Поліморфізм N34S гена секреторного панкреатичного інгібітору трипсину (SPINK1) у хворих на різні форми гострого панкреатиту
Вступ
Постановка проблеми і аналіз останніх досліджень та публікацій. Одним з основних генетично детермінованих механізмів, які можуть суттєво впливати на активність розвитку автокаталітичного процесу в підшлунковій залозі (ПЗ), є нейтралізуючий вплив секреторного панкреатичного інгібітора трипсину [1-5]. Вказаний пептид складається з 56 амінокислот і відіграє роль специфічного субстрату для трипсину, реалізуючи свій інгібуючий вплив шляхом утворення необоротного зв'язку між серином трипсину і лізином свого активного центру [1, 3, 5, 6, 7].
Ген SPINK1 локується на 5-й хромосомі. При цьому в результаті сучасних генетичних досліджень встановлено, що на третьому екзоні гена SPINK1 може зустрічатися мутація N34S, яка успадковується за аутосомнорецесивним типом [1, 2, 4, 5, 8-10]. Наявність такої трансцизії у носіїв двох патологічних S-алелів супроводжується неспроможністю одного з основних механізмів нейтралізації трипсину і може призводити до надмірної неконтрольованої внутрішньоацинарної активації цього фермента. Очевидно, що наявність наведеного генетично детермінованого патологічного механізму за умов гострого панкреатиту (ГП) може супроводжуватись потенціюванням автокаталітичного ураження тканин ПЗ і, як наслідок, суттєво обтяжувати перебіг захворювання. Одначе вказане питання на сьогодні залишається майже не вивченим.
Окрім того, аналіз літературних джерел щодо особливостей дистрибуції генотипічних варіантів N34S поліморфізму гена SPINK1 у хворих на ГП різних популяційних груп засвідчив суперечливі результати [1, 5, 7, 8]. Це можна пояснити етнічними особливостями розподілу генотипів в осіб різних популяцій та фрагментарністю отриманих даних, які потребують подальшого вивчення та більш чіткої систематизації.
Мета роботи: провести аналіз частоти поліморфізму N34S гена SPINK1 у жителів Чернівецької області, які хворіють на різні форми ГП, та вивчити можливі взаємозв'язки між різними видами генотипу та етіологічними чинниками захворювання.
Матеріали і методи. У дослідженні взяло участь 88 осіб із різними формами гострого панкреатиту, яким після підписання інформованої згоди пацієнта проводили генетичні дослідження. Серед них: 53 (60,23 %) чоловіки та 35 (39,77 %) жінок. Середній вік пацієнтів склав (49,46±1,53) року.
За морфологічними формами ГП хворих поділили на 2 групи: перша група - 27 осіб із гострим набряковим панкреатитом, друга група - 61 особа із гострим некротичним панкреатитом. Окремо проводили додатковий розподіл пацієнтів за етіологічним чинником виникнення захворювання, виділяючи дві основні його форми: біліарний та небіліарний панкреатит. Основними критеріями такого розподілу служили наявність чи відсутність калькульозного холециститу та його ускладнень (холедохолітіаз, холангіт, механічна жовтяниця), внутрішньопротокової біліарної гіпертензії, гіпербілірубінемії.
Алелі поліморфних ділянок третього ек - зону гена SPINK1 вивчали шляхом постановки полімеразної ланцюгової реакції із застосуванням специфічних праймерів: sense 5'- CAATCACAGTTATTCCCCAGAG-3', antisense 5'-GTTTGCTTTTCTCGGGGTGAG-3'. Для дискримінації алелів третього екзону гена SPINK1 використовували ендонуклеазу рестрикції PstI.
Статистичну залежність між величинами для нормально розподілених вибірок перевіряли шляхом визначення критерію Фішера, с2 - критерію за Пірсоном, у т. ч. відповідність розподілу генотипів рівновазі Харді-Вайнберга.
Результати досліджень та їх обговорення
Електрофореграма продуктів ампліфікації наведена на рисунку 1. Довжина ампліфікату N34S поліморфізму гена SPINK1 становила 320 пар нуклеотидів (пн). За наявності в 34 кодоні 3-го екзону нуклеотидної послідовності даного гена аденіну ампліфікат розщеплювався рестриктазою PstI на фрагменти розмірами 320 і 286 пн. У випадку трансверсії A ^ G сайт для рестрикції PstI втрачався.
