Способы получения ДНК - ДНК
Методика выделения ДНК зависит от состава и характера используемого источника (ткани животных или растений, микроорганизмы, вирусы). Для лабораторного и промышленного получения ДНК обычно используют вилочковую железу теленка, а также сперму (молоки) рыб, селезенку млекопитающих, ядерные эритроциты птиц.
Препараты ДНК, получаемые обычно в виде натриевой соли ДНК, имеют вид белых волокон. Для сохранения нативных свойств ДНК, обработку тканей и клеток проводят на холоде, по возможности быстро, в условиях, исключающих или уменьшающих действие дезоксирибонуклеаз, как правило, содержащихся в тканях и вызывающих ферментативный распад ДНК. Помимо сохранения нативных свойств, важнейшей задачей является очистка ДНК от других веществ, в первую очередь -- от белков и РНК. В связи с этим методы получения ДНК различаются главным образом способами депротеинизации и очистки препаратов от примесей РНК. Для этих целей применяют обработку клеток и тканей различными детергентами, фенолами и другими депротеинизирующими агентами.
При получении ДНК из животных и растительных тканей чаще всего предварительно изолируют фракцию клеточных ядер или выделяют дезоксприбонуклеопротеиды, отмывая их солевыми растворами в физиологических концентрациях в присутствии ЭДТА или других соединений, связывающих двухвалентные катионы, необходимые для проявления ферментативной активности дезоксирибонуклеаз. После удаления основной массы белков препараты дополнительно депротеинизируют хлороформом с октанолом или фенолом. Нередко их обрабатывают также рибонуклеазами и протеолитическими ферментами.
Для получения ДНК из бактерий обычно пользуются методом Мармура. который заключается в отмывании бактериальной массы 0,15 М Nad, содержащим 0,015 М цитрат натрия, лизисе клеток при 60° и рН 8,0 в 0,15 М NaCI, содержащем ЭДТА и 2% додецилсульфат натрия, депротепнизации их хлороформом, содержащим изоамиловый спирт, переосаждении спиртом, повторной многократной депротеинизации, обработке рибонуклеазой и осаждении изопропиловым спиртом. Этот метод в различных модификациях также успешно применяют для получения ДНК из животных и растительных тканей и изолированных клеточных структур, например, митохондрий.
Похожие статьи
-
Кровь убойных животных - один из важнейших источников высокоценного животного белка. Ее высокая пищевая ценность обусловлена значительным содержанием...
-
ДОЗЫ И СПОСОБЫ ВВЕДЕНИЯ - Инотропные и вазоактивные средства в реаниматологии и интенсивной терапии
В силу особенностей фармакокинетики инотропные и вазоактивные средства при лечении больных с тяжелыми нарушениями кровообращения обычно назначают в виде...
-
Качество сырья плодов облепихи свежих регламентируется ВФС 42-1741-87 "Плод облепихи свежий". Содержание суммы каротиноидов в пересчете на абсолютно...
-
В природе существует два способа размножения растений: половой (семенной) и вегетативный. Оба эти способа имеют как свои преимущества, так и недостатки....
-
Хемосинтез - синтез органических соединений из неорганических веществ с использованием химической энергии, выделяющейся в реакциях окисления...
-
Основные способы приготовления обыкновенных пластырей - Технология производства пластырей
Чтобы получить хороший пластырь, все его ингредиенты должны быть лучшего качества, чистыми и сухими (без воды). Если в каких-либо составных частях,...
-
+ неадекватными раздражителями - адекватными раздражителями - мессенджерами - подпороговыми раздражителями - сверхпороговыми раздражителями Минимальную...
-
Способы образования мезодермы. - Гаструляция и нейруляция
У большинства животных в процессе развития происходит образование и третьего зародышевого листка - мезодермы. Несмотря на многообразие вариаций, и...
-
В последнее время стало очень популярны использование антидепрессантов для повышения и поддержания работоспособности. Эта практика довольно опасна, так...
-
Способы оценки биологического возраста - Биологический возраст и методы его оценки
Поиск таких критериев старения - важнейшая задача геронтологии. Вряд ли можно определить такие тесты только по данным так называемого "поперечного"...
-
Способы передачи возбудителя - Эпидемиологические особенности бешенства
Среди диких хищников бешенство распространяется так же, как среди собак, -- вирус передается при укусах. Пока нет убедительных данных, подтверждающих...
-
Способы существования и типы жизни - Прокариотические организмы и их роль в биоценозах
В зависимости от того, какой источник энергии могут использовать прокариоты, их делят на фототрофофв (источник энергии - свет) и хумотрофов (источник...
-
Отражение как способ функционирования мозга человека - Биосоциальная сущность человека
Отражение - постоянное свойство любой материи, оно возникает при взаимодействии материальных объектов, процессов, потоков информации, следствием чего...
-
Биотехнологическое получение аминокислот - Производство биоферментных препаратов
Биотехнологическое получение аминокислот включает в себя прямую микробную ферментацию, а также микробиологический или ферментативный синтез из...
-
Способы передачи вирусных болезней - Особенности жизнедеятельности вирусов
Капельная инфекция - самый обычный способ распространения респираторных заболеваний. При кашле и чихании в воздух выбрасываются миллионы крошечных...
