Факторы, влияющие на рост меристем, Выбор растений-доноров, Питательные среды - Анализ проблемы укоренения сортов земляники садовой ex vitro

Выбор растений-доноров

Выбор растений-доноров и времени извлечения меристем являются важными факторами. Меристемы извлеченные после термотерапии растут быстрее и с большим процентом приживаемости, чем меристемы с растений не прошедших термотерапию. Не имеет значения, извлечена ли меристема из апикальной или латеральной почки, но предпочтительнее почка, взятая с уса, как более легко извлекаемые.

Экспланты берутся предпочтительно весной или летом, так как в течение осени и зимы результаты сильно искажаются бактериями и грибками (Мартинелли, 1992).

Питательные среды

В основе размножения растений in vitro лежат законы биологии: тотипатентность клеток, апикальное доминирование, регенерация. Все эти понятия предусматривают создание специальных условий с целью получения целостного растения, либо восстановления недостающей части. Наиболее важным условием является питательная среда, на которой могут проявиться вышеуказанные явления в желательном направлении.

Состав любой питательной среды можно подразделить на неорганический, органический и природный комплексы. Неорганический комплекс делится на макро - и микро - элементы.

К макроэлементам в культуре ткани относят: азот, фосфор, калий, кальций, магний, натрий, железо; к микроэлементам - марганец, бор, цинк, йод, молибден, медь, кобальт.

Органический комплекс представлен: витаминами - тиамин, пиридоксин, никотиновая кислота, аскорбиновая кислота, мезоинозит, рибофлавин, патентенат кальция, фолиевая кислота, биотин; аминокислотами - гликокол, сульфат аденин, гидролезат казеина; регуляторами роста - ауксины (ИУК, ИМК, НУК,2,4-Д), вещества, обладающие ауксиновой активностью (мивал, крезацин), цитокинины (кинетин, 6-БАП, зеатин, 2-изопентил, карталин, дропп, тидизурон); гиббереллины (ГА-3, ГА-4...7); углеводами (сахароза, глюкоза, фруктоза, сорбит); ретардантами (ССС, АБК, РР 333), агаром (бакто-, дивко-агар, гельрайт); фенолами (флороглюцин, хлорогеновая кислота, кумарин).

Состав некоторых сред представлен 30 и более компонентами. Однако, точный состав питательной среды должен быть подобран в зависимости от потребностей разных сортов, а некоторые группы сортов требуют дополнительных добавок для обеспечения достаточно хорошего роста. Обычно питательную среду делают твердой, добавляя агар (0,7-1,0 % массы к объему).

Наибольшее распространение получила среда на основе минеральных солей по Мурасиге-Скугу, обогащенная витаминами, сахарозой и регуляторами роста. Хорошие результаты были получены при использовании сред Ли и де Фоссарда, а также Гамборга. pH используемой среды колеблется от 5,2 до 6; как правило, рН среды 5,6-5,8.

Свободные от вирусов растеньица могут быть получены из меристем выращенных без регуляторов роста, добавление растительных гормонов, и главным образом бензиладенина в количестве 0,1-1мг/л и ауксина, увеличивает количество меристем, которые дают новые растеньица (Martinelli, 1992).

На этапе укоренения практикуется использование менее богатых сред. Укоренение побегов увеличивается, если использовать половинную по макросолям среду МС, однако среда 3/4 МС дает растения лучшего качества (Деменко, 1997). В качестве индукторов ризогенеза хорошо зарекомендовали себя бетта-индолилмасляная, бетта-индолилуксусная, и альфа-нафтилуксусная кислоты. Введение этих препаратов в питательную среду для укоренения является технологическим приемом. Однако их присутствие положительно сказывается на первых этапах ризогенеза, а для развития корневой системы бесполезно или даже вредно. Поэтому при укоренение используют кратковременное замачивание базальных участков побегов в водных растворахпрепаратов с ауксиновой активностью (ИМК) с последующим помещением их на среды без регуляторов роста или обработку пудрой с ауксинами.

На этапе акклиматизации пробирочных растений наиболее эффективным оказалось использование пластиковых индивидуальных контейнеров, заполненных стерильным субстратом, обогащенным минеральными компонентами питания. Это позволяет довести приживаемость до 90-95 % (Высоцкий, 1989).

Похожие статьи




Факторы, влияющие на рост меристем, Выбор растений-доноров, Питательные среды - Анализ проблемы укоренения сортов земляники садовой ex vitro

Предыдущая | Следующая