Методика окрашивания корней, Методика оценки колонизации арбускулярной микоризы растения, Статистическая обработка результатов - Влияние эндофитных бактерии Bacillus subtilis на микоризацию растений при имитации почвенной засухи
Окрашивание корней производилось по следующему методу [Trouvelot, Kough, Gianinazzi-Pearson, 1986, с. 217-221]:
- 1. Отбирали корни 10-20 шт. с одного образца. 2. Промывали под проточной водой (при помощи сита), помещали в марлевые мешочки. 3. Раствор 10% КОН доводили до кипения, выключали плитку, помещали марлевые мешочки с образцами в этот раствор на 10 мин. Покоричневение раствора свидетельствовало о процессе очистки. 4. Промывали водой 4-5 раз. 5. Большинство гистологических красителей являются кислыми, поэтому подкисляли корни 2% НСl в течение 15-20 мин. 6. Готовили краситель трепановый синий и добавляли в приготовленный раствор (вода, глицерин, молочная кислота в соотношении 1:1:1 по объему). Нагревали его до кипения, выключали плитку, помещали образцы на 3-4 мин. 7. Промыли 4-5 раз водой. Краситель используется несколько раз. 8. Образцы хранили при температуре 4°С в воде.
Методика оценки колонизации арбускулярной микоризы растения
Окрашенные корни помещали в чашку Петри и рассматривали корни под микроскопом. Оценку колонизации микоризы и распространенности арбускул проводили согласно [Trouvelot, Kough, Gianinazzi-Pearson, 1986, с. 220]. 1. Из образца корней на 2 предметных стекла вырезали по 15 фрагментов корней в 1 см. длиной. 2. Эти фрагменты рассматривали под микроскопом, и оценивали колонизацию микоризы по рис. 1 3. Результаты записывались в "Шахматку" расчета (рис. 2): 4. Далее вычисляли при помощи компьютерной программы "Mycocalc" следующие параметры: F%, M%, m%, A%, a% , согласно Trouvelot. 1986 год. F% - Частота микоризы в корневой системе F% = (NB фрагментов мико / общая NB) ? 100 M% - Интенсивность колонизации микоризы в корневой системе M% = (95n5 70 N4 30 n3 5 n2 + n1) / (NB общее) где N5 = число фрагментов оценили 5; N4 = число фрагментов 4 т. д. m% - Интенсивность колонизации микоризы в корневом фрагменте m% = M ? (NB общее) / (NB мико) а% - Изобилие арбускул в микоризованной части корневого фрагмента а% = (100mA3 50 mA2 10 mA1) / 100 где mA3, mA2, которые mA1% м, номинальная A3, A2, A1, соответственно, с mA3 = ((95n5A3 70 n4A3 30 n3A3 5 n2A3 + n1A3) / NB мико) ? 100 / м и тот же для А2 и A1. А% - Изобилие арбускул в корневой системе А% = а ? (M/100) V% - Изобилие везикул в корневой системе V% = а ? (M/100) V% - Изобилие везикул в микоризованной части корневого фрагмента V% = (100mA3 50 mA2 10 mA1) / 100
Рис. 2.1. Оценка колонизации микоризы и распространенности арбускул согласно [Trouvelot, Kough, Gianinazzi-Pearson,1986, с. 217-221].
Рис.2.2 Шахматка расчета по методике [Там же. С. 220].
Статистическая обработка результатов
Эксперимент проводили три раза, в трех биологических повторностях. Статистическую обработку результатов проводили стандартными методами с использованием Microsoft Excel. Для определения зависимости биологических показателей между собой и от влияния почвенной засухи и бактерий использовали многофакторный дисперсионный анализ. В таблицах приведены средние значения и их стандартные отклонения.
Похожие статьи
-
Почвенную засуху имитировали следующим способом. После посева семян почву во всех сосудах поливали дистиллированной водой до влажности 70% от полной...
-
Роль микоризы в жизни растений Микориза - неотъемлемая часть большинства растений в природе. На инфицированных корнях грибы развивают внешний мицелий,...
-
В последние годы внимание многих исследователей направлено на изучение влияния глобальных климатических изменений на растения. Это связано с тем, что...
-
Объект и предмет исследования В качестве Объекта исследования была выбраны сельскохозяйственные культуры: горох (( Pisum sativum L.), сорта...
-
Засуха характеризуется комплексом неблагоприятных условий, приводящих к глубокому дефициту воды в почве и в растении [ Третьяков С. 243-244]. Угнетающее...
-
В системе мероприятий, направленных на повышение плодородия почв, получение высоких и устойчивых урожаев всех сельскохозяйственных культур и охрану почв,...
-
Отношение к условиям среды и факторам роста Арбуз (Cytrullus lanatus) - однолетнее растение стелющееся лиана. Верхушечный конус нарастания не...
-
Агротехника овощных культур в открытом грунте. - Оценка хозяйства ОАО СельпромМаш
Арбуз. Все сорта арбуза относятся к виду, к одной ботанической разновидности - арбуз обыкновенный, столовый (). В диком виде растете на Африканском...
-
Молоко представляет идеальную питательную среду для микробов. При благоприятных условиях микробы в молоке быстро размножаются, вызывая его порчу. Очень...
-
Для проведения указанной работы в полевых условиях целесообразен следующий математический подход. Априорно постулируем, что изменение линейной плотности...