Дистрибуції генотипів N34S поліморфізму гена SPINK1 у хворих на різні форми ГП наведено у таблиці 1. У більшості обстежуваних виявили наявність сприятливого "дикого" N-алеля ("wild-type", Wt) - 69,32 % (61) осіб, тоді як патологічний "мутантний" S-варіант ідентифікували у 30,68 % (27) випадках. гомозиготний трипсин поліморфізм панкреатит
При цьому гомозиготних носіїв "дикого" NN-генотипу (N34) було 42,05 % (37) осіб, NS-гетерозигот (N34S) - 54,55 % (48) випадків, 3 (3,40 %) пацієнти були гомозиготними носіями мутантного S-алеля (SS-генотип, 34S) (рис. 1). Розподіл генотипів за поліморфним варіантом N34S гена SPINK1 серед обстежених відповідав очікуваній рівновазі Харді-Вайнберга (р>0,05).
При розподілі всіх пацієнтів за етіологічним чинником (табл. 1) виявили, що частота появи NN - та NS-генотипів у хворих на гострий біліарний панкреатит склала 53,85 % (21) та 46,15 % (18) відповідно і статистично не відрізнялась від такої у хворих на панкреатит небіліарного генезу - 32,65 % (16) та 61,23 % (30) відповідно (с2=0,003, р=0,95 та с2=0,68, р=0,4 відповідно).
У хворих на гострий набряковий панкреатит частота виявлення Ш4-генотипу складала 40,74 %
Рис. 1. Електрофореграма продуктів ампліфікації N34S поліморфізму гена SPINKt: 1-2, 4-8 - гетерозиготні носії NS-генотипу; 3 - гомозигота за мутаційним типом (5345-генотип).
Таблиця 1. Фенотипічна характеристика хворих на різні форми гострого панкреатиту залежно від N34S поліморфізму гена SPINK1
Групи хворих |
Генотипи N34S поліморфізму гена SPINK | ||
N34, % (n) |
N34S, % (n) |
34S, (n) | |
Гострий панкреатит, n=88 |
42,05 (37) |
54,55 % (48) |
3,40 (3) |
Біліарний, n=39 |
53,85 (21) |
46,15 % (18) |
0 |
Небіліарний, n=49 |
32,65 (16) |
61,23 % (30) |
6,12 (3) |
Гострий набряковий панкреатит, n=27 |
40,74 (11) |
59,26 % (16) |
0 |
Біліарний, n=15 |
60,00 (9) |
40,00 % (6) |
0 |
Небіліарний, n=12 |
16,67 (2) |
83,33 % (10) |
0 |
Гострий некротичний панкреатит, n=61 |
42,62 (26) |
52,46 % (32) |
4,92 (3) |
Біліарний, n=24 |
50,00 (12) |
50,00 % (12) |
0 |
Небіліарний, n=37 |
37,84 (14) |
54,05 % (20) |
8,11 (3) |
1111 осіб, Ш4Б-генотипу - 59,26 % осіб (16), а гомозиготних носіїв мутантного S-алеля у цій групі пацієнтів не виявили. При аналізі групи осіб із гострим набряковим біліарним панкреатитом встановили, що гомозиготні носії сприятливого "дикого" N-алеля та гетерозиготи зустрічались із частотою 60,00 % (9) та 40,00 % (6) відповідно.
Натомість, у пацієнтів із набряковим ГП небіліарного генезу констатовано тенденцію до домінування NS-генотипу, порівняно з NN-генотипом, частота виявлення яких складала 83,33 % (10) та 16,67 % (2) відповідно. Проте такі відмінності не були вірогідними (c2=2,00, р=0,16).
У хворих на гострий некротичний панкреатит частота виявлення Ш4-генотипу складала 42,62 % (26) осіб, N34S-генотипу - 52,46 % осіб (32), а мутаційного гомозиготного 34S-генотипу - 4,92 % (3) осіб. Водночас у пацієнтів з біліарним та небіларним генезом захворювання частота виявлення генотипів NN - (N34) та NS - (N34S) істотно не відрізнялась: 50,00 % (12) та 50,00 % (11) проти 37,84 % (14) та 54,05 % (20) відповідно (c2=0,001, р=0,97 та c2=0,114, р=0,74 відповідно).
Гомозиготний мутаційний SS-генотип виявлено у трьох осіб вказаної групи. Крім того, в осіб з SS-генотипом ініціація ГП була пов'язана з небіліарним чинником, а його перебіг у всіх трьох хворих характеризувався розвитком поширеного гнійного панкреонекрозу та тяжких його місцевих і системних ускладнень. Враховуючи наведене, на нашу думку, у конкретних випадках однією з основних причин розвитку тяжкого клінічного перебігу ГП був його спадковий характер.
