Экспланты, режим стерилизации, Способы размножения in vitro, Адаптация микрорастений к внешним условиям in vivo, приемы повышения урожайности - Оздоровление и микроклональное размножение роз
Для введения в культуру ткани растений у представителей рода Rosa L. в качестве исходного экспланта берут из верхушки энергично растущего побега, около 20-40 мм длинной апикальные и латеральные почки, не одревесневших или одревесневшие побеги. Для стерилизации вводимых эксплантов применяют различные способы их обработки (Кузьмина, Потапова, 2002).
На начальном этапе почки одревесневших побегов растений розы Rosa L промывали проточной водой с добавлением моющих средств в течение 15-20 минут, затем почки очищали от кроющих чешуй и листьев. Основную стерилизацию проводили двумя способами: 10% раствором доместоса и 5% раствором лизоформина, промывка дистиллированной водой (3 раза). После чего стерильный материал помещали на искусственную питательную среду МС без гормонального состава. Результаты стерилизации эксплантов различными способами показали их различную эффективность. Так, в первом варианте опыта выход стерильных эксплантов не превышал 20%. Во втором варианте выход стерильных эксплантов у данного сорта составил 80% (Акшикова Н. А., 2013).
Способы размножения in vitro
После стерилизации почки высаживают на твердую питательную среду МС, в пробирки и помещают в световую комнату.
На этом этапе некоторые исследователи для лучшего роста микропобегов розы в культуре in vitro рекомендуют различные концентрации 6-БАП в пределах 0,5 - 1,0 мг/л (Кузьмина, Потапова, 2002).
Рост каллусной ткани первичных эксплантов проходил на среде, содержащей помимо основных добавок (сахароза, агар, мезоинозит, тиамин - HCL, пиридоксин-HCL, глицин), а также цитокинин - БАП (0,5 мг/л) и ауксин - НУК (0,15 мг/л). Через 2 недели инкубации образовался морфогенный каллус: у первичных каллусов наблюдали появление почек, одиночных или многочисленных боковых побегов. Их вырезали и переносили на среды содержащие наряду с основными добавками, БАП - 1,0 мг/л, НУК - 0,1 мг/л или БАП - 2,0 мг/л, 2,4 Д - 0,2 мг/л. На обеих средах спустя 2,5 недели отмечалось разрастание старых побегов и новых. У некоторых образцов образовались корни. Через 3,5 недели в части пробирок (около 5%) появились полноценные растения с листьями и корнями.
Микроразмножение почек проводили на среде, включающей на ряду с основными добавками также 0,1 мг/л ИМК и 1,5 мг/л БАП.
Не образовавшие корней побеги переносили на среду, содержащую 0,75 мг/л БАП и 0,05 мг/л ИМК. Через 4 недели наблюдались развитие корней практически во всех условиях.
Используемые в наших исследованиях среды отличались различным содержанием (БАП - 1,0 мг/л, НУК - 0,1 мг/л или БАП - 2,0 мг/л, 2,4 Д -0,2 мг/л). В процессе наблюдений было выявлено, что питательная среда с гормональным составом в БАП - 1,0 мг/л, НУК - 0,1 мг/л дает больший процент образования микроклонов за месяц, в отличии от содержания БАП - 2,0 мг/л, 2,4 Д -0,2 мг/л в питательной среде (Павловская Н. Е., 1998).
Адаптация микрорастений к внешним условиям in vivo, приемы повышения урожайности
Когда у микроклона образовывались корни, его извлекали из стерильных условий и сажали в горшки, заполненные субстратом. Но перед высадкой в почву, регенеранты проходили акклиматизацию во влажной камере на вермикулите в течение двух недель, а затем горшочки помещали в микро теплички, чтобы дать микрорастениям возможность постепенно привыкнуть к естественным условиям. Как только они адаптировались (через 4-6 недель), поддерживали обычные условия выращивания для данного вида роз. В качестве субстрата использовали торфа-песочную смесь 1:3 и велторф. Наибольший процент приживаемости растений-регенерантов наблюдали во втором типе субстрата 90%. После адаптации к комнатным условиям, пересаживали в открытый грунт, где они прекрасно себя чувствуют, растут и цветут (Акшикова Н. А., 2013).
Похожие статьи
-
С целью получения эксплантов для каллусной и опухолевой культур, микроклонального размножения, изучения гормональной регуляции используют стерильные...
-
Выводы - Оздоровление и микроклональное размножение роз
В данной курсовой работе можно сделать несколько выводов. В первой главе этой работы мы познакомились с технологиями и техникой микроклонального...
-
Оборудование биотехнологической лаборатории Для организации биотехнологической лаборатории необходимы просторные изолированные помещения, а также...
-
Введение - Оздоровление и микроклональное размножение роз
Роза клональный эксплант растительный Микроклональное размножение растений - один из способов вегетативного размножения в условиях in vitro. Клональным...
-
Этапы микроклонального размножения растений - Клональное размножение и оздоровление растений
Процесс клонального микроразмножения можно разделить на 4 этапа: 1. Выбор растения-донора, изолирование эксплантов и получение хорошо растущей стерильной...
-
Инициация культуры in vitro - Анализ проблемы укоренения сортов земляники садовой ex vitro
Для подготовки введения в культуру собранные розетки промывают проточной водой, затем с помощью скальпеля отрезают листья и корни. Выделенный...