-
Таблица 4. Расчеты надежности параллельной схемы выполнения системы "ПЦР-РПИФ" с учетом превалентности случаев АЧС в фермах разного размера (расчеты...
-
Таблица 2. Индивидуальные оценки диагностической чувствительности и специфичности РПИФ и ПЦР для подтверждения АЧС (WinEpiscope 2.0, Р=0,05) Вид Домашние...
-
Более чем на 1/5 поверхности Земли наблюдаются температуры выше 40 °С, а растения при сильном солнечном освещении могут нагреваться до 50 °С и более....
-
Основной особенностью семилетнего развития эпизоотического процесса АЧС в сильно структурированном свиноводстве Российской Федерации является наблюдаемая...
-
К культивации предъявляются такие требования: своевременное ее применение, она должна быть равномерной и на заданную глубину (допускается отклонение от...
-
Оценка земель - это система мероприятий, направленных на получение информации как о качестве (бонитете) почв и почвенного покрова, так и по их (его)...
-
Агроэкологическая оценка Агроэкологическая оценка - это изучение качества почвы. Без агроэкологической оценки сельскохозяйственный производитель может...
-
Общий рельеф района в основном полого-увалистый или холмисто увалистый. Общее направление склонов, расчленяющих водоразделы с запада на восток....
-
Картофель - растение умеренно прохладного климата с относительно высокой влажностью воздуха. В Северном полушарии Евразии его выращивают в основном между...
-
Биологические особенности картофеля Картофель (Solanum tuberosum) - это однолетнее травянистое растение. вырастающее до 100 сантиметров в высоту и...
-
Для нормального роста и развития растений необходимы различные элементы питания. По современным данным, таких элементов порядка 20, без которых растения...
-
Таблица 3. Результаты сравнения различий чувствительности РПИФ и ПЦР при проверке парных выборок от домашних свиней и диких кабанов, инфицированных АЧС...
-
Опрыскивание - метод химической защиты растений, заключающийся в нанесении на обрабатываемую поверхность (почвы или растений) пестицидов в виде...
-
В воде открытых водоемов патогенные лептоспиры сохраняются от 7 до 30 дней и более; будучи типичными гидрофилами, в почве, перенасыщенной водой, выживают...
-
Фосфорные удобрения - Луговое и полевое кормопроизводство
Растения наиболее чувствительны к недостатку фосфора в самом раннем этапе развития когда их слаборазвитая корневая система обладает низкой усвояющей...
-
Подготовка рук перед операцией., Наркоз собак и кошек - Герниорафия промежностной грыжи у собаки
В процессе операции руки хирурга непосредственно соприкасаются с раной. Известно, что кожа рук, как и всякая другая поверхность тела, содержит множество...
-
Зерно овса содержит 13...14% белка, 5...6% жира, 40...45% крахмала. Белок овса содержит ценные незаменимые аминокислоты - лизин, триптофан. Зерно богато...
-
Обезболивание - Кастрация свинки
Прежде чем оперировать животное, необходимо позаботиться о безопасности и безболезненности манипуляций. Для этого животному проводят общее или местное...
-
С целью получения эксплантов для каллусной и опухолевой культур, микроклонального размножения, изучения гормональной регуляции используют стерильные...
-
Подвижность спермиев (активность) -- это способность их к прямолинейно-поступательному движению (ППД). Оценку на подвижность проводят в раздавленной...
-
Постановка Реакции агглютинации - Сап
Реакцию проводят на чистых сухих металлических эмалированных пластинках с лунками при температуре (18-30)гр. С. На бортиках пластинки против каждой лунки...
-
Плесень зерновых культур Снежная плесень (Fusarium nivale (Fr.) Ges., Fusarium Link. spp., Typhula incarnata Lasch. Fr.). Возбудители поражают озимые...
-
Для определения нитрифицирующей способности почв ее компостируют в течение 12 дней, а затем определяют количество накопившихся в ней нитратов....
-
Материал исследования Исследование проводилось в 2014 году в период с 17.06.14 по 27.07.14 и с 02.09.14 по 12.10.14. В лаборатории биотехнологии...
-
Требуется семян на 1 Га - 0,012 т. Почвы: черноземы выщелочные, Всего - 1,2 т. типичные, обыкновенные Урожайность: основной продукции - 46 т/Га...
-
Подготовка почвы для смородины Особое значение имеет предпосадочная подготовка почвы. Она заключается в использовании лучших предшественников, заправке...
-
Перед проведением операции животное 10 часов выдерживаю на голодной диете. Способ фиксации Животное фиксирую в станке с применением носовых щипцов....
-
Заключение - Агроландшафтное земледелие
Значение севооборотов в повышении плодородия почвы и урожайности сельскохозяйственных культур доказано длительными отечественными и зарубежными полевыми...
-
Патологоанатомические изменения., Лечение. - Токсикозы, вызываемые фенолом
При вскрытии трупов обнаруживают застойную гиперемию внутренних органов, мелкоочаговые и реже диффузные кровоизлияния в легких, желтушность слизистых...
-
"ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ" - Методы диагностики болезней рыб
Цель занятия : научить правила взятия и пересылки больных рыб и патологического материала для лабораторных исследований. Задания для практической работы:...
Методика окрашивания корней, Методика оценки колонизации арбускулярной микоризы растения, Статистическая обработка результатов - Влияние эндофитных бактерии Bacillus subtilis на микоризацию растений при имитации почвенной засухи