Висновки
- 1. Частота зустрічальності N - і S-алелей N34S поліморфізму гена SPINK1 в обстежених хворих на різні форми гострого панкреатиту відповідає нормальному розподілу для значної більшості європеоїдних популяцій із переважанням сприятливого "дикого" N-алеля. 2. Серед хворих на різні форми гострого панкреатиту частіше зустрічається носійство сприятливого N-алеля (42,05 і 54,55 %), при меншій кількості патологічних SS-гомозигот (3,40 %). 3. Небіліарна форма гострого набрякового панкреатиту невірогідно частіше зустрічається у носіїв мутантного S-алеля: 83,33 % (10) проти 16,67 % (2) осіб, c2=3,546, р=0,060). 4. Розвиток набрякової та некротичної форми гострого панкреатиту як біліарного, так і небіліарного генезу не асоціюється з певним генотипом N34S поліморфізму гена SPINK1. Це свідчить про те, що носійство мутаційного S-алеля не асоціюється з розвитком гострого панкреатиту, тобто не є безпосереднім ініціюючим чинником його виникнення.
Перспективи подальших досліджень. Перспективним є проведення подальшого вивчення генетичних трансверсій у хворих на гострий панкреатит та дослідження їх впливу на характер перебігу захворювання, що дозволить напрацювати нові підходи до оптимізації лікувальної тактики у таких осіб.
Список літератури
- 1. The prevalence of cationic trypsinogen (PRSS1) and serine protease inhibitor, Kazal type 1 (SPINK1) gene mutations in Polish patients with alcoholic and idiopathic chronic pancreatitis / A. Gasiorowska, R. Talar-Wojnarowska, L. Czupryniak [et al.] // Dig. Dis. Sci. - 2011. - Vol. 56. - P. 894-901. 2. Liu J. A Comprehensive study indicates PRSS1 gene is signitcantly associated with pancreatitis / J. Liu, H. Zhang // Int. J. Med. Sci. - 2013. - Vol. 10, N 8. - P. 981-987. 3. Frequency of SPINK1 N34S mutation in acute and recurrent acute pancreatitis / P. Rai, A. Sharma, A. Gupta, R. Aggarwal // Journal of Hepato-Biliary-Pancreatic Sciences. - 2014. - Vol. 21, No. 9. - P. 663-668. 4. Pedigree of a Kindred With Transheterozygous PRSS1 R122C and SPINK1 N34S Mutations / S. Amitasha, C. Deanna, A. Venkata [et al.] // Pancreas. - 2014. - Vol. 43, Iss. 6. - P. 974976. 5. Screening of R122H and N29I Mutations in the PRSS1 Gene and N34S Mutation in the SPINK1 Gene in Mexican Pediatric Patients With Acute and Recurrent Pancreatitis / C. A. Sanchez - наявність генетично детермінованих розладів інтрацелюлярної інактивації трипсину. 6. Ramirez, S. E. Flores-Martinez, A. G. Garcia-Zapien [et al.] // Pancreas. - 2012. - Vol. 41. - P. 707-711. 7. Brand new SPINK1 and CFTR mutations in a child with acute recurrent pancreatitis: a case report / V. Terlizzi, F. De Gregorio, A. Sepe [et al.] // Minerva Pediatr. - 2013. - Vol. 65, No.6. - P. 669-672. 8. Presence of SPINK-1 variant alters the course of chronic pancreatitis / B. Sandhu, P. Vitazka, A. Ferreira-Gonzalez [et al.] // J. of Gastroenterology and Hepatology. - 2011. - Vol. 26. - No. 6. - P. 965-969. 9. Bishop M. Association between this SPINK1 variant and clinically detectable pancreatitis / M. Bishop, P. Xenoulis, J. Steiner // J. Vet. Intern. Med. - 2013. - Vol. 27, No. 3. - P. 427-428. 10. Childhood-onset hereditary pancreatitis with mutations in the CT gene and SPINK1 gene / H. Awano, T. Lee, M. Yagi [et al.] // Pediatr. Int. - 2013. - Vol. 55, No. 5. - P. 646-649. 11. Pedigree of a kindred with Transheterozygous PRSS1 R122C and SPINK1 N34S mutations / A. Sinha, D. Cotsalas, V. Akshintala [et al.] // Pancreas. - 2014. - Vol. 43, No. 6. - P. 974-976.