-
Питательные среды, их состав, и приготовление - Оздоровление и микроклональное размножение роз
В культуре in vitro применяют жидкие и агаризованные (плотные) среды. Жидкие среды используют для культивирования суспензий, каллусов, изолированных...
-
Размножение земляники - Анализ проблемы укоренения сортов земляники садовой ex vitro
В середине лета из пазушных почек первых трех нижних листьев материнского куста развиваются длинные надземные побеги - усы, которые являются...
-
Методы клонального микроразмножения - Клональное размножение и оздоровление растений
Существует много методов клонального микроразмножения, а также различных их классификаций. Согласно одной из них, предложенной Мурасиге в 1977 году,...
-
На эффективность микроклонального размножения влияет масса факторов различной природы. Это физиологические особенности вводимого в культуру растения,...
-
Чтобы получить запланированный урожай дозы минеральных удобрений необходимо систематически совершенствовать и корректировать в зависимости от изменения...
-
Посадочный материал земляники получают на специальных маточных плантациях, которые закладывают в защищенном грунте по определенной схеме на почвенном...
-
Действительно возможный урожай - это урожай, который теоретически может быть обеспечен генетическим потенциалом сорта и основным лимитирующим фактором -...
-
В природе существует два способа размножения растений: половой (семенной) и вегетативный. Оба эти способа имеют как свои преимущества, так и недостатки....
-
Цели и задачи исследования Целью данной работы является разработка метода укоренения микрорастений сортов земляники садовой ex vitro, то есть в...
-
Есть описание около 600 видов малины, произрастающих в условиях умеренного климата. Малина - одна из древнейших ягодных культур, используемых человеком....
-
Технология оздоровления от вирусных инфекций Метод основан на способности растения к регенерации отсутствующих органов. Из отдельных частей почки...
-
Урожайность за счет питательных элементов почвы определяется двумя методами. Для прогноза уровня урожайности для хозяйства в целом, в бригаде, в...
-
Учет урожайности проводился на вариантах, где виды сформировали достаточный травостой для определения продуктивности. На некоторых вариантах невысокая...
-
Решающую роль в формировании урожая играют солнечные лучи, тепло, влага и почвенные условия в комплексе. Взаимоотношение этих факторов отражено в формуле...
-
Лен-долгунец - Linum usitatissimum (elongata) - однолетнее растение. Продуктивной его частью служит тонкий, прямой, светло-зеленый гладкий стебель,...
-
Для организационно экономической оценки был выбран сорт с наибольшим коэффициентом размножения (6). Были учтены процент укореняемости и приживаемости...
-
Лен относится к числу лучших прядильных культур. Его возделывают главным образом для получения натурального волокна, а также семян, из которых отжимают...
-
Обычно состоит из нескольких пассажей. После того, как образуется конгломерат растеньиц, он разделяется на одиночные микророзетки и они помещаются на...
-
Основное преимущество клонального микроразмножения - получение генетически однородного, безвирусного посадочного материала. Предположение о возможности...
-
Заключение, Список используемых источников - Клональное размножение и оздоровление растений
В целом методы клонального микроразмножения, несомненно, имеют ряд преимуществ перед существующими традиционными способами размножения: - получение...
-
Крупа из проса (пшено) обладает высокой питательностью и хорошими вкусовыми качествами (табл. 1). Пшенная мука в чистом виде малопригодна для...
-
Выбор растений-доноров Выбор растений-доноров и времени извлечения меристем являются важными факторами. Меристемы извлеченные после термотерапии растут...
-
Производство экологически безопасной продукции - ключевая задача при экологизации сельскохозяйственной деятельности. Под экологически безопасной...
-
Выводы и предложения - Анализ проблемы укоренения сортов земляники садовой ex vitro
1. По способности к размножению в условиях in vitro можно отметить, что коэффициент размножения зависит от генотипа. Самый высокий коэффициент...
-
Малина многолетний кустарник. Кустарник высотой до 2 м. листья снизу опушенные, сверху почти голые, темно-зеленые, очередные, тройчатые или...
-
Крыжовник - широко распространенная ягодная культура. В народе его называют северным виноградом за крупные от светло-желтой до темно-красной окраски...
-
Наиболее широко используют при работе с КК растворы Хенкса и Эрла, которые готовят на бидистиллированной воде с добавлением различных солей и глюкозы....
-
Ряска - перспективное овощное растение За последние 50 лет, рясковые рассматриваются как чрезвычайно ценный экспериментальный объект для...
-
Удобрения - Пестициды и удобрения
Удобрения - это неорганические и органические вещества, применяемые в сельском хозяйстве и рыболовстве для повышения урожайности культурных растений и...
-
Определение сущности заболевания Туберкулез (лат., англ. -- Tuberculosis) -- тяжелая хроническая болезнь животных многих видов и человека,...
-
Лен-долгунец относится к группе культур, достаточно требовательных к предшественникам. Требовательность льна заключается в необходимости проведения...
-
Допущенные к работе тракторы, комбайны, другие мобильные и стационарные машины, механизмы и оборудование должны быть исправны, опробованы на холостом...
-
Таблица 9 Наименование работ и их последовательность Оптимальные сроки выполнения работ Препараты, норма расхода Состав агрегата 1. Лущение стерни после...
-
Технологические качества льновороха и льносемян в большой степени зависит от своевременного и качественного проведения уборочных работ. На уборку и...
Экспланты, режим стерилизации, Способы размножения in vitro, Адаптация микрорастений к внешним условиям in vivo, приемы повышения урожайности - Оздоровление и микроклональное размножение роз