым увеличением микроскопа. Ростовую питательную среду...
-
Иммунитет и защита - Бешенство у животных
Одним из основных и эффективных способов предотвращения бешенства является своевременная и эффективная иммунопрофилактика, основанная на использовании...
-
Труп павшего или убитого животного, оставленный на поверхности почвы, загрязняет землю, воду и воздух. Он может оказаться фактором распространения...
-
Светолечение - Внутренние болезни животных
Светолечение или фототерапия (от греч. phцtos - свет) - использование для лечения больных естественного света или света от искусственных источников...
-
Содержание животных - Направления деятельности и функции землепользования ЗАО "Скороднянское"
В ЗАО "Скороднянское" применяется в зимний период стойловая система содержание крупного рогатого скота на молочных фермах, а в летний -...
-
Качество спермы - Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных
Успех осеменения зависит также от качества спермиев. Чем активнее их движение, тем меньшую дозу спермы можно применять. До недавнего времени при всех...
Принцип постановки ПЦР - Герперовирусная инфекция у животных