Анотація
Поліморфізм N 34 S Гена секреторного панкреатичного інгібітора трипсину (SPINK1) у хворих на різні форми гострого панкреатиту. © В. В. Максим'юкя. ВДНЗ "Буковинський державний медичний університет"
"Вивчено частоту мутації N34S гена SPINK1 у хворих на гострий панкреатит. Встановлено, що серед хворих на різні форми гострого панкреатиту частіше зустрічається носійство сприятливого N-алеля, при меншій кількості патологічних SS-гомозигот.
Розвиток набрякової та некротичної форми гострого панкреатиту не асоціюється з певним генотипом N34S поліморфізму гена SPINK1. Це свідчить про те, що носійство мутаційного S-алеля не асоціюється з розвитком гострого панкреатиту, тобто не є безпосереднім ініціюючим чинником його виникнення.
Отримано 26.01.16
Похожие статьи
-
Постановка проблеми і аналіз останніх досліджень та публікацій . Геморой все ще залишається одним із найпоширеніших захворювань людини. За даними ряду...
-
Автодермопластика та вакуумна терапія ран у хворих на синдром діабетичної стопи
На сучасному етапі хірургічне лікування гнійно-некротичних уражень нижніх кінцівок у хворих на цукровий діабет (ЦД) залишається актуальною і не до кінця...
-
Цукровий діабет 2 типу (ЦД 2) характеризується значними гормонально-метаболічними зрушеннями, які охоплюють практично всі ланки обміну речовин в...
-
Біоадаптивне управління (англ. biofeedback -- біологічний зворотний зв'язок (БЗЗ)) -- перспективний напрям сучасної медицини. Це нефармакологічне...
-
Ад'ювантні лікарські засоби - Паліативна допомога при синдромі хронічного болю
Наведені нижче ад'ювантні лікарські засоби можуть або розширювати діапазон дії аналгетиків, або мати самостійну аналгетичну дію. Трициклічні...
-
Екстракт пасифлори протипоказаний при стенокардії, інфаркті міокарда, вираженому атеросклерозі. Не можна поєднувати з прийомом...
-
Ключові слова: обміну речовин хвороби, кверцетин, черезшкірне коронарне втручання, ішемічна хвороба серця. Ішемічна хвороба серця (ІХС) за наявності...
-
ПАТОГЕНЕЗ - Острый панкреатит, отечная форма
Основной теорией патогенеза острого панкреатита является ферментативная. Основным доказательством этой теории является экспериментальное получение...
-
Імунний дисбаланс у патогенезі абдомінального сепсису при деструктивному панкреатиті
Постановка проблеми і аналіз останніх досліджень та публікацій. Абдомінальний сепсис (АС), за даними численних наукових досліджень, залишається одним із...
-
У комплексному лікуванні хворих хронічним гломерулонефритом і пієлонефритом, поряд з медикаментозними засобами і повноцінною дієтою, широко...
-
Тривало, майже протягом усього ХІХ і ХХ ст. і дотепер для нейропсихологічної діагностики ВПФ в англомовній літературі широко використовується тест Струпа...
-
Серед тахіаритмій, які можуть виникати у пацієнтів із серцевою недостатністю, найчастіше зустрічається фібриляція передсердь (ФП) [1, 3]. СН і ФП часто...
-
Факторы популяционной динамики, Инбридинг - Генетические процессы в популяциях
Инбридинг Понятие "инбридинг" широко используется в популяционной генетике при описании особенностей генетической структуры популяций. Случайное...
-
Загальна характеристика засобів фізичної реабілітації при хронічному пієлонефриті, гломерулонефриті Серед основних видів не медикаментозних методів...
-
Холецистит Самым распространенным заболеванием является холецистит, который может быть острым и хроническим. При остром холецистите развивается...
-
Метою фізіотерапії при діагнозах хронічний гломерулонефрит і хронічний пієлонефрит є купирування синдрому. Розглянемо основні методи фізіотерапії, що...
-
Постановка проблеми і аналіз останніх досліджень та публікацій. Хірургічне лікування ускладнених форм синдрому діабетичної стопи (СДС) становить...
-
За допомогою лазерної доплерівської флоуметрії оцінено стан мікрогемодинаміки та ендотеліальної функції у хворих із хронічною ішемією нижніх кінцівок на...