-
Методичні аспекти профілактики та запобігання пияцтву та впровадження здорового способу життя серед особового складу Повітряних Збройних Сил України У...
-
Самомассаж как способ отдохнуть - Основы методики самомассажа
Самомассаж может стать хорошим отдыхом, это прекрасный способ релаксации! С его помощью действительно можно отдохнуть. Самомассаж выполняют в любом...
-
1) [+]наличие плавательной перепонки между пальцами ног 2) [-]кожное дыхание 3) [-]подвижность шейных позвонков 4) [-]подвижность хвостовых позвонков...
-
Способы повышения морозоустойчивости - Морозоустойчивость растений
Основа решения этой задачи -- селекция морозоустойчивых сортов растений, хорошо адаптирующихся к климатическим условиям данного региона. Следует еще раз...
-
1) [+]венозная 2) [-]капиллярная 3) [-]смешанная 4) [-]артериальная Как называется кровь сазана, обогащенная кислородом? 1) [-]смешанная 2)...
-
Альтернативные способы лечения аллергии, Список литературы - Аллергия
Аллергия диагностика лечение Поскольку аллергия носит не кратковременный, а хронический характер, и ее возникновение не связано с инфицированием, то и...
-
1) [-]на деревьях 2) [-]в почве 3) [-]в организме самки 4) [+]в воде Укажите способ дыхания взрослой лягушки на суше. 1) [-]легочное 2) [+]А и D 3)...
-
1) [-]фазаны, индюки, цесарки 2) [+]голуби, кукушки, орлы 3) [-]куры, гуси, лебеди 4) [-]гагары, журавли, утки Укажите причину, по которой не из всех...
-
Б. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ КЛЕТКИ - Основные положения учения о клетке
1) Методы исследования структурной организации клетки. Световая микроскопия. * Получение четких изображений мелких (недоступных человеческому глазу)...
-
Утрата инфекционности, Серологические методы - Строгие постулаты Коха
Как правило, чувствительность вирионов данного вируса к действию тех или иных инактивирующих веществ определяется специфическими свойствами его белков,...
-
Механические ткани растений - Характеристика отдельных видов растительных тканей
Механические ткани обеспечивают прочность растений, т. е. их способность противостоять воздействию силы тяжести, порывам ветра, дождям и другим факторам....
-
В заключительной части моего реферата, я хочу сказать, что гормоны обладают весьма высокой биологической активностью. Они имеет очень сложную химическую...
-
Воздух - Синантропная флора Дальнего Засвияжья г. Ульяновска
Воздух - важнейшее условие существования растений, которое необходимо для дыхания и своеобразного "воздушного" питания - фотосинтеза. По основному...
-
Энзимотерапия - Использование ферментов в медицинской практике в качестве лекарственных средств
Энзимотерапия - это использование ферментов в качестве лекарственных средств. Использование ферментов в качестве терапевтических средств имеет много...
-
Диагноз и дифференциальный диагноз - Эпидемиологические особенности бешенства
Предварительный диагноз ставят с учетом эпизоотологических и клинических показателей. Принимают во внимание характер эпизоотической ситуации в данной...
-
Вакцины и анатоксины ОФС.1.7.1.0004.15 - Производство биоферментных препаратов
Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на иммунобиологические лекарственные препараты (ИЛП) - вакцины и анатоксины, содержащие компоненты,...
-
Введение, Клетки для тканевой инженерии - Тканевая инженерия в медицине
Одним из направлений биотехнологии, которое занимается созданием биологических заместителей тканей и органов, является тканевая инженерия (ТИ). Тканевая...
-
Вспомогательные зуботехнические материалы - Вспомогательные зуботехнические материалы
Это большая группа различных по физико-химическим свойствам веществ и препаратов, применяемых при изготовлении зубных протезов, но не Составляющих саму...
-
Методы сбора и учета численности летающих насекомых - Изучение лесных беспозвоночных
Существует множество методик лова летающих беспозвоночных животных, однако практически ни одна из них не дает данных о плотности населения животных на...
-
Покровные ткани - Характеристика отдельных видов растительных тканей
Вакуоль клеточный мерисистема рибосома Покровные ткани (первичная - эпидерма, вторичная - перидерма, третичная - корка) защищают органы растений от...
-
Материал и методы исследования - Фауна рыб нижнего течения реки Гайва
Материал для данной работы был собран на р. Гайва Пермского края в весеннее-летне-осенний период с 6 мая по 11 сентября 2015 года, как во время...
-
Методы выявления биопленок - Использование микробных биопленок в промышленности
В настоящее время наиболее надежным методом подтверждения наличия микробной биопленки является специальная микроскопия. В первую очередь это конфокальное...
-
Генетические методы изучения биопленок - Использование микробных биопленок в промышленности
Для выявления генов, участвующих в генетическом контроле любого процесса, используются методы направленного и ненаправленного (инсерционного)...
-
Обмен белков - Питательные вещества
После расщепления белков в пищеварительном тракте образовавшиеся аминокислоты всасываются в кровь. В кровь всасывается также незначительное количество...
-
Геном пластид - Генетика пластид
В 1961 году X. Рис и В. Плаут обнаружили, что участок хлоропласта в одноклеточной водоросли хламидомонады окрашивается положительно по Фельгену. При...
Способы получения ДНК - ДНК