Моделирование нормобарической гипоксии in vitro - Антигипоксическое и нейропротекторное действие N-арахидоноилдофамина при моделировании острой гипоксии in vivo и in vintro
Гипоксию In vitro Моделировали на 21-й DIV путем замены на 10 минут нормоксической культуральной среды на среду без кислорода. Для вытеснения кислорода из среды ее насыщали инертным газом аргоном, способным вытеснять кислород из жидкостей за счет большей растворимости по сравнению с кислородом. Химическая инертность аргона обеспечивает адекватные условия для проведения эксперимента. Аргон подавали из баллона по газоотводной трубке с иглой на конце, под давлением 1-1,5 МПа, течение 10 мин в среду, помещенную в герметичный сосуд. Для того, чтобы в сосуде не накапливалось избыточное давление, выше уровня жидкости находился конец второй иглы, соединенной с выводящей газоотводной трубкой.
Концентрация растворенного кислорода в среде определяли методом йодометрического титрования (метод Винклера) (Лурье, 1973). Данный метод основан на способности гидроксида марганца (II) окисляться в щелочной среде до гидроксида марганца (IV), количественно связывая при этом кислород. В кислой среде гидроксид марганца (IV) снова переходит в двухвалентное состояние, окисляя при этом эквивалентное связанному кислороду количество йода. Выделившийся йод оттитровывают раствором тиосульфата натрия в присутствии крахмала в качестве индикатора. При насыщении среды инертным газом содержание кислорода снижалось с 3,26 мл/л (нормоксия) до 0,37 мл/л (гипоксия). Для предотвращения насыщения среды кислородом воздуха, культуры помещали в гипоксическую камеру, представляющей собой пластиковую чашку Петри (Corning) диаметром 100мм с двумя вмонтированными пластиковыми штуцерами для подключения газовых шлангов. Для герметизации нижняя часть чашки Петри проклеена уплотнительной резиной. К первому штуцеру присоединен шланг, который через редуктор соединен с газовым баллоном. Ко второму штуцеру присоединен газоотводный шланг. После замены нормоксической среды на гипоксическую культуру помещали в камеру, после чего в течение 1 мин через камеру пропускали аргон при открытом газоотводном шланге. Затем перекрывали сначала газоотводный шланг, а потом шланг, по которому поступал аргон. В таком положении камера с помещенной в нее клеточной культурой оставалась еще на 9 минут. Суммарное время гипоксичекого заменяли гипоксическую среду на нормоксическую (Ведунова с соавт., 2012, 2013).
Исследуемые вещества добавляли в гипоксическую среду при гипоксии и в течение первых суток после нее. Параметры спонтанной биоэлектрической активности, характеризующие реакцию нейронов на гипоксию, регистрировали сразу после реоксигенации, через 2 часа и каждые 24 часа в течение 7 дней после гипоксии.
Похожие статьи
-
Объект исследования Объектом исследований In vitro Служили первичные диссоциированные культуры клеток гиппокампа, полученные от 18-дневных мышиных...
-
Гипоксия - широко распространенное состояние организма, возникающее как из-за дефицита кислорода во внешней среде, так и при самых различных патологиях,...
-
Острые и хронические повреждения нервной системы, в том числе, травмы, ишемические или воспалительные заболевания, остаются серьезной проблемой...
-
Для имиджинговых исследований функциональной активности по параметру изменений [Ca2+]i, отражающих функциональное состояние кальциевого гомеостаза...
-
Спонтанную биоэлектрическую активность нейронов регистрировали с использованием мультиэлектродной системы MED64 и MEA60 при стандартных условиях...
-
Оценка жизнеспособности клеток, культивируемых в 48-луночных планшетах, проводилась в период нормоксии (21 DIV) и через 1, 3, 7 и 10 суток после...
-
Нейронная сеть мозга является структурно-функциональной единицей, отвечающей за процессы обработки, хранения и воспроизведения информации. Одним из...
-
Поскольку не все эффекты, вызываемые каннабиноидами, можно объяснить активацией CBR-1 и CBR-2, предполагается также наличие других, еще не до конца...
-
Спонтанная биоэлектрическая активность Мультиэлектродные матрицы MED64 и MEA60 Мультиэлектродная система MED64, основанная на технологии плоских...
-
N-арахидоноилдофамин Все агонисты CBR принято подразделять на растительные (фитоканнабиноиды), эндогенные и синтетические. Среди фитоканнабиноидов (рис....
-
CBR-1 представлены на пресинаптических окончаниях ГАМК - эргических, глутаматэргических, холинэргических и норадреналинэргических нейронов, их активация...
-
Взаимодействие агонистов с CBR-1 и CBR-2 приводит к диссоциации сопряженных с ними Gi-белков на б субъединицу и вг димер, которые участвуют в регуляции...
-
Доказательства существования CBR в мозге были получены в середине 80-х годов (Howlett, Fleming, 1984). На сегодняшний день наиболее полно изучено...
-
Каннабиноиды синтезируются и реализуются локально On demand (по требованию). Таким образом, уровень их генерации не является постоянным, а кинетика их...
-
ОСТРЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ КОНЪЮНКТИВЫ - Острые заболевания конъюнктивы
Конъюнктивиты Конъюнктивиты встречаются у 1/3 больных с заболеваниями глаз Классификация По течению конъюнктивиты можно разделить на острые и...