-
Эпикриз, Рекомендации - Хронический панкреатит, стадия обострения
Больная Тарасова Вера Ивановна поступила во 2 ГКБ 29.05. 2011г. При поступлении предъявляла жалобы на тяжесть в левом подреберье, опоясывающие боли в...
-
Для визначення ефективності занять лікувальної гімнастики, відпустці процедур лікувального масажу і фізіотерапії на організм хворих на хронічний...
-
У пацієнтів з комплексною парціальною епілепсією із вторинними генералізованими судомами вміст лептину в сироватці крові після впливу транскраніальними...
-
Психопатологічні, патоперсонологічні та психосоціальні особливості хворих із професійною патологією органів дихання та периферичної нервової системи....
-
Панкреатит. Диетопрофилактика - Биохимия поджелудочной железы
Поджелудочный железа инсулин диабет 1. При затруднении оттока панкреатического сока ферменты поступают не в кишечник, а преждевременно активируются в...
-
КЛИНИЧЕСКИЙ ДИАГНОЗ И ЕГО ОБОСНОВАНИЕ - Острый панкреатит, отечная форма
На основании анамнеза больного, жалоб и результатов дополнительных исследований, полученных при проведении УЗИ органов брюшной полости (увеличение...
-
Пищевод и кардия свободно проходимы, слизистая бледно-розовая, желудок обычных размеров, складки сглажены, атрофичные, слизистая бледно-розовая, отечная....
-
ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ Актуальність теми. Більшість відомих на сьогодні антибіотиків, які успішно використовуються в медицині, ветеринарії і...
-
Полиморфные белки - Методы исследования популяции человека
Изучая генетическую структуру населения определенного региона проводятся исследования генетико-биохимического полиморфизма систем транспортных белков...
-
Україна за підсумком 2014 року експортувала 27 млн ??тонн зернових вантажів. Експорт цих вантажів відбувається через морські порти (95%), з...
-
Основной закон популяционной генетики - Генетические процессы в популяциях
Закон Харди-Вайнберга -- это ключевая закономерность популяционной генетики. Этот закон можно сформулировать следующим образом: в популяции бесконечно...
-
Інтерферонотерапія гострих респіраторних вірусних інфекцій у дітей
Грип та інші гострі респіраторні вірусні інфекції (ГРВІ) за частотою реєстрованих випадків посідають перше місце, досягаючи 95 % у структурі інфекційної...
-
1. Самыми распространенными ферментативными препаратами являются комплексы ферментов желудочно-кишечного тракта (Фестал, Панзинорм форте, Мезим форте,...
-
Фізіологічне значення фосфору - Фізіологічне значення калію і фосфору
Фосфор - другий за важливість елемент мінерального живлення рослин. Поряд із азотом і калієм він часто виступає лімітуючим фактором функціонування...
-
Мікологія як самостійна біологічна наука дістала визнання порівняно недавно, наприкінці 60-х рр. ХХ ст., хоча знання про гриби накопичувалися з античних...
-
Классификация мутаций - Мутация
1. По способу возникновения. Различают спонтанные и индуцированные мутации Спонтанные происходят в природе крайне редко с частотой 1-100 на миллион...
-
Завданнями ЛФК у ранньому післяопераційному періоді є: -- профілактика можливих загальних ускладнень (гіпостатична пневмонія, атонія кишечнику, тромбози...
-
Синдром Кабуки является редким непрогрессирующим генетическим заболеванием, которое характеризуется сочетанием фенотипических признаков. Основные...
-
Вміст стабільних метаболітів оксиду азоту та ендотеліну-1 при різних підтипах ішемічного інсульту
Оксид азоту (NO) відіграє важливу роль у контролі мозкового кровообігу, тромбоутворенні й модулює активність нейронів. NO є посередником у багатьох...
-
Наследование голандрического признака - Генетика человека
Таблица 1.Типы наследования некоторых признаков у человека Аутосомный Х-сцепленный Голандрический Рецессивный Доминантный Рецессивный Доминантный Голубые...
-
На сьогодні в літературних джерелах існують повідомлення щодо певної діагностичної цінності специфічних білків плаценти як материнської, так і плодової...
-
Открытие явления фотоэффекта - Квантовая механика
В 1887 году немецким физиком Г. Герцем и в 1888-1890 годах экспериментально исследован А. Г. Столетовым. Наиболее полное исследование явления фотоэффекта...
Поліморфізм N34S гена секреторного панкреатичного інгібітору трипсину (SPINK1) у хворих на різні форми гострого панкреатиту