Метод гибридизации - Перспективная наука геномика

Гибридизация - метод выделения специфических последовательностей нуклеотидов. При нагревании водного раствора ДНК до 100оС и доведения рН до 13 происходит денатурация ДНК - диссоциация на 2 цепи, но если затем выдержать раствор ДНК при 65о происходит ренатурация (гибридизация) - восстановление структуры двойной спирали. При этом могут связаться нити любой комплиментарной последовательности: ДНК-ДНК, РНК-РНК, ДНК-РНК. Метод гибридизации основан на гибридизации определенного чистого одноцепочечного фрагмента ДНК, комплиментарной последовательности (ДНК-зонд), которую необходимо обнаружить (например с мутацией, кодирующей заболевание) с ДНК, выделенной из клеток, человека, предположительно, имеющего рецессивный признак заболевания. В случае, если гибридизация проходит успешно, значит тест положительный.

В медицине используют ДНК-зонды иммобилизированные на чипах с флуоресцентными метками. Эти ДНК-зонды расположены в определенном порядке. При спаривании последовательности ДНК образца и комплиментарной последовательности ДНК зонда появляется флуоресцентная окраска. Такие ДНК-чипы можно применять для комплексной диагностики инфекционных заболеваний, наследственных дефектов, установления экспрессии тех или иных генов.

Похожие статьи




Метод гибридизации - Перспективная наука геномика

Предыдущая | Следующая