-
Классификация - Лечебные и профилактические мероприятия при гипоксии внутриутробного плода
Гипоксия классифицируется по типу, длительности и течению: 1. По типу: 1.1. Гипоксическая гипоксия, встречается при снижении насыщения кислородом...
-
В каждом организме (животном, растительном или микробной клетке) все время происходят сложные процессы превращения веществ. Велика роль в этих процессах...
-
Для изучения влияния Цп на процессы генерации АФК фагоцитами в условиях in vitro использовали цельную кровь здоровых людей - доноров крови, так как...
-
Этиология и патогенез - Лечебные и профилактические мероприятия при гипоксии внутриутробного плода
Причинами острой гипоксии являются: 1. Неадекватная перфузия крови к плоду из материнской части плаценты (например при нарушении дыхания роженицы) . 2....
-
Возбудитель скарлатины. Хар-ка - Частная микробиология
Семейство-Sreptococacea включает 6 родов опасных для человека: Streptococcus, Aerococcus, Leuconostoc, Pediococcus, Lactococcus. Стрептококки....
-
Менингококки - Частная микробиология
Морфология и биологические свойств. Менингококк относится к роду нейссерий (Neisseria), который включает, помимо менингококка, ряд непатогенных...
-
Ионизационное излучение не воспринимается органами чувств, следовательно, для их обнаружения используют те эффекты, которые визируют излучение на...
-
Первая помощь при ожогах - Сущность ожога
Первая помощь при ожогах направлена на профилактику ожогового шока и нагноения ожоговой поверхности. 1). Прекратить воздействие повреждающего фактора,....
-
Развитие микробиологии определялось конкретными историческими условиями: развитием социально - экономической основы общества, обусловленным ростом...
-
ДИФТЕРИЙНЫЙ КОНЪЮНКТИВИТ - Острые заболевания конъюнктивы
Этиология Возбудитель заболевания - Corynebacterium diphtheriae (палочка дифтерии Клебса-Леффлера). Заболевание возникает на фоне поражения верхних...
-
Опыты по испытанию нового препарата "Биотон" на микробную культуру сальмонелл. Опыты проводилась в городском санитарно-эпидемиологическом центре г....
-
Микроскопический метод исследования предусматривает наблюдение за живыми и убитыми микробами в окрашенном и неокрашенном состоянии. Различают простые и...
-
ГОНОКОККОВЫЙ КОНЪЮНКТИВИТ (ГОНОБЛЕННОРЕЯ) - Острые заболевания конъюнктивы
Классификация Выделяют гонобленнорею новорожденных (заражение происходит при прохождении через родовые пути матери, воспалительный процесс развивается на...
-
Лечение - Острый двухсторонний гайморит
Постельный режим. Жаропонижающие средства ( ацетилсалициловая кислота, амидопирин, анальгин, парацетамол ). Сульфаниламидные препараты ( этазол,...
-
Диагностика, Инструментальное обследование пациентов при ИМ - Острый инфаркт миокарда
Лабораторные методы диагностики инфаркта миокарда: Џ Анализ крови Џ Биохимический анализ крови Џ Кровь на миоглобин Резорбционно-некротический синдром -...
-
Лечение и профилактика - Лечебные и профилактические мероприятия при гипоксии внутриутробного плода
В настоящее время имеется комплекс мероприятий, направленных на улучшение маточного кровотока, маточно-плацентарного кровообращения и улучшение...
-
Название анестезии и показания Методика выполнения Критерий самоконтроля Мандибулярная анестезия Показания: Блокада нижнеальвеолярного и язычного нерва у...
-
Обезболивание в современной стоматологии представляет собойкомплекс психопрофилактических и медикаментозных воздействий, направленных наснижение или...
-
Одним из представителей РОФ третьего эшелона является Цп - исключительно активный гликопротеин 2 - глобулиновой фракции сыворотки крови человека и высших...
-
РОФ - функционально разнородная группа белков, способных быстро изменять свою концентрацию при различных нарушениях гомеостаза независимо от природы и...
-
Диагностика - Лечебные и профилактические мероприятия при гипоксии внутриутробного плода
При диагностике гипоксии необходима комплексная оценка результатов различных методов исследований. Основными методами исследования гипоксии плода...
-
Строгие постулаты Коха - Строгие постулаты Коха
Каковы же те основные положения, сформулированные Робертом Кохом (1843-1910), которых должен придерживаться микробиолог при каждом обнаружении...
-
Биотехнологическая стадия - Производство биоферментных препаратов
Основной стадией является собственно биотехнологическая стадия, на которой с использованием того или иного биологического агента (микроорганизмов,...
-
ВВЕДЕНИЕ Близнецовый психогенетический наследственность генотип Психогенетика - наука о наследственности и изменчивости психических свойств, возникшая на...
-
Комбинированное использование лечебно-диагностических систем в эндоскопической хирургии
В настоящем литературном обзоре обсуждается ряд вопросов, посвященных использованию криохирургического способа в экспериментальной и клинической...
Моделирование нормобарической гипоксии in vitro - Антигипоксическое и нейропротекторное действие N-арахидоноилдофамина при моделировании острой гипоксии in vivo и in